一、文献与摘要(NO.19)（论文文献综述）
吴依琳[1]（2021）在《芳纶/不锈钢纤维基核壳结构纳米复合织物的制备》文中研究表明电子产品的日益普及使得电磁污染现象愈发严重,电磁屏蔽织物的研发逐渐成为人们关注的热点之一。金属纤维力学性能优异,导电性能良好,被广泛用于信号传输、防静电和电磁屏蔽防护等领域。此外,核壳结构纳米微粒由于糅合多组份粒子的多重复合性能,成为纳米材料研究热点之一。本课题将核壳结构纳米材料与金属纤维织物相结合,制备出具有电磁屏蔽功能的纳米复合织物,主要研究内容如下:（1）Fe3O4@Zn O核壳结构纳米微粒的制备采用溶剂热与溶胶-凝胶法制备Fe3O4@Zn O核壳结构纳米微粒。以SEM、TEM、HRTEM、FT-IR、XRD、EDS和DLS表征产物,运用半导体参数测试系统、VSM与磁导率计分别测试产物的电、磁性能。结果表明:成功制备的纳米微粒呈微球结构,其核层Fe3O4微球的主体粒径为413.5 nm,饱和磁化强度达79.93 emu·g-1,剩磁与矫顽力分别低至1.59 emu·g-1和17.01 Oe,具有良好软磁性能。此外,随着Zn O壳层厚度增大,纳米微粒饱和磁化强度由62.38 emu·g-1降至23.30 emu·g-1,相对磁导率由1.142 H·m-1降至1.087 H·m-1,但其电导值由3.54×10-7 S增加至16.9×10-7 S。（2）芳纶/不锈钢纤维混纺织物的制备采用芳纶/不锈钢纤维混纺纱制备机织物,研究纱线混纺比、组织结构和经、纬密度对织物屏蔽性能的影响,测试其综合性能。结果表明:随着不锈钢纤维含量增加,织物屏蔽效能（SE）达50 d B。在三原组织中,平纹织物屏蔽性能最好。当织物经/纬密度增大,屏蔽性能随之提高。织物阻燃性能符合阻燃防护服用织物B1级考核标准;具有良好的拉伸性能,断裂强力高达2 030 N;具有优异的耐洗性,经20次皂洗后,织物SE值最多仅下降3 d B,变色与沾色牢度均达4-5级。（3）芳纶/不锈钢纤维基核壳结构纳米复合织物的制备以芳纶/不锈钢纤维织物为基布,核壳结构Fe3O4@Zn O为功能体,制备具有电磁屏蔽性能的复合织物。研究涂层浆料分散稳定性,以及纳米微粒含量、Zn O壳层厚度与涂层厚度对复合织物电磁屏蔽等性能的影响。结果表明:涂层浆料分散性良好,静置15 min后未出现沉淀,涂覆后能均匀分散在织物表面。复合织物在低频段（0.3～100MHz）SE值均可达40 d B以上,满足工业用电磁屏蔽织物通用技术条件标准。随着纳米微粒含量增加,复合织物屏蔽性能提高,其SE值可达48 d B。Zn O壳层厚度增加时,织物在低频范围内的屏蔽性能稍有下降,在高频范围有所提升。当测试频率<2200 MHz时,复合织物SE值随着涂层厚度增加而提高,频率>2 200 MHz时,反而有所下降。复合织物具有良好的阻燃性能;其拉伸性能有所提升;具有良好的耐洗性;但透气性降低。本文阐明了核壳结构纳米微粒对芳纶/不锈钢纤维混纺织物电磁屏蔽性能的影响机理,实现了芳纶/不锈钢纤维混纺织物与核壳结构纳米功能体的有机复合,提高了不锈钢纤维织物在低频范围内的屏蔽性能,为电磁屏蔽材料的工程化应用提供理论依据和实践指导。
李莉艳[2]（2021）在《低血糖对老年2型糖尿病患者应激激素水平及认知功能的影响》文中研究表明研究目的探讨老年2型糖尿病患者不同程度低血糖前后相关激素水平变化及其对认知功能的影响。研究方法1.研究对象与分组1.1研究对象:入选92例住院期间发生低血糖的标准T2DM患者。1.2病例分组:年龄≥60岁为老年组（EDM）、年龄<60岁为非老年组（NEDM）。EDM组57例,男性29例,女性28例,平均年龄为（67.211±5.502）岁。NEDM组35例,男性15例,女性20例,平均年龄为（50.229±6.752）岁。3.0mmol/L<血糖≤3.9mmol/L为轻度低血糖组（简称HE1组）,血糖≤3.0mmol/L为中、重度低血糖组（简称HE2组）。2.资料采集2.1正序采集法:对入选患者分别采集一般临床资料,生化指标,相关基础激素水平的测定:甲状腺激素（FT3、FT4、TSH）;胰高血糖素（GLU）;儿茶酚胺激素（AD、NAD、DPO）;生长激素（GH）;皮质醇（CORT）;胰岛素（INS）、C肽（C-P）;RAS系统（REN、AII、ALD）,采用简易智能精神智能精神状态检查表（MMSE）或蒙特利尔认知评估中文版（MoCA）平卧位进行认知功能的评估。当入选病例发生低血糖（血糖≤3.9mmol/L）时,立即监测血压（SBP、DBP）、心率（HR）,低血糖纠正后30分钟后复测上述激素、心电图及认知功能的评估。2.2倒序采集法:以低血糖（血糖≤3.9mmol/L）入院且符合研究病例入选标准的患者,监测HR、SBP、DBP,低血糖纠正后测相关应激激素（同上）、心电图及认知功能的评估。待此患者血糖稳定时,复测相关基础激素、心电图及认知功能的评估。研究结果1.一般资料及生化指标:EDM组低血糖既往史高于NEDM组（P=0.013）;腰围低于NEDM组（P=0.011）。HE1组中EDM组腰围低于NEDM组（P=0.004）。EDM组中HE1组:文化水平高于HE2组（P=0.008）,舒张压高于HE2组（P=0.013）。HE1组中EDM组舒张压高于NEDM组（P=0.026）。EDM组尿酸高于 NEDM（P=0.014）。HE2组中 EDM 组 TC、LDL-C 低于 NEDM 组（P=0.016;P=0.028）。2.基础与低血糖纠正后相关激素1)EDM 与 NEDM 比较:EDM 组 bFT3、bFT4、p30’FT3、p30’FT4 较 NEDM 组低,分别为:（2.772±0.996）pmol/L vs（3.566±1.29）pmol/L,P=0.001;（11.339±5.546）pmol/L vs（14.68±3.81）pmol/L,P=0.001;（3.315±1.045）pmol/L vs（4.112±1.437）pmol/L,P=0.006;（10.549±5.567）pmol/L vs（13.128±3.846）pmol/L,P=0.010。EDM 组 bBPO、p30’BPO 高于 NEDM 组,分别为:（60.511±16.177）pg/mL vs（52.595±13.458）pg/mL,P=0.0001;（81.975±51.289）pg/mL vs（53.014±13.628）pg/mL,P=0.0001。NEDM 组 p30’AD 升高幅度较 EDM 组显着,P=0.001;p30’BPO升高幅度低于EDM组,P=0.026。2)发生 HE1 的 EDM 与 NEDM 比较:EDM 组 bFT3、bFT4、p30’FT3、p30’FT4均低于 NEDM 组分别为:（2.843±1.039）pmol/L vs（3.832±1.344）pmol/L,P=0.002;（11.402±5.805）pmol/L vs（15.007±3.952）pmol/L,P=0.010;（3.287±1.042）pmol/L vs（4.2±1.61）,P=0.019;（10.669±5.646）pmol/L vs（13.79±3.716）pmol/L),P=0.012。EDM 组 bREN、p30’REN 低于 NEDM 组,P<0.05;EDM组bAII、p30’AII高于NEDM组,P<0.05,具有统计学意义。3)发生 HE2 的 EDM 与 NEDM 比较:EDM 组 bDPO、p30’DPO、p30’INS 值均高于 NEDM 组分别为:（64.484±15.814）pg/mL vs（54.779±12.905）pg/mL,P=0.015;（85.408±61.379）pg/mL vs（55.285±13.263）pg/mL,P=0.007;（28.208±36.428）uIU/mL vs（9.77±5.531）uIU/mL,P=0.033。EDM 组 bREN、p30’REN 低于 NEDM 组;bAII、p30’AII 高于 NEDM 组,P<0.05,有统计学意义。NEDM 组 p30’AD 升高幅度较 EDM 组显着,（54.77±41.584）pg/mL vs（13.8± 12.493）pg/mL,P=0.009。3.认知功能（bMMSE、p30’MMSE、bMoCA、p30’MoCA）EDM 组 bMMSE 低于 NEDM 组,（26.351±3.568）分 vs（28.2±2.495）分,P=0.004。发生 HE1 的 EDM 组 bMMSE、p30’MMSE 低于 NEDM,（P=0.020;P=0.022）。发生HE2的NEDM组p30’MMSE降低幅度较EDM组显着（2.818±2.136）分vs（0.333±3.215）分,P=0.028。NEDM 组中 HE2 组 p30’MMSE 降低幅度较 HE1组显着,P=0.04。bMoCA、p30’MoCA在各组间比较,P>0.05,无统计学意义。研究结论1.老年T2DM患者发生低血糖的危险因素:低血糖既往史、高尿酸血症、舒张压增高;文化水平低、糖尿病病史长、血脂异常者易发生中、重度低血糖。2.老年T2DM组患者低血糖纠正后应激激素较非老年组变化不明显;尤其是发生中、重度低血糖时,老年组应激激素水平升高值明显低于非老年组。3.老年T2DM患者基础认知功能评分低于非老年组,单次轻、中度低血糖对老年组认知功能短时间内无显着影响;中、重度低血糖可一定程度降低非老年组的认知功能。
田玉环[3]（2021）在《基于液质联用技术的雷公藤属制剂化学成分鉴定与比较》文中研究表明目的:采用液质联用技术鉴定市售雷公藤属制剂中化学成分,并对其成分进行比较。方法:首先通过针泵进样研究雷公藤属制剂中10个代表性成分的质谱裂解规律,之后采用液质联用化合物常规鉴定方法,辅以分子网络技术鉴定雷公藤属制剂中化学成分,最后利用代谢组学数据处理技术对92个市售雷公藤属制剂进行比较。采用超高效液相色谱-四级杆飞行时间串联质谱联用（UHPLC-QTOF-MS/MS）仪,电喷雾离子源,正负离子模式分别检测,ACQUITY UHPLC HSS T3色谱柱,0.1%甲酸水-乙腈流动相系统进行梯度洗脱。将采集的质谱数据与自建的化合物质谱信息库进行比对,进行化合物的常规鉴定;将采集的质谱数据经MSConvert软件进行格式转化,利用GNPS平台和Cytoscape 3.7.1软件,构建并可视化分子网络,根据网络中已知成分的结构推断网络中相邻节点代表的化合物结构,完成分子网络鉴定。原始数据经Progenesis QI峰对齐等预处理后,采用PCA、Student’s t test与OPLS-DA方法对三种市售雷公藤属制剂（共92个）中成分进行比较,寻找共有成分与差异成分。结果:总结了雷公藤属制剂中10个代表性成分（4个二萜、4个三萜和2个生物碱）的质谱裂解规律;共发现了雷公藤属制剂中103个成分,鉴定了其中70个,包括常规鉴定63个和分子网络鉴定7个。PCA分析结果可知,92个雷公藤属制剂中,雷公藤片、昆明山海棠片和大部分雷公藤多苷片样品聚为一类,而雷公藤多苷片分为三类;三种雷公藤属制剂中成分较为相近,包括雷公藤甲素、雷公藤红素、雷公藤福定、雷公藤次碱等;而不同厂家的雷公藤多苷片中成分相差很大,包括雷公藤甲素、雷公藤吉碱、雷公藤次碱、去甲泽拉木醛等。结论:本研究以雷公藤属制剂中生物碱、二萜以及三萜类的质谱裂解规律研究为基础,采用液质联用常规鉴定方法和分子网络技术对雷公藤属制剂中化学成分进行了鉴定,并对市售雷公藤属制剂中成分进行了比较,为雷公藤属制剂的质量控制和药效物质的阐明提供了基础。
吴俊[4]（2021）在《m6A修饰在系统性红斑狼疮发病中的作用研究》文中研究指明研究背景系统性红斑狼疮（systemic lupus erythematosus,SLE）是一种复杂的慢性自身免疫性疾病,由自身免疫介导,以多种异常的自身抗体产生,多系统和多器官受累,临床表现多样化为主要疾病特点。SLE患者的预后较差,生存质量低,病死率较高,发病率攀升,多侵害育龄期女性。然而,SLE的发病机制至今尚未明确。遗传因素研究为揭示SLE的病理机制做出了巨大努力,但仍不足以解释SLE复杂的临床表现和治疗难题。近些年,表观遗传学修饰为探索SLE复杂的机制、诊断、治疗和预防提供了新思路。多种表观遗传机制在SLE中发生,如DNA甲基化修饰介导淋巴细胞发育,非编码RNAs调控免疫细胞,染色质重塑和组蛋白修饰等。这些表观遗传学调控在不改变任何DNA序列前提下,使基因功能发生可遗传变化,最终导致疾病表型发生改变。与DNA修饰和蛋白质修饰一样,发生在RNA水平上的转录后基因表达调控机制——N6-甲基腺苷（N6-methyladenosine,m6A）修饰被扰乱后,可能导致RNA表达异常。m6A修饰是指在RNA腺嘌呤第六位的氮原子上发生了甲基化,并调控其基因表达。该种修饰是人类m RNA中广泛存在的一种修饰方式,由特定的甲基转移酶催化形成,在去甲基化酶催化下去除修饰,并在识别蛋白读取m6A修饰所蕴含的信息下,把修饰信息转化为功能信号。在这些m6A甲基化酶的共同作用下,使RNA发生甲基化和去甲基化的动态变化,从而调节机体的各种生物学功能。m6A修饰位点主要分布在转录起始、基因内部编码区和3’-UTR等重要功能区域。已有研究表明,m6A修饰参与细胞代谢调控、胚胎干细胞分化、昼夜节律和细胞凋亡等多种生物学过程。越来越多的证据提示,m6A修饰在免疫应答调控机制和炎症调控网络上被认为是T细胞稳态、细菌或病毒感染后免疫反应的重要调节因子。在SLE中,ALKBH5去甲基化酶已被报道是炎症反应标志物,YTHDF2识别蛋白与SLE疾病活动度有关,但仍需要深入探讨m6A修饰在SLE疾病中的作用机制。m6A修饰在疾病过程,乃至疾病治疗和预后都有可能扮演着重要角色,有望成为治疗和预防疾病的新干预靶点。然而,m6A修饰在SLE中的研究仍十分有限,需要进一步研究。目的借助甲基化RNA免疫共沉淀结合高通量测序（Methylated RNA Immunopre-cipitation sequening,Me RIP-seq）技术建立SLE疾病m RNA的m6A修饰谱和表达谱,初步筛选m6A修饰相关m RNAs,并进行人群验证。对差异表达的m6A修饰相关m RNAs进行T细胞相关功能研究,初步揭示m RNA的m6A修饰在SLE疾病过程中的作用。在建立的SLE疾病m RNAs表达谱中筛选目前已经报道的m6A甲基化酶,并选择m6A甲基转移酶进行人群验证。对差异表达的甲基转移酶进行功能研究,初步揭示m6A甲基转移酶在SLE疾病中的作用及其机制。方法本课题采用的是病例对照设计,研究共分四个阶段:（1）第一阶段是建立SLE疾病中m RNAs的m6A修饰谱和表达谱在3例新发未服药的SLE患者和3例匹配的对照外周血单个核细胞（peripheral blood mononuclear cell,PBMC）中利用Me RIP-seq建立m RNAs的m6A修饰谱和表达谱。对差异表达和差异修饰的m RNAs进行GO富集分析（Gene Ontology,GO）和KEGG富集分析（Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG）以及关联分析,筛选4个潜在的m6A修饰相关m RNAs,即IFIT5、CSF3R、SP140和IFIH1。在表达谱中筛选目前已经报道的m6A甲基化酶,从中找出m6A甲基转移酶（METTL3、METTL14、METTL16和WTAP）。（2）第二阶段SLE患者与对照PBMC中m6A修饰相关m RNAs和甲基转移酶表达验证借助实时定量聚合酶链反应（quantitative Real-time Polymerase Chain Reactionq,q RT-PCR）技术,在108例SLE患者和110例对照的PBMC中进行4种m6A修饰相关m RNAs（IFIT5、CSF3R、SP140和IFIH1）和4种m6A甲基转移酶（METTL3、METTL14、METTL16和WTAP）的基因表达水平验证;结合临床信息,对差异表达的基因与SLE的临床表现、实验室指标和药物治疗等进行关联分析;借助免疫印迹实验（western blot,WB）技术,在40例SLE患者和40例对照PBMCs中对差异表达的IFIT5和CSF3R以及甲基转移酶METTL3的蛋白水平进行验证。（3）第三阶段SLE患者与对照T细胞中m6A修饰相关m RNAs和METTL3表达验证借助q RT-PCR技术和WB实验在独立重新收集的32例SLE患者和32例对照T细胞中对在PBMC中差异表达的IFIT5、CSF3R和甲基转移酶METTL3的基因表达水平和蛋白水平进行T细胞验证;结合临床信息,分析了IFIT5、CSF3R和METTL3的表达水平与SLE临床特征和药用使用的相关性。（4）第四阶段细胞实验验证m6A修饰相关m RNA和METTL3对SLE患者T细胞功能的影响选用p LKD-CMV-EGFP-2A-Puro-U6-sh RNA干扰载体构建了IFIT5干扰的Jurkat细胞株,用p LKD-CMV-EGFP-2A-Puro-U6-sh RNA干扰载体构建了METTL3干扰的Jurkat细胞株,用p SLenti-EF1-EGFP-F2A-Puro-CMV-METTL3-WPRE过表达载体构建了METTL3过表达的Jurkat细胞株。借助流式细胞仪检测技术,在Annexin V-PE和7-Amino-Actinomycin D双染色后检测IFIT5沉默、METTL3沉默和过表达后分别对Jurkat细胞凋亡的影响;用EDU检测IFIT5沉默、METTL3沉默和过表达后分别对Jurkat细胞在0 h、6 h、12 h和24 h时对细胞周期的影响。结果（1）SLE疾病中m RNA表达谱和m6A修饰谱分析本课题通过Me RIP-seq建立了SLE疾病m RNA的表达谱和m6A修饰谱,发现SLE中m6A甲基化水平低于对照组。SLE病例组与对照组均能检测到peaks峰的基因有6293个,有2137个差异peaks分布在1943个基因中,这些peaks峰集中分布在3’UTR和CDS交界处。在SLE病例中预测到了经典的Motifs（RRACH,R=A/G,H=A、T、C）。差异基因与差异peak关联分析后,从中筛选4个潜在的m6A修饰相关的m RNAs（IFIT5、CSF3R、SP140和IFIH1）进行验证。另外,在SLE疾病中发现m6A修饰酶共20种,其中验证了m6A甲基转移酶（METTL3、METTL14、METTL16和WTAP）。（2）SLE患者与对照PBMC中m6A修饰相关m RNAs和甲基转移酶表达情况在扩大样本人群的PBMC中验证发现,与对照组相比,CSF3R和IFIT5的表达水平和蛋白水平在SLE患者中存在统计学差异,其中CSF3R表达水平和蛋白水平均下调（均有P<0.05）,IFIT5的表达水平和蛋白水平均上调（均有P<0.05）。与临床信息的关联研究结果显示,在SLE患者白细胞减少时,IFIT5的表达水平上调（Z=-2.557,P=0.011）,在抗SSB抗体阳性时表达降低（Z=-2.357,P=0.018）,在患者服用羟氯喹药物组表达水平升高（Z=-2.913,P=0.004）。CSF3R的表达水平与SLE患者ESR水平呈负相关（rs=-0.217,P=0.042）。另外,与对照相比,4种m6A甲基转移酶（METTL3、METTL14、METTL16和WTAP）的表达水平在SLE患者中均表达下调（均有P<0.05）。其中,METTL16表达水平在SLE患者出现蛋白尿时降低（Z=-1.966,P=0.049）;WTAP表达水平在SLE患者白细胞减少时升高（Z=-2.049,P=0.040）且在患者出现抗小核抗体（anti-nucleosome antibody,Anu A）阳性时也升高（Z=-1.992,P=0.046）;METTL3表达水平与SLE患者的CRP大小呈负相关（rs=-0.223,P=0.036）;METTL3与WTAP的表达水平与患者使用糖皮质激素有关（均有P<0.05）;METTL14和METTL16的表达水平与SLE患者服用羟氯喹药物均存在统计学关联（均有P<0.05）。为了进一步验证甲基转移酶的功能,我们选择METTL3进一步验证。WB验证结果显示,METTL3在SLE患者PBMC中的蛋白水平比对照低。（3）SLE患者与对照T细胞中m6A修饰相关m RNAs和METTL3表达情况T细胞验证发现,与对照相比,IFIT5的表达水平和蛋白水平在SLE患者中依然是上调（均有P<0.05）;CSF3R的蛋白水平在SLE患者中依然下调（P<0.05）。与临床信息关联研究结果显示,CSF3R的表达水平与SLE患者白细胞减少存在关联（Z=-2.014,P=0.044）,同时与C3补体水平呈负相关（rs=-0.400,P=0.028）。IFIT5表达水平在SLE患者出现脓尿时升高（Z=-2.590,P=0.010）,还与SLE患者疾病活动度呈正相关（rs=0.388,P=0.028）。与对照相比,METTL3在T细胞中的表达水平和蛋白水平仍然在SLE患者中下调（均有P<0.05）。与临床信息关联分析结果显示,METTL3在SLE患者T细胞中的表达水平与抗ds DNA抗体存在统计学关联,在患者抗ds DNA抗体升高时表达水平降低（Z=-2.439,P=0.015）,抗SSB/La阳性时表达水平同样降低（t=3.181,P=0.007）,同时与SLE患者补体C3和C4水平均呈正相关（C3,rs=0.496,P=0.004;C4,rs=0.430,P=0.014）。（4）差异表达的m6A修饰相关m RNA和METTL3对T细胞的影响细胞实验结果显示,Jurkat细胞株慢病毒感染效率达到90%。与阴性对照相比,IFIT5基因干扰后Jurkat细胞凋亡比例上升（13.6%vs 24.0%）,细胞增殖能力下降。与阴性对照相比,METTL3基因沉默后加速Jurkat细胞凋亡,尤其是细胞早期凋亡（21.2%vs 44.0%）,同时Jurkat细胞增殖能力明显受到抑制;METTL3过表达后,Jurkat细胞凋亡速度变缓（18.6%vs 9.56%）且细胞增殖能力增强。结论（1）本课题发现,与对照相比,SLE疾病中m6A甲基化水平降低。m6A修饰peaks峰主要集中在终止密码子附近,同时在SLE病例中发现了经典的甲基化结合位点Motifs。研究初步揭示了m6A修饰可能参与SLE的疾病过程。（2）CSF3R和IFIT5在SLE中明显异常表达,其中IFIT5干扰后Jurkat细胞凋亡比例上升且细胞增殖能力下降。研究初步发现m6A修饰相关的m RNAs可能影响T细胞稳定性,但其中具体的调控机制仍需进一步研究。（3）本课题发现,SLE疾病中存在多种m6A甲基化酶,其中包括甲基转移酶、去甲基化酶和识别蛋白,因此m6A修饰可能动态调控SLE的疾病过程。甲基转移酶在SLE疾病中均呈现表达下调,其中METTL3与SLE患者临床指标和治疗药物均存在关联。对METTL3基因干扰和过表达后发现,METTL3表达下调会促进Jurkat细胞凋亡,抑制T细胞增殖能力。METLL3和其它差异表达的m6A甲基化酶在SLE疾病中的作用及其机制值得更深入探讨。
曹越越[5]（2021）在《吉西他滨治疗转移性乳腺癌患者疗效与临床病理特征和PROM2表达的相关性研究》文中进行了进一步梳理背景和目的乳腺癌是当今世界发病率最高的恶性肿瘤,是女性癌症死亡的最主要原因之一。转移性乳腺癌（metastatic breast cancer,MBC）治疗的主要目的是缓解患者症状、提高患者生活质量和延长患者生存期。吉西他滨目前被广泛应用于转移性乳腺癌的多线治疗中,但患者之间的疗效存在明显差异,分子标志物对疗效的预测作用也仍在探索中,PROM2在乳腺癌组织中表达上调,且可能与吉西他滨耐药相关。因此,本研究旨在探究转移性乳腺癌患者临床、病理特征以及PROM2表达与吉西他滨疗效的相关性。方法本研究回顾性纳入了2015年5月至2020年5月共171例在安徽医科大学附属安徽省立医院接受吉西他滨治疗的转移性乳腺癌患者,研究终点是无进展生存期（progression-free survival,PFS）。（1）收集患者的临床特征,包括年龄、远处转移部位及数量等;疾病的病理特征,包括激素受体（hormone receptor,HR）表达情况、HER-2表达情况、Ki-67指数等;既往是否接受过蒽环类、紫杉烷类、放疗等治疗;吉西他滨的用药方案及治疗线数等信息。临床病理因素通过单因素回归分析筛选后纳入多因素等比例风险Cox模型中,以控制基线混杂因素并确定与疗效相关的因素,绘制Kaplan-Meier生存曲线,应用log-rank检验分析组间PFS差异。（2）通过生物信息学分析TCGA数据库中乳腺癌和癌旁组织中PROM2的表达情况,并分析其表达与乳腺癌患者生存期的关系。（3）利用免疫组织化学染色方法检测171例患者中的28例石蜡包埋福尔马林固定的乳腺癌组织样本中PROM2蛋白的表达情况,并分析其表达与患者临床病理特征以及吉西他滨治疗的PFS的相关性。结果本研究中171例接受吉西他滨治疗的转移性乳腺癌患者的中位PFS（median PFS,m PFS）为136天（范围20-1191天）。（1）单因素和多因素分析结果表明,吉西他滨治疗前患者存在骨转移（P=0.017）和吉西他滨在早期应用（二线方案:P=0.003;三线方案:P<0.001;三线后方案:P<0.001）与较长的PFS有一定的相关性,且单纯骨转移患者相比骨和内脏转移的患者PFS较长（P=0.034）。（2）本研究发现吉西他滨单药与联合用药的PFS无显着差异,仅在内脏转移的患者中联合组相比单药组PFS较长（P=0.037）。（3）生物信息学分析显示TCGA数据库中乳腺癌组织的PROM2表达明显高于癌旁组织,且其高表达与较短的总生存期（overall survival,OS）相关,但与无病生存期（disease-free survival,DFS）无显着相关性。（4）本研究中的28例行PROM2免疫组化分析的乳腺癌患者组织样本中,有17例为高表达,11例为低表达,高表达组相比低表达组PFS较短（77天对334天,P=0.006）,两组之间DFS无显着统计学差异（368天对502天,P=0.398）。结论吉西他滨治疗转移性乳腺癌在骨转移患者和早期应用时可获益,联合用药与单药方案在骨转移及各治疗线亚组中疗效相似,仅内脏转移的患者联合用药可获益。PROM2高表达乳腺癌患者的吉西他滨疗效较差。
张敏新[6]（2020）在《基于血清药物化学及血清药理学的雷公藤多苷片肾毒性谱毒关系研究》文中研究表明雷公藤为卫矛科雷公藤属植物雷公藤Tripterygium wilfordii Hook.f.的干燥去皮根,是迄今为止免疫抑制作用最可靠的中药之一。雷公藤制剂是以雷公藤提取纯化后的脂溶性混合物为原料制成的一种中药制剂,现市售产品有雷公藤片、雷公藤总萜片、雷公藤多苷（甙）片等,具有多种免疫抑制作用和非特异性抗炎作用,临床用于治疗类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮以及肾病综合征等疾病,疗效确切。近年来,雷公藤制剂在各种原发性和继发性肾炎等疾病方面的治疗备受关注,如对慢性肾小球肾炎、过敏性紫癜性肾炎（HSPN）、狼疮性肾炎（LN）等疾病的治疗,雷公藤制剂能显着改善多种肾脏病患者的预后。但其在发挥疗效的同时,又显示出显着的毒性,其中肾脏是其主要毒性靶器官之一,而目前雷公藤制剂引起肾毒性的物质基础尚不清楚,缺乏科学有效的质控指标和方法,导致生产过程中无法控制主要毒性成分的含量,从而影响制剂质量安全。因此如何降低或控制雷公藤制剂毒性,研究出安全有效的雷公藤制剂具有广阔的发展前景。本文对雷公藤多苷片进行了血清药理学研究和血清药物化学研究,旨在进一步阐述雷公藤多苷产生肾毒性的物质基础。论文共分为4个章节,主要内容如下:第一章雷公藤多苷片指纹图谱的建立本研究采用高效液相色谱法对3个不同批次的雷公藤多苷片进行指纹图谱分析,并通过“中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2004 A版）”进行相似度评价,共确定了19个共有峰,方法学考察结果表明仪器精密度、实验方法的重现性均较良好。3批样品指纹图谱的相似度为0.94,相似度较高,表明不同批次雷公藤多苷片的含量稳定可控,为下一步药理实验供给合格药品提供依据。第二章雷公藤多苷片血清药理学研究采用血清药理学方法,考察了不同大鼠空白血清、DMSO用量对细胞活性的影响,并对实验动物口服给药剂量以及血清加入培养体系的方式进行了研究,最终确立了将雷公藤多苷片提取物（临床等效剂量的100倍）灌胃给予比格犬并采血,不同时间点下的含药血清经乙腈沉淀蛋白,残渣以1%DMSO完全培养液复溶后加入人肾上皮细胞（HK-2）、人肾小球系膜细胞（HMC）、人肾小球内皮细胞（HRGEC）培养体系中进行毒性实验,并采用MTT比色法测定含药血清对3种细胞增殖的抑制作用。实验结果表明,与空白血清（0 h）相比,3 h后的含药血清对细胞增殖的抑制作用明显增大（p<0.05）。第三章雷公藤多苷片血清药物化学研究采用血清药物化学方法,利用高效液相-质谱联用技术对含药血清的入血成分进行分析。共提取了94个色谱峰,104个化合物,其中82个峰来源于原型药物,12个为代谢产物峰,初步鉴定了70个化合物。第四章基于偏最小二乘法的含药血清的谱毒关系研究利用偏最小二乘回归分析法,以不同时间点含药血清指纹图谱峰的峰面积为“X”,以细胞的增殖抑制率为“Y”,建立各时间点含药血清中各移行成分含量与毒性强弱之间的关联,通过软件给出的标准回归系数及VIP值确定毒性成分,得出对HK-2细胞的主要毒性峰为B89（未知化合物）、B79（未知化合物）、B86（未知化合物）、B21（tripterygiumine L,二萜生物碱）、B77（未知化合物）、B72（未知化合物）,对HMC细胞的主要毒性峰为B91（triptobenzene H,二萜类）、B94（未知化合物）、B93（triptobenzene A或triptoquinone D或triptobenzene M,二萜类）,对HRGEC细胞的主要毒性峰为B80（未知化合物）、B89（未知化合物）、B88（未知化合物）、B39（未知化合物）。本论文的开展基本阐明了雷公藤多苷片的肾毒性物质基础,为建立科学的雷公藤制剂质量控制方法、指导生产工艺优化、实现增效减毒提供指导。
唐健[7]（2020）在《氮肥施用量对机插优质双季晚稻产量形成、品质及氮素吸收利用特征的影响》文中进行了进一步梳理试验于2017-2018年在江西省上高县泗溪镇曾家村进行,以优质双季晚稻美香新占、泰优398、天优华占、黄华占4个品种为试验材料,在机插条件下设N0（0 kg hm-2）、N1（135 kg hm-2）、N2（180kg hm-2）、N3（225 kghm-2）四个施氮水平,系统研究了氮肥施用量对产量及构成因素、光合物质生产、氮素吸收利用、株型和抗倒伏能力、稻米品质、淀粉理化特性的影响,明确不同氮肥水平下产量、品质、干物质积累、淀粉理化特性、氮素利用、株型与抗倒伏特性等差异,为双季稻地区机插条件下优质双季晚稻品种产量和品质协调的氮肥合理施用提供理论依据与技术支撑。主要结果如下:1.随施氮量的增加,机插优质晚稻的穗数增加、每穗粒数先增后减,结实率降低,千粒重有所下降,产量呈先增后减趋势,并在N2水平时产量最高。适当增施氮肥可增加优质双季晚稻产量。随施氮量的增加,各生育时期的茎蘖数均增加,成穗率下降,拔节期各品种叶面积指数均增加,齐穗期和成熟期叶面积指数先增后减,均在N2水平时达到最大值。各品种播种至拔节期、拔节至齐穗期干物质积累量在不同施氮水平间均表现N3>N2>N1>N0,而齐穗至成熟期干物质积累量表现为N2>N3>N1>N0。随着氮肥水平提高,播种至拔节期光合势、群体生长率和拔节至齐穗期光合势均提高,而在拔节至齐穗期、齐穗期至成熟期群体生长率及齐穗至成熟期光合势先增后减,均以N2水平下最高。2.随施氮量增加,各品种在拔节期、齐穗期和成熟期含氮率、吸氮量、成熟期总氮素积累量及播种至拔节期、拔节至齐穗期两阶段氮素积累量均增加,齐穗至成熟期氮素积累量、茎鞘和叶的氮素转运量、转运率与贡献率呈先增加后减的趋势。随施氮量增加,氮肥吸收利用率、农学利用率均先增后减,并在N2水平下最高,氮肥生理利用率、氮肥偏生产力下降,百千克籽粒吸氮量上升,且各品种处理间差异显着或极显着。3.上三叶（剑叶、倒二叶、倒三叶）的叶长、叶宽、披垂度在不同施氮水平下均表现为N3>N2>N1>N0,群体透光率呈相反趋势。随着施氮量的增加,茎秆重心高度上移,基部节间长度增加,其中,2018年美香新占、泰优398、天优华占和黄华占N3处理相对重心高度较N0处理分别高24.3%、18.1%、16.5%和21.2%。随着施氮量增加,各品种的基部1至3节间粗度增加,但茎壁厚度和单位节间干物质量下降。对于基部不同节间而言,倒伏指数表现为I3（第3节间）>I2（第2节间）>I1（第1节间）,抗折力和弯曲力矩呈相反趋势。随着施氮量增加,各节间折抗力下降,弯曲力矩、倒伏指数增加,地下部根系伤流强度也增加。4.除黄华占的整精米率在N3下最高外,N2水平下各品种的糙米率、精米率和整精米率最高。随施氮量的增加,机插优质双季晚稻的垩白粒率和垩白度降低,米粒长宽比变大,蛋白质含量和胶稠度均增加,直链淀粉含量减少。峰值黏度、热浆黏度、崩解值、最终黏度逐渐下降,消减值增加,糊化温度呈上升趋势。可见,适当增施氮肥可改善机插优质晚稻加工品质、外观品质、蒸煮和营养品质,但RVA特性有变劣趋势。5.随着氮肥用量的增加,更多的淀粉小颗粒粘附到大颗粒上,且表面变得不光滑。各优质晚稻品种在不同施氮处理下的淀粉衍射图谱均为A型,可见氮肥施用量不改变优质晚稻结晶度类型,但增施氮肥提高淀粉相对结晶度。随着施氮量增加,淀粉在1045/1022cm-1下的红外比例下降,淀粉有序度下降、峰强度增加,淀粉晶体和非晶体区域之间的电子密度增强、总的小颗粒淀粉数目增加、大颗粒淀粉数目下降。淀粉热力学特性方面,热焓值、峰值温度、起始温度、终值温度、回生热焓值和回生值均随着施氮量增加而降低,各品种间NO处理与N3处理差异显着或极显着,说明增施氮肥可以改善优质晚稻淀粉热力学特性。
童文烽[8]（2020）在《母乳中低聚糖定量检测方法的建立及其应用的研究》文中进行了进一步梳理背景:母乳是公认的新生儿最佳的营养来源,其成分中丰富的母乳低聚糖（Human milk oligosaccharides,HMOs）是仅次于乳糖和脂肪的第三大组分。HMOs具有诸多对婴幼儿生长发育有益的生理功能,明确HMOs在母乳中的含量及其影响因素对于开发更接近母乳的婴幼儿配方食品有重要意义。由于本身无发色基团,HMOs在检测器上灵敏度较低,利用还原胺化反应进行衍生可大大提高灵敏度。质谱在靶向分析方面的准确性与重复性均十分优秀,本研究基于还原胺化反应,利用超高效液相色谱串联质谱平台建立6种HMO的同步定量检测方法,同时将方法应用于实际母乳样品的定量检测,分析哺乳阶段与地理差异对目标HMOs含量的影响。方法:基于还原胺化反应,对2’-岩藻糖基乳糖（2’-FL）,3’-岩藻糖基乳糖（3’-FL）,3’-唾液酸乳糖（3’-SL）,6’-唾液酸乳糖（6’-SL）,乳-N-岩藻五糖-I（LNFP-I）和乳-N-岩藻五糖-V（LNFP-V）这6种HMOs分别进行2-氨基苯甲酸（2-aminobenzoic acid,2-AA）、2-氨基苯甲酰胺（2-aminobenzamide,2-AB）和2-氨基吖啶酮（2-aminoacridone,AMAC）衍生化处理。随后结合高分辨率质谱与三重四极杆质谱的扫描结果,建立质谱多反应监测（MRM）方法并对锥孔电压和碰撞能量进行优化,然后确定最优衍生剂,经液相条件优化后利用超高效液相-串联质谱（UPLC-MS）平台,针对6种HMOs建立同步快速的MRM质谱定量方法,并从线性回归、检出限、回收率和精密度四个方面对方法进行方法学验证工作。应用上述建立的方法对母乳样品中这6种HMOs进行定量分析,数据分析采用独立样本T检验和单因素方差分析（ANOVA）。结果:1.母乳中6种HMOs质谱同步定量方法的建立对HMOs分别进行2-AA、2-AB与AMAC衍生,比较后选取2-AA作为最优衍生剂,并进行了液相条件的优化,选定25 m M甲酸铵水溶液为水相,纯乙腈为有机相,利用超高效液相色谱-串联质谱平台建立了6种母乳低聚糖的定量检测方法并通过了相应的方法学验证。所建立的方法前处理步骤简单,分析时间短,能够在14 min内完成6种目标HMOs的分离与定量,各HMO的线性与稳定性良好,精密度范围为1.0-7.9%,回收率在83.2-119.9%之间,2’-FL、3’-FL的定量限为1.5 mg/L,3’-SL、6’-SL、LNFP-I的定量限（LOQ）为5.0 mg/L,LNFP-V的LOQ为4.5 mg/L。方法的精密度与准确度良好,可实现母乳中6种HMO的准确定量。2.母乳中HMOs定量方法的应用对来自青岛、武汉和呼和浩特的共103份母乳样品,通过建立的方法对这6种HMOs进行定量分析,结果显示该方法能够很好的应用于母乳基质,2’-FL、3’-FL、3’-SL和6’-SL在全部样品中的含量均高于LOQ,但有9个样品未检出LNFP-I,5个样品未检出LNFPV。各HMO含量范围大,样品中2’-FL、3’-FL、3’-SL、6’-SL、LNFP-I和LNFP-V的含量范围分别为7.4-4900.3 mg/L、28.2-3192.1 mg/L、113.1-613.1 mg/L、20.6-1281.6 mg/L、6.4-5354.6 mg/L和4.7-136.4 mg/L。通过对比不同哺乳期发现,除3’-FL和LNFP-V以外,其余4种HMO在成熟乳中含量显着下降,而3’-FL和LNFP-V则呈相反趋势。地区间比较的结果显示青岛、武汉和呼和浩特三地区之间成熟乳中的2’-FL和LNFP-V含量有显着差异,前者含量按武汉市、青岛市和呼和浩特市依次递减,其含量的中位数（四分位距）分别为1966.1（2441.7）mg/L、1266.7（1164.9）mg/L和24.9（1497.9）mg/L,后者则相反,呈现依次递增。结论:经方法学验证,母乳中HMOs质谱同步定量检测方法可用于母乳中2’-FL、3’-FL、3’-SL、6’-SL、LNFP-I和LNFP-V这6种HMOs的定量分析,不同哺乳阶段和地理差异对各个HMO含量影响不一,需要更为详尽的孕妇信息与后续大样本量研究来进一步探索。
陈中概[9]（2020）在《白细胞介素18介导的软骨细胞自噬调控在骨关节炎中的作用及机制研究》文中提出骨性关节炎（Osteoarthritis,OA）又称退行性骨关节病,是常见的老年性疾病之一。随着我国人口老龄化的加剧,OA患病率呈逐渐上升的趋势,OA已成为影响我国中老年人健康与生活质量的重大问题,给患者、家庭和社会造成巨大的经济负担。目前临床上针对OA的治疗主要有药物对症治疗和关节置换手术两种方法,均以缓解临床症状为主,不能改变疾病的进程,迄今尚无有效的病因治疗方法。凋亡是机体通过基因调控方式主动清除不需要的或异常的特定细胞的一种生理调控过程。软骨细胞作为正常关节软骨中的唯一细胞成分,软骨细胞过度凋亡导致的软骨细胞丰度降低和软骨细胞外基质降解被认为是OA的主要病因。近年来,自噬作为机体维持细胞正常功能和稳态的一种机制,被发现与凋亡存在紧密的联系。一些研究表明,增强自噬可以起到抗软骨细胞凋亡的作用,能延缓OA的进展。为此,药物性激活自噬在未来可能成为一种治疗OA的有效方法。炎症反应对OA的发生发展有着重要作用。促炎症细胞因子是导致软骨细胞凋亡的关键介质之一,其中白细胞介素1β（Interleukin-1β,IL-1β）和肿瘤坏死因子α（Tumor necrosis factorα,TNFα）被普遍认为是引起关节软骨基质降解的主要促炎症细胞因子。此外,近年来发现其他促炎症细胞因子如白细胞介素18（Interleukin-18,IL-18）也在OA发生发展过程中起着关键作用。先前研究表明,IL-18在OA患者滑膜液中的浓度明显升高,能诱导滑膜细胞和软骨细胞的炎症反应。近来还发现IL-18能诱导人软骨细胞的凋亡。然而,IL-18对软骨细胞自噬调控的影响尚不明确。因此,本次研究旨在探讨IL-18对软骨细胞自噬调控的影响及可能涉及的作用机制,并探索潜在的病因治疗方案。本次研究主要分成四部分:一、首先研究了IL-18对大鼠软骨细胞凋亡的影响。我们的研究发现IL-18能诱导体外培养的软骨细胞退变和软骨细胞凋亡,并在体内大鼠膝关节腔注射模型中观察到关节软骨退变的表现。二、使用IL-18处理体外培养的大鼠软骨细胞,探索IL-18对大鼠软骨细胞自噬的影响。结果发现高浓度IL-18能介导软骨细胞自噬不足。三、在体外培养的软骨细胞中,研究IL-18引起软骨细胞自噬不足的具体分子机制及其与软骨细胞退变的关系。结果发现IL-18引起软骨细胞自噬不足主要是通过PI3K-Akt-m TOR信号通路实现的,且与软骨细胞退变密切相关。四、在体外培养的大鼠软骨细胞以及体内大鼠膝关节腔注射模型中,观察常见自噬激动剂雷帕霉素（Rapamycin,Rapa）对IL-18介导的自噬不足和凋亡的影响。结果显示雷帕霉素能改善IL-18介导的自噬不足,并起到拮抗IL-18介导的促软骨细胞凋亡作用。我们的研究结果综合表明,IL-18介导的软骨细胞自噬不足能促进软骨细胞凋亡,在OA的发生发展中起重要作用;而且雷帕霉素能通过激活自噬起软骨保护作用,为OA提供了一种潜在的病因治疗方法。第一章IL-18对软骨细胞凋亡的影响目的:探究IL-18对大鼠软骨细胞凋亡的影响情况。研究方法:取4周龄（Sprague-Dawley,SD）大鼠关节软骨细胞进行体外分离培养,传代次数控制在4代以内。应用不同浓度的IL-18（0-100ng/m L）处理软骨细胞24小时后,用实时定量聚合酶链式反应（Real-Time Polymerase chain reaction,RT-PCR）法和Western免疫印迹（Western-blot）法分别检测细胞内软骨细胞表型基因Col2,Sox9和Aggrecan在m RNA和蛋白水平的表达变化,用Western-blot法检测细胞内凋亡相关因子包括凋亡抑制因子B型淋巴瘤细胞2（B-cell lymphoma-2,Bcl-2）,凋亡促进因子Bcl-2相关X蛋白（Bcl-2-associated X protein,Bax）和Caspase3/9在蛋白水平的表达变化。取20只6周龄雄性SD大鼠（150-200g）,随机分为2组,每组10只,分别为正常对照组和100ng/m L IL-18组,对照组大鼠注射50μL生理盐水,实验组大鼠注射等剂量含100ng/m L IL-18的生理盐水。每周注射2次,8周后处死动物,取膝关节标本进行番红-固绿染色及免疫组化检测,观察软骨退变情况以及聚蛋白聚糖（Aggrecan）、基质金属蛋白酶13（Matrix Metallopeptidase 13,MMP13）和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3（Caspase3）在组织中的表达情况。结果:在体外培养的大鼠软骨细胞中,IL-18能显着降低软骨细胞表型基因Col2,Sox9和Aggrecan在m RNA和蛋白质水平的表达,同时也显着抑制Bcl-2的表达,促进Bax和Caspase3/9的表达。动物体内实验结果显示,注射IL-18的大鼠膝关节退变程度较正常对照组轻,Aggrecan和MMP13表达减少,Caspase3表达增高。结论:IL-18对大鼠软骨细胞凋亡具有促进作用,且能引起关节软骨退变。第二章IL-18对软骨细胞自噬的影响目的:探究IL-18对大鼠软骨细胞自噬的影响情况。研究方法:取4周龄SD大鼠关节软骨细胞进行体外分离培养,传代次数控制在4代以内。应用浓度为100ng/m L的IL-18处理软骨细胞不同时间（0-24h）后,通过Westernblot法检测Atg5,Atg7,Beclin1,LC3B和P62等自噬标志物在蛋白质水平的表达情况,同时通过LC3B免疫荧光检测自噬小体随IL-18处理时间的变化。结果:Western-blot结果显示,浓度为100ng/m L的IL-18处理体外培养大鼠软骨细胞2小时后,软骨细胞内自噬标志物Atg5,Atg7和Beclin1蛋白水平表达显着升高,LC3B II/LC3B I比例显着上升。而在处理6,12和24小时的软骨细胞中,软骨细胞内自噬标志物Atg5,Atg7和Beclin1蛋白水平表达明显逐步降低,LC3B II/LC3B I比例逐步下降,处理24小时后基本降至基线水平。而自噬底物P62蛋白水平则随IL-18处理时间的增加而在软骨细胞内逐渐积累。免疫荧光结果显示,浓度为100ng/m L的IL-18处理体外培养大鼠软骨细胞6小时后,LC3B荧光强度显着增加,而24小时后荧光强度又明显降低。结论:大鼠软骨细胞在受到IL-18刺激的初始阶段能引起较强的自噬反应,而随着IL-18作用时间的延长,大鼠软骨细胞内自噬小体形成减少,自噬能力减弱。IL-18的慢性刺激能介导大鼠软骨细胞的自噬不足。第三章IL-18引起软骨细胞自噬不足的具体分子机制研究及其与软骨细胞退变的相关性研究目的:探究IL-18引起大鼠软骨细胞自噬不足的具体分子机制,并探索其与IL-18介导的大鼠软骨细胞退变之间的关系。研究方法:取4周龄SD大鼠关节软骨细胞进行体外分离培养,传代次数控制在4代以内。应用不同浓度的IL-18（0-100ng/m L）处理软骨细胞24小时后,通过Westernblot法检测PI3K-Akt-m TOR通路关键蛋白PI3K,Akt,m TOR的磷酸化程度。此外,我们设计了一系列通路抑制和激活实验,用PI3K激动剂740Y-P,Akt激动剂SC79,m TOR激动剂3BDO和PI3K抑制剂LY294002分别预处理细胞1小时后,再应用浓度为100ng/m L的IL-18处理24小时,通过Western-blot法检测软骨特异性基因Col2,Sox9和Aggrecan在蛋白质水平的表达情况。结果:在体外培养的大鼠软骨细胞中,IL-18能增加PI3K,Akt,m TOR的磷酸化水平,在浓度为10ng/m L和100ng/m L时更为明显。PI3K-Akt-m TOR通路抑制和激活实验结果显示,激活PI3K,Akt和m TOR均可显着降低软骨细胞表型基因Col2,Sox9和Aggrecan在蛋白质水平的表达,而抑制PI3K可显着升高Col2,Sox9和Aggrecan基因在在蛋白质水平的表达。结论:IL-18引起大鼠软骨细胞自噬不足主要是通过PI3K-Akt-m TOR信号通路实现的,且与大鼠软骨细胞退变密切相关。第四章雷帕霉素对IL-18介导的软骨细胞自噬不足和凋亡的作用研究目的:探究常见自噬激动剂雷帕霉素对IL-18介导的大鼠软骨细胞自噬不足和凋亡的影响。研究方法:取4周龄SD大鼠关节软骨细胞进行体外分离培养,传代次数控制在4代以内。取P3代软骨细胞分为4组:正常对照组不做处理,IL-18组应用浓度为100ng/m L的IL-18处理24小时,Rapa组应用浓度为10n M的雷帕霉素处理24小时,IL-18+Rapa组应用浓度为10n M的雷帕霉素预处理1小时后加入浓度为100ng/m L的IL-18共处理24小时。通过Western-blot法检测Atg5,Atg7,Beclin1,LC3B和P62等自噬标志物以及Bcl-2,Bax和Caspase3/9等凋亡相关因子在蛋白质水平的表达情况。取40只6周龄雄性SD大鼠（150-200g）,随机分为4组,每组10只:正常对照组大鼠注射50μL生理盐水,IL-18组大鼠注射等剂量含100ng/m L IL-18的生理盐水,Rapa组大鼠注射等剂量含10n M雷帕霉素的生理盐水,IL-18+Rapa组注射等剂量含100ng/m L IL-18和10n M雷帕霉素的生理盐水。每周注射2次,8周后处死动物,取膝关节标本进行番红-固绿染色及免疫组化检测,观察软骨退变情况以及Atg5和Caspase3的表达。结果:在体外培养的大鼠软骨细胞中,雷帕霉素显着拮抗IL-18诱导24小时后大鼠软骨细胞中Atg7基因在蛋白质水平的表达下调、LC3B II/LC3B I比例的下降以及自噬底物P62的增加,同时雷帕霉素也显着拮抗IL-18诱导24小时后大鼠软骨细胞中Bcl-2基因的表达下调以及Bax和Caspase3/9基因的表达上调。动物体内实验结果显示,IL-18+Rapa组相较于IL-18组,大鼠膝关节退变程度较轻,Atg5表达增加,Caspase3表达减少。结论:雷帕霉素能改善IL-18介导的大鼠软骨细胞自噬不足,并起着抗软骨细胞凋亡和软骨保护作用。
李瑞[10]（2020）在《[HNMP]HSO4催化合成圆头蒿硒多糖及对RAW264.7细胞的免疫调节作用研究》文中提出近年来,多糖的硒化修饰被证明是增强多糖免疫调节活性的有效方法。然而,硒含量对硒化衍生物中免疫调节活性的影响报道较少。目前常规硒化方法（硝酸-亚硒酸钠法）所合成硒多糖的硒含量有限,不利于硒多糖构效关系的研究,且环境不友好。因此,开发在温和反应条件下、高硒含量的新型多糖硒化体系尤为重要,对构效关系的相关研究也具有一定的启发性。基于此,本论文以圆头蒿多糖（polysaccharide from Artemisia sphaerocephala,PAS）为原料,酸性离子液体氮甲基吡咯烷酮硫酸氢盐（[HNMP]HSO4）为均相催化剂,在较温和条件下高效合成圆头蒿硒多糖（SePAS）,并通过体外细胞实验评价了硒含量对免疫活性的影响以及对硒多糖的免疫调节作用机理进行了初步研究,主要内容及结论如下:1.[HNMP]HSO4催化合成SePAS[HNMP]HSO4由于具有强Br?nsted酸性而在硒化反应中显示出良好的催化活性,通过增强H2SeO3的质子化能力,从而合成较高硒含量的SePAS,所合成的最高硒含量为8744μg/g（SePAS3）,与未使用[HNMP]HSO4作为催化剂的SePASC（1676μg/g）相比,硒含量提高了5倍。通过FT-IR、XPS和1D/2D NMR对SePAS进行结构表征,证实Se以亚硒酸酯(Se4+)的形式成功引入了PAS的结构中,且发生硒化取代的主要位置在C-6位。在SEC-MALLS分析中,观察到SePAS的MW（0.25-5.86×104 g/mol）发生了显着降解现象,说明[HNMP]HSO4的强酸性可导致SePAS的MW降低。2.SePAS的体外免疫调节作用及对MAPKs和NF-κB信号通路的影响SePAS可显着增强巨噬细胞RAW264.7的免疫调节作用,且高硒含量的硒多糖（SePAS3,8744μg/g）具有更强的免疫应答活性,证明硒含量是增强SePAS体外免疫调节活性的关键因素之一。对SePAS激活RAW264.7细胞免疫调节活性机制的研究发现,SePAS主要通过上调MAPKs和NF-κB信号通路中ERK1/2、JNK1/2、p38和p65的磷酸化来发挥免疫调节活性,从而促进RAW264.7细胞增殖,吞噬并刺激NO和细胞因子（TNF-α,IL-1β和IL-6）的产生。综上所述,本论文以[HNMP]HSO4为催化剂,在较温和条件下合成了高硒含量的SePAS,并比较了SePAS的硒含量对其免疫调节活性的影响,且较为系统地在体外水平研究了其诱导RAW264.7细胞免疫调节活性及其相关机制,为硒含量与免疫调节活性之间的相关性提供了理论依据。
二、文献与摘要(NO.19)（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、文献与摘要(NO.19)（论文提纲范文）
（1）芳纶/不锈钢纤维基核壳结构纳米复合织物的制备（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 核壳结构纳米材料概述 |
| 1.1.1 核壳结构纳米材料简介 |
| 1.1.2 核壳结构纳米材料的制备方法 |
| 1.1.3 核壳结构纳米材料的应用 |
| 1.2 芳纶/不锈钢纤维混纺织物概述 |
| 1.2.1 金属纤维混纺织物 |
| 1.2.2 不锈钢纤维的制备及应用 |
| 1.2.3 芳纶纤维的制备及应用 |
| 1.2.4 芳纶/不锈钢纤维混纺织物的研究进展 |
| 1.3 纳米涂层织物概述 |
| 1.3.1 纳米涂层织物的制备方法 |
| 1.3.2 纳米涂层织物的应用 |
| 1.4 本课题研究目的与意义及研究内容 |
| 1.4.1 研究目的 |
| 1.4.2 研究意义 |
| 1.4.3 研究内容 |
| 1.5 本课题的创新点 |
| 第二章 Fe_3O_4@ZnO核壳结构纳米微粒的制备及调控 |
| 2.1 实验过程 |
| 2.1.1 实验材料及仪器 |
| 2.1.2 Fe_3O_4纳米微粒的制备 |
| 2.1.3 Fe_3O_4@ZnO纳米微粒的制备 |
| 2.1.4 表征与测试 |
| 2.2 结果与讨论 |
| 2.2.1 合成机理分析 |
| 2.2.2 反应时间对Fe_3O_4纳米微粒的影响 |
| 2.2.3 反应温度对Fe_3O_4纳米微粒的影响 |
| 2.2.4 PEG用量对Fe_3O_4纳米微粒的影响 |
| 2.2.5 反应物摩尔比例对Fe_3O_4@ZnO纳米微粒的影响 |
| 2.2.6 Fe_3O_4@ZnO纳米微粒的电磁性能分析 |
| 2.3 小结 |
| 第三章 芳纶/不锈钢纤维混纺织物的制备及其性能 |
| 3.1 实验过程 |
| 3.1.1 实验材料及仪器 |
| 3.1.2 芳纶/不锈钢纤维混纺织物的制备 |
| 3.1.3 表征与测试 |
| 3.2 结果与讨论 |
| 3.2.1 纱线混纺比对织物电磁屏蔽性能的影响 |
| 3.2.2 组织结构对织物电磁屏蔽性能的影响 |
| 3.2.3 经、纬密度对织物电磁屏蔽性能的影响 |
| 3.2.4 芳纶/不锈钢纤维混纺织物的综合性能 |
| 3.3 小结 |
| 第四章 芳纶/不锈钢纤维基核壳结构纳米复合织物的制备及其性能 |
| 4.1 实验过程 |
| 4.1.1 实验材料及仪器 |
| 4.1.2 涂层浆料的制备 |
| 4.1.3 涂层工艺的确定 |
| 4.1.4 芳纶/不锈钢纤维基核壳结构纳米复合织物的制备 |
| 4.1.5 表征与测试 |
| 4.2 结果与讨论 |
| 4.2.1 浆料分散稳定性分析 |
| 4.2.2 等离子体处理对基布的影响 |
| 4.2.3 纳米微粒含量对复合织物屏蔽性能的影响 |
| 4.2.4 ZnO壳层厚度对复合织物屏蔽性能的影响 |
| 4.2.5 涂层厚度对复合织物屏蔽性能的影响 |
| 4.2.6 芳纶/不锈钢纤维基核壳结构纳米复合织物的综合性能 |
| 4.3 小结 |
| 结论与展望 |
| 1.结论 |
| 2.展望 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读学位期间发表的学术论文及取得的科研成果 |
| 个人简历 |
（2）低血糖对老年2型糖尿病患者应激激素水平及认知功能的影响（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 符号说明 |
| 前言 |
| 资料与方法 |
| 研究结果 |
| 讨论 |
| 研究结论 |
| 附图 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 |
| 攻读学位期间成果 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 |
| 附件 |
（3）基于液质联用技术的雷公藤属制剂化学成分鉴定与比较（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 英文缩写 |
| 引言 |
| 第一部分 雷公藤属制剂中化学成分的质谱裂解规律研究 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 第二部分 雷公藤属制剂中化学成分的UHPLC-QTOF-MS/MS鉴定及市售样品化学成分比较 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 结论 |
| 综述 雷公藤及其制剂化学成分的研究进展与质量控制现状 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（4）m6A修饰在系统性红斑狼疮发病中的作用研究（论文提纲范文）
| 英文缩略词表 |
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 第一部分 SLE 患者 T 细胞相关基因 mRNA 的 m6A 修饰研究 |
| 1 前言 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 研究对象 |
| 2.2 资料与标本收集 |
| 2.3 实验方法 |
| 2.4 统计分析 |
| 2.5 质量控制 |
| 3 结果 |
| 3.1 第一阶段 SLE 患者 PBMC 中 mRNAs m6A 修饰谱和表达谱的建立 |
| 3.2 第二阶段 SLE 患者 PBMC 中 m6A 修饰相关 mRNAs 的 qRT-PCR 和 western blot验证 |
| 3.3 第三阶段 T 细胞中 m6A 修饰相关 mRNAs 的 qRT-PCR 和 western blot 验证 |
| 3.4 第四阶段 m6A 修饰相关 mRNAs 的功能研究 |
| 4 讨论 |
| 第二部分 SLE患者中m6A甲基化酶的作用研究 |
| 1 前言 |
| 2 材料与方法 |
| 3 结果 |
| 3.1 第一阶段 SLE 患者 PBMC 中 m6A 甲基化酶的检测 |
| 3.2 第二阶段 T 细胞中 m6A 甲基转移酶 METTL3 的 qRT-PCR 和 Western Blot 验证 |
| 3.3 第三阶段 METTL3 的相关功能研究 |
| 4 讨论 |
| 5 结论 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
| 综述 m6A 修饰在自身免疫性疾病中的调节作用 |
| 参考文献 |
| 附件 |
（5）吉西他滨治疗转移性乳腺癌患者疗效与临床病理特征和PROM2表达的相关性研究（论文提纲范文）
| 中英文缩略词对照表 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 1 前言 |
| 2 材料与方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 5 结论 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 个人简历 |
| 在学期间的研究成果 |
| 致谢 |
| 文献综述 转移性乳腺癌的化疗研究现状及进展 |
| 参考文献 |
（6）基于血清药物化学及血清药理学的雷公藤多苷片肾毒性谱毒关系研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 引言 |
| 第一章 雷公藤多苷片指纹图谱的建立 |
| 1 仪器与试药 |
| 1.1 仪器 |
| 1.2 药物与试剂 |
| 2 液相方法与结果 |
| 2.1 样品溶液制备 |
| 2.2 色谱条件的确定 |
| 2.3 方法学考察 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 第二章 雷公藤多苷片血清药理学研究 |
| 1 仪器与材料 |
| 1.1 仪器 |
| 1.2 药品与试剂 |
| 1.3 实验动物 |
| 2 方法与结果 |
| 2.1 细胞的培养 |
| 2.2 大鼠血清的制备 |
| 2.3 不同大鼠血清对细胞活性的影响 |
| 2.4 DMSO用量对细胞活性的影响 |
| 2.5 雷公藤多苷片提取物的制备 |
| 2.6 给药剂量的考察 |
| 2.7 血样处理方法 |
| 2.8 细胞毒性试验 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 第三章 雷公藤多苷片血清药物化学研究 |
| 1 仪器与试药 |
| 1.1 仪器 |
| 1.2 药品与试剂 |
| 2 雷公藤多苷片供试品溶液的制备 |
| 3 血清样品溶液的制备 |
| 4 质谱分析 |
| 4.1 液相条件 |
| 4.2 质谱条件 |
| 5 结果 |
| 6 讨论 |
| 7 小结 |
| 第四章 基于偏最小二乘法的含药血清的谱毒关系研究 |
| 1 雷公藤多苷片指纹图谱与HK-2 细胞的谱毒关系 |
| 2 雷公藤多苷片指纹图谱与HMC细胞的谱毒关系 |
| 3 雷公藤多苷片指纹图谱与HRGEC细胞的谱毒关系 |
| 4 讨论 |
| 5 小结 |
| 全文结论 |
| 参考文献 |
| 文献综述 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 作者简历 |
（7）氮肥施用量对机插优质双季晚稻产量形成、品质及氮素吸收利用特征的影响（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 第一章 绪论 |
| 1 研究背景 |
| 2 水稻氮肥施用的研究进展 |
| 2.1 氮肥使用现状 |
| 2.2 氮肥施用量对水稻产量与光合物质生产的影响 |
| 2.3 氮肥施用量对水稻氮素吸收利用的影响 |
| 2.4 氮肥施用量对水稻抗倒伏能力的影响 |
| 2.5 氮肥施用量对水稻品质的影响 |
| 2.6 氮肥施用量对水稻淀粉理化特性的影响 |
| 3 研究目的及意义 |
| 4 研究的主要内容 |
| 参考文献 |
| 第二章 氮肥施用量对机插优质晚稻产量及光合物质生产的影响 |
| 0 引言 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 试验地点及材料 |
| 1.2 试验设计 |
| 1.3 测定项目与方法 |
| 1.4 数据统计分析 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 氮肥施用量对优质晚稻产量及构成因素的影响 |
| 2.2 氮肥施用量对优质晚稻群体茎蘖动态及成穗率的影响 |
| 2.3 氮肥施用量对优质晚稻叶面积指数的影响 |
| 2.4 氮肥施用量对优质晚稻干物质阶段积累及比例的影响 |
| 2.5 氮肥施用量对优质晚稻光合势、群体生长率和净同化率的影响 |
| 3 讨论 |
| 3.1 关于氮肥施用量对机插优质晚稻产量及构成因素的讨论 |
| 3.2 关于氮肥施用量对机插优质晚稻群体特征的讨论 |
| 参考文献 |
| 第三章 氮肥施用量对机插优质晚稻氮素吸收利用的影响 |
| 0 引言 |
| 1. 材料与方法 |
| 1.1 试验地点及材料 |
| 1.2 试验设计 |
| 1.3 测定项目与方法 |
| 1.4 数据计算与统计分析 |
| 2. 结果与分析 |
| 2.1 氮肥施用量对优质晚稻含氮率和吸氮量的影响 |
| 2.2 氮肥施用量对优质晚稻各生育阶段氮素积累量及其比例的影响 |
| 2.3 氮肥施用量对优质晚稻齐穗至成熟期植株各器官氮素转运的影响 |
| 2.4 氮肥施用量对优质晚稻氮素吸收利用效率的影响 |
| 3. 讨论 |
| 参考文献 |
| 第四章 氮肥施用量对机插优质晚稻株型和抗倒伏能力的影响 |
| 0 引言 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 试验地点及材料 |
| 1.2 试验设计 |
| 1.3 测定项目与方法 |
| 1.4 数据统计分析 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 氮肥施用量对优质晚稻叶片形态特征的影响 |
| 2.2 氮肥施用量对优质晚稻基部节间长和株高的影响 |
| 2.3 氮肥施用量对优质晚稻茎秆粗度、茎壁厚度和茎秆干质量的影响 |
| 2.4 氮肥施用量对优质晚稻基部节间抗折力、弯曲力矩和倒伏指数的影响 |
| 2.5 抗倒伏特性与叶片形态特征和茎秆主要物理性状的相关性 |
| 2.6 氮肥施用量对优质晚稻透光率和根系伤流强度的影响 |
| 3 讨论 |
| 参考文献 |
| 第五章 氮肥施用量对机插优质晚稻稻米品质的影响 |
| 0 引言 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 试验地点及材料 |
| 1.2 试验设计 |
| 1.3 测定项目与方法 |
| 1.4 数据统计分析 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 氮肥施用量对优质晚稻稻米品质和RVA谱特性的影响 |
| 2.2 稻米品质、RVA谱特征值的方差分析和相关分析 |
| 2.3 灌浆结实期温光资源与稻米品质 |
| 3 讨论 |
| 参考文献 |
| 第六章 氮肥施用量对机插优质晚稻淀粉结构和热力学特性的影响 |
| 0 引言 |
| 1. 材料与方法 |
| 1.1 试验地点及材料 |
| 1.2 试验设计 |
| 1.3 测定项目与方法 |
| 1.4 数据统计分析 |
| 2. 结果与分析 |
| 2.1 氮肥施用量对优质晚稻淀粉籽粒形态的影响 |
| 2.2 氮肥施用量对优质晚稻淀粉红外特性和相对结晶度的影响 |
| 2.3 氮肥施用量对优质晚稻淀粉颗粒大小分布的影响 |
| 2.4 氮肥施用量对优质晚稻淀粉SAXS波谱参数的影响 |
| 2.5 氮肥施用量对优质晚稻淀粉热力学特性的影响 |
| 2.6 淀粉结构特性与热力学特性的相关分析 |
| 3. 讨论 |
| 参考文献 |
| 第七章 结论与展望 |
| 1. 主要研究结论 |
| 1.1 氮肥施用量对机插优质晚稻产量及光合物质生长的影响 |
| 1.2 氮肥施用量对机插优质晚稻氮素吸收利用的影响 |
| 1.3 氮肥施用量对机插优质晚稻株型和抗倒伏能力的影响 |
| 1.4 氮肥施用量对机插优质晚稻稻米品质的影响 |
| 1.5 氮肥施用量对机插优质晚稻淀粉结构和热力学特性的影响 |
| 2. 本研究的创新点 |
| 3. 需要进一步深化和研究的问题 |
| 攻读硕士学位期间发表的文章 |
| 致谢 |
（8）母乳中低聚糖定量检测方法的建立及其应用的研究（论文提纲范文）
| 致谢 |
| 摘要 |
| Abstract |
| 缩略词 |
| 1 绪论 |
| 1.1 母乳成分概述 |
| 1.2 母乳低聚糖简介 |
| 1.2.1 母乳低聚糖的组成 |
| 1.2.2 母乳低聚糖的生物合成 |
| 1.2.3 母乳低聚糖的生理功能 |
| 1.2.4 母乳低聚糖的应用 |
| 1.3 影响母乳低聚糖含量的因素 |
| 1.3.1 遗传因素的影响 |
| 1.3.2 哺乳阶段的影响 |
| 1.3.4 其他影响因素 |
| 1.4 母乳低聚糖的检测手段 |
| 1.4.1 高效液相色谱法 |
| 1.4.2 质谱法 |
| 1.4.3 毛细管电泳 |
| 1.4.4 核磁共振法 |
| 1.5 本文的研究内容、目的和意义 |
| 1.5.1 研究目的和意义 |
| 1.5.2 研究内容 |
| 2 母乳中六种低聚糖的质谱同步定量检测方法的建立 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 材料、试剂与仪器 |
| 2.2.1 材料与试剂 |
| 2.2.2 仪器与设备 |
| 2.3 实验方法 |
| 2.3.1 溶液的配制 |
| 2.3.2 母乳HMOs定量方法的建立 |
| 2.3.3 方法学验证 |
| 2.4 结果与讨论 |
| 2.4.1 MRM方法的建立 |
| 2.4.2 衍生剂的选择 |
| 2.4.3 色谱条件的优化 |
| 2.4.4 方法学验证结果 |
| 2.5 本章小结 |
| 3 母乳低聚糖定量方法的应用 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 材料、试剂与仪器 |
| 3.2.1 材料与试剂 |
| 3.2.2 仪器与设备 |
| 3.3 方法 |
| 3.3.1 溶液的配制 |
| 3.3.2 样本的采集 |
| 3.3.3 样品前处理 |
| 3.3.4 仪器条件 |
| 3.3.5 统计分析 |
| 3.4 结果与讨论 |
| 3.4.1 母乳样品中6 种HMOs的基本情况 |
| 3.4.2 初乳与成熟乳之间6 种HMOs含量的比较 |
| 3.4.3 不同地区之间6 种HMOs含量的比较 |
| 3.5 本章小结 |
| 4 研究结论与展望 |
| 4.1 研究结论 |
| 4.2 研究创新点 |
| 4.3 研究展望 |
| 参考文献 |
| 作者简介及在读期间所取得的科研成果 |
（9）白细胞介素18介导的软骨细胞自噬调控在骨关节炎中的作用及机制研究（论文提纲范文）
| 致谢 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 英文缩略词表 |
| 1.绪论 |
| 1.1 骨性关节炎概况 |
| 1.2 白细胞介素18在OA发生中的作用 |
| 1.3 PI3K-Akt-mTOR信号通路在OA进展中的重要作用 |
| 2.第一章 IL-18对软骨细胞凋亡的影响 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 实验材料与实验方法 |
| 2.3 实验结果 |
| 2.4 讨论 |
| 2.5 小结 |
| 3.第二章 IL-18对软骨细胞自噬的影响 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 实验材料与实验方法 |
| 3.3 实验结果 |
| 3.4 讨论 |
| 3.5 小结 |
| 4.第三章 IL-18引起软骨细胞自噬不足的具体分子机制研究及其与软骨细胞退变的相关性研究 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 实验材料与实验方法 |
| 4.3 实验结果 |
| 4.4 讨论 |
| 4.5 小结 |
| 5.第四章 雷帕霉素对IL-18介导的软骨细胞自噬不足和凋亡的作用研究 |
| 5.1 引言 |
| 5.2 实验材料与实验方法 |
| 5.3 实验结果 |
| 5.4 讨论 |
| 5.5 小结 |
| 参考文献 |
| 综述 炎性衰老在骨性关节炎中的研究进展 |
| 参考文献 |
| 个人简历 |
（10）[HNMP]HSO4催化合成圆头蒿硒多糖及对RAW264.7细胞的免疫调节作用研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 第1章 文献综述 |
| 1.1 硒多糖的研究现状 |
| 1.1.1 多糖的硒化 |
| 1.1.2 硒多糖的生物活性 |
| 1.2 多糖调控巨噬细胞的免疫作用机制 |
| 1.2.1 巨噬细胞概述 |
| 1.2.2 多糖对巨噬细胞的免疫调节作用 |
| 1.2.3 多糖刺激巨噬细胞免疫应答的信号通路 |
| 1.3 本论文的立项依据及研究内容 |
| 1.4 本论文技术路线 |
| 第2章 [HNMP]HSO_4催化合成圆头蒿硒多糖(SePAS) |
| 2.1 实验试剂与仪器 |
| 2.1.1 实验材料 |
| 2.1.2 实验试剂及药品 |
| 2.1.3 实验仪器 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.2.1 硒多糖的合成 |
| 2.2.2 硒多糖的结构表征 |
| 2.3 实验结果与讨论 |
| 2.3.1 [HNMP]HSO_4 催化合成SePAS |
| 2.3.2 硒多糖的结构表征 |
| 2.4 本章小结 |
| 第3章 硒化圆头蒿多糖(SePAS)的体外免疫调节作用及对MAPKs和 NF-κB信号通路的影响 |
| 3.1 实验材料 |
| 3.1.1 实验细胞株 |
| 3.1.2 主要生化试剂 |
| 3.1.3 主要试剂盒 |
| 3.1.4 主要实验试剂的配置 |
| 3.1.5 主要仪器和设备 |
| 3.2 实验方法 |
| 3.2.1 细胞培养 |
| 3.2.2 用CCK-8检测RAW264.7 细胞存活率 |
| 3.2.3 中性红吞噬测定RAW264.7细胞的吞噬能力 |
| 3.2.4 细胞上清中NO含量的测定 |
| 3.2.5 细胞上清液中细胞因子(TNF-α,IL-1β和 IL-6)含量的测定 |
| 3.2.6 Western blot检测SePAS对 MAPKs、NF-κB信号通路的影响 |
| 3.2.7 统计方法 |
| 3.3 结果与讨论 |
| 3.3.1 SePAS对RAW264.7细胞存活率的影响 |
| 3.3.2 SePAS对RAW264.7细胞吞噬中性红的影响 |
| 3.3.3 SePAS对 RAW264.7细胞产NO能力的影响 |
| 3.3.4 SePAS对 RAW264.7 细胞释放细胞因子(TNF-α、IL-1β和 IL-6)能力的影响 |
| 3.3.5 SePAS激活MAPKs信号通路的研究 |
| 3.3.6 SePAS激活NF-κB信号通路的研究 |
| 3.4 本章小结 |
| 第4章 结论与展望 |
| 4.1 论文主要结论 |
| 4.2 创新点 |
| 4.3 后续研究展望 |
| 参考文献 |
| 中英文缩略词表 |
| 致谢 |
| 附图 |
| 个人简历、在学期间发表的学术论文及研究成果 |
四、文献与摘要(NO.19)（论文参考文献）
- [1]芳纶/不锈钢纤维基核壳结构纳米复合织物的制备[D]. 吴依琳. 内蒙古工业大学, 2021(01)
- [2]低血糖对老年2型糖尿病患者应激激素水平及认知功能的影响[D]. 李莉艳. 山东大学, 2021(11)
- [3]基于液质联用技术的雷公藤属制剂化学成分鉴定与比较[D]. 田玉环. 河北医科大学, 2021(02)
- [4]m6A修饰在系统性红斑狼疮发病中的作用研究[D]. 吴俊. 安徽医科大学, 2021(01)
- [5]吉西他滨治疗转移性乳腺癌患者疗效与临床病理特征和PROM2表达的相关性研究[D]. 曹越越. 安徽医科大学, 2021(01)
- [6]基于血清药物化学及血清药理学的雷公藤多苷片肾毒性谱毒关系研究[D]. 张敏新. 福建中医药大学, 2020(08)
- [7]氮肥施用量对机插优质双季晚稻产量形成、品质及氮素吸收利用特征的影响[D]. 唐健. 扬州大学, 2020
- [8]母乳中低聚糖定量检测方法的建立及其应用的研究[D]. 童文烽. 浙江大学, 2020(01)
- [9]白细胞介素18介导的软骨细胞自噬调控在骨关节炎中的作用及机制研究[D]. 陈中概. 浙江大学, 2020(01)
- [10][HNMP]HSO4催化合成圆头蒿硒多糖及对RAW264.7细胞的免疫调节作用研究[D]. 李瑞. 西北师范大学, 2020(01)