一、6种消毒剂对集约化猪场大肠杆菌病的预防效果（论文文献综述）
郭长梅[1]（2021）在《复方癸甲氯铵消毒剂杀菌作用的影响因素及现场消毒试验研究》文中进行了进一步梳理随着养殖业规模的迅速扩大,动物传染病频发,严重威胁我国畜牧业的发展,甚至影响公共卫生安全。目前,利用消毒剂对畜禽舍进行消毒仍是预防和控制疾病最常用的措施之一。因此,开发新型消毒剂并对其进行科学系统的评价显得尤为重要。本研究通过悬液定量杀菌实验方法,分别以大肠杆菌和金黄色葡萄球菌为指示菌,在评价浓度与时间、温度、pH值和有机物等单因素对复方癸甲氯铵消毒剂杀菌效果影响的基础上,选择猪舍和鸡舍进一步研究了该消毒剂在现场对于特定菌的表面消毒、自然菌表面及空气消毒的应用效果。在影响杀菌效果因素试验中,浓度与时间的测定结果表明,复方癸甲氯铵消毒剂对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的杀灭效果与浓度和作用时间呈一定的正相关性。温度影响的结果显示,该消毒剂对大肠杆菌在2°C作用1min时的杀菌率高于99.9%,其余不同温度下不同作用时间的杀菌率均为100.0%;对金黄色葡萄球菌在不同温度下作用不同时间的杀菌率均为100.0%。pH影响的结果显示,该消毒剂无论是对大肠杆菌还是金黄色葡萄球菌,在不同pH条件下杀菌率均为100.0%。有机物影响的结果显示,该消毒剂无论是对大肠杆菌还是金黄色葡萄球菌,在不同有机物浓度条件下杀菌率均为100.0%。综上,复方癸甲氯铵消毒剂对大肠杆菌的杀灭效果受温度影响较小,对金黄色葡萄球菌的杀灭效果不受温度的影响,且对二者的杀灭效果均不受pH值和有机物的影响。特定细菌的表面现场消毒结果显示,在猪舍中,对于表面污染大肠杆菌和金黄色葡萄球菌,该消毒剂1∶500和1∶1 000稀释消毒后10min、30min、60min各处的杀菌率皆高于99.9%。鸡舍中,对于大肠杆菌,该消毒剂1∶500和1∶1 000稀释消毒后60min各处的杀菌率也均高于99.9%;对于金黄色葡萄球菌,同等条件下各处的杀菌率则均高于99.7%。自然菌表面现场消毒结果显示,在猪舍中该消毒剂1∶500和1∶1 000稀释消毒后10min、30min、60min各处效果优于癸甲溴铵溶液;在鸡舍中该消毒剂1∶500、1∶1 000和1∶2 000稀释消毒后10min、30min、60min各处效果也均优于癸甲溴铵溶液。自然菌空气消毒结果显示,在猪舍和鸡舍中该消毒剂1∶500、1∶1 000以及1∶2 000稀释在10min、30min、60min的消毒效果皆优于癸甲溴铵溶液。综上,复方癸甲氯铵消毒剂对猪舍和鸡舍污染的大肠杆菌和金黄色葡萄球菌、表面自然菌及空气自然菌均具有良好的消毒效果。
钦倩[2]（2020）在《大肠杆菌S9922生物学特性及特有基因的原核表达》文中研究表明目的:本研究以临床分离的大肠杆菌S9922为研究对象,进行了生物学特性的研究、耐药性的检测以及不同环境消毒剂对该菌的杀灭作用,克隆S9922特有黏附蛋白fli C3以及fim D的基因,构建重组p ET-32a-fli C3和p ET-32a-fim D质粒,进行表达纯化和WB检测。研究结果一方面为该菌的研究提供较全面的资料,另一方面为临床上该病的用药提供技术服务和养殖场的生物防控提供技术支持,同时为该病诊断方法的建立和疫苗研制提供实验材料。方法:（1）对分离到的致犊牛脑炎大肠杆菌进行生化鉴定、系统进化分群、药敏测定、血清型鉴定、溶血性实验和半数致死量的测定。（2）采用4种牛场常用环境消毒剂对大肠杆菌S9922进行不同作用时间（5 min、10 min、20 min）、不同作用浓度（0.1%、0.5%、1%）的杀灭,观察其杀灭效果。（3）应用Primer5.0软件设计fli C3以及fim D基因的引物,PCR扩增目的基因,并构建重组p ET-32a-fli C3和p ET-32a-fim D质粒,转化至大肠杆菌BL21（DE3）中,加入IPTG进行诱导表达,将表达后的蛋白通过Ni柱进行纯化,不同浓度梯度尿素进行复性,蔗糖浓缩后定量。（4）以抗his标签为一抗,羊抗兔Ig G为二抗,对表达的蛋白进行Western blot检测。结果:（1）E.coli S9922 V-P试验为阴性,吲哚试验为阳性,能发酵甘露醇、木糖、葡萄糖、鼠李糖、麦芽糖,且均能产酸不产气;根据3个基因chu A、yja A和Tsp E4.C2经过PCR扩增验证E.coli S9922系统发育分型属于A群;用牛源大肠杆菌27种常见血清型O1、O2、O3、O8、O9、O11、O15、O29、O38、O44、O51、O53、O78、O80、O88、O93、O101、O104、O109、O114、O119、O126、O137、O138、O157、O158、O161中,并未检测到E.coli S9922的血清型;在5%的兔血和5%绵羊鲜血平板上未见溶血圈;LD50计算结果为107.238 mg/kg,表明E.coli S9922是一株强毒株。（2）大肠杆菌S9922对氨基糖苷类、头孢类、糖肽类、酰胺类、大环内酯类、青霉素类、多肽类、四环素类、喹诺酮类、磺胺类药物大部分耐药,具有多重耐药性。对大观霉素和多粘菌素b较为敏感。（3）在1%浓度的消毒剂作用下,稀戊二醛溶液、苯扎溴铵溶液、聚维酮碘溶液、二氯异氰尿酸钠溶液均能杀灭该菌,而在0.1%和0.5%浓度作用下,稀戊二醛溶液和苯扎溴铵溶液比聚维酮碘溶液和二氯异氰尿酸钠的消毒效果好。（4）PCR扩增的fli C3基因片段长度为942 bp,fim D基因片段长度为1149 bp,重组蛋白fli C3的大小为51.54 k Da,fim D蛋白的大小为59.13 k Da,与预期结果表达一致,两个蛋白皆在包涵体中表达,纯化后的重组蛋白fli C3浓度为1.6 mg/m L,fim D蛋白浓度为1.9 mg/m L。（5）Westurn blot结果显示,重组蛋白fli C3和fim D能够表达,且大小与预期结果一致。结论:大肠杆菌S9922为肠外致病性大肠杆菌,在系统分群上属于A群,LD50结果显示该菌为一强毒株;该菌为一种抗原结构复杂的致病菌,并对多种抗生素具有耐药性,且为多重耐药,对大观霉素和多粘菌素b较为敏感;几种不同环境消毒剂高浓度下均可杀灭该菌,低浓度下稀戊二醛溶液、苯扎溴铵溶液消毒效果更好;重组蛋白fli C3以及fim D能够在沉淀中以包涵体的形式被正确表达。实验结果可为犊牛脑炎大肠杆菌的研究提供较全面的资料,另一方面为临床上该病的用药提供技术服务和养殖场的生物防控提供技术支持,同时为该病的诊断方法的建立和疫苗研制提供实验材料。
吴伯梅[3]（2020）在《五种消毒剂对鸭场常见细菌的杀菌效果分析》文中研究说明养鸭业在我国农业经济结构中占有重要地位,随着养殖业的发展,以农村散养传统养鸭模式逐渐转变为集约化养殖。由于集约化养鸭养殖密度大,规模鸭场环境卫生不达标、水污不能分离、粪污依靠自然沉淀降解、鸭舍场地潮湿和通风不良等因素易导致细菌性疾病多发,一旦发生疫病将给养殖场带来巨大的经济损失。为防控细菌性疾病养鸭场通常会使用大量消毒剂来进行环境消毒,选择消毒剂类型单一并重复使用,不仅造成环境污染,也会导致细菌极易产生耐药性,从而降低消毒剂的杀菌效果。本研究对贵州省某舍饲鸭场环境（空气、粪便、垫料及饮水）进行菌落总数测定,并采用16S r DNA高通量测序方法对粪便、垫料及饮水进行微生物多样性及丰度分析,掌握舍饲鸭场环境微生物的结构与组成;选用市场上销售的五种消毒剂（聚维酮碘、苯扎溴铵、月苄三甲氯铵、复方戊二醛、戊二醛癸甲溴铵）对鸭场五种常见细菌（大肠杆菌、鸭疫里默氏杆菌、巴氏杆菌、沙门氏菌、葡萄球菌）进行最小抑菌浓度（MIC）、最小杀菌浓度（MBC）的测定;并设计15对消毒剂耐药相关基因的特异性引物,通过PCR扩增相关基因片段,分析这5种病原菌携带耐消毒剂基因情况,掌握细菌对消毒剂的抗性。运用五种消毒剂对鸭场进行现场消毒试验及消毒效果分析,研究结果为养鸭场消毒规程的制定和消毒措施的执行提供参考。1.贵州省某舍饲鸭场环境微生物的检测与分析为了解鸭场微生物的多样性及丰度,采集鸭场空气、粪便、垫料及饮水进行菌落总数测定,针对细菌16S r DNA基因V4～V5高变区设计特异性引物,对采集鸭场粪便、垫料及饮水样品进行PCR扩增及测序。结果:空气菌落总数为3.79×104CFU/m3,粪便菌落总数为2.67×107CFU/g,垫料菌落总数为3.7×106CFU/g,饮水菌落总数为12 CFU/m L。基于16S r DNA高通量测序结果:鸭场粪便、垫料及饮水9个样品共获得有效序列总数为406145,优化序列的总数为336727,平均测序读长在319～529 bp之间;在97%的相似度水平下共产生有效OTUs个数为4375,共有的数量为24;群落组成结构中有41门、44纲、82目、137科、311属、250种的菌群被鉴定;在细菌属水平,检测出里氏杆菌属、埃希菌属、沙门菌属、链球菌属、葡萄球菌属等潜在动物病原菌。2.五种消毒剂对鸭场常见细菌的杀菌效果及消毒剂耐药基因检测与分析选用五种消毒剂（聚维酮碘、苯扎溴铵、月苄三甲氯铵、复方戊二醛、戊二醛癸甲溴铵）,对鸭场分离出的五种常见细菌（大肠杆菌、鸭疫里默氏杆菌、巴氏杆菌、沙门氏菌、葡萄球菌）进行最小抑菌浓度（MIC）和最小杀菌浓度（MBC）测定,并配制这五种消毒剂的最小杀菌浓度对大肠杆菌进行悬液定量杀菌试验,观察这五种消毒剂对大肠杆菌的杀菌最短作用时间。设计15对消毒剂耐药基因（ade G、ade J、fab I、amv A、ade T1、ade T2、abe D、abe M、ade B、car O、qac E?1、qac A/B、qac C、qac G、qac J）特异性引物,通过PCR扩增分析这5种病原菌携带耐消毒剂基因情况。结果:聚维酮碘对大肠杆菌、沙门氏菌、葡萄球菌的MICs/MBCs均为1:4,对鸭疫里默氏杆菌及巴氏杆菌的MICs/MBCs均为1:8;苯扎溴铵对这5种病原菌的MICs/MBCs分别为1:200、1:25;月苄三甲氯铵对这5种病原菌的MICs/MBCs分别为1:1920、1:960;复方戊二醛对这5种病原菌的MICs/MBCs分别为1:1200、1:600;戊二醛癸甲溴铵对这5种病原菌的MICs/MBCs分别为1:1000、1:500。复方戊二醛在MBC下作用1 min可对大肠杆菌的杀灭率达100%;聚维酮碘、月苄三甲氯铵、戊二醛癸甲溴铵在MBC下作用3 min可对大肠杆菌的杀灭率达100%;苯扎溴铵在MBC下作用5 min可对大肠杆菌的杀灭率达100%。在1株大肠杆菌、1株葡萄球菌、1株鸭疫里默氏杆菌中检测出耐消毒剂基因qac E?1,阳性率为30%（3/10）,其他14种耐消毒剂基因未检测出。3.五种消毒剂对鸭场进行现场消毒试验分别配制最小杀菌浓度的苯扎溴铵、月卞三甲氯铵、复方戊二醛及戊二醛癸甲溴铵4种消毒剂,采用雾线、喷洒消毒方法对舍饲鸭场空气、漏缝地板、料槽、蛋框及运输车车轮进行现场消毒,配制最小杀菌浓度的聚维酮碘,对鸭子脚部皮肤进行涂抹消毒,测定这五种消毒剂消毒前后的菌落总数变化,计算这5种消毒剂对细菌的消亡率。结果:戊二醛癸甲溴铵对鸭舍空气细菌消亡率最高,为34.85%;复方戊二醛对漏缝地板细菌消亡率最高,为96.78%;戊二醛癸甲溴铵对料槽细菌消亡率最高,为74.35%;复方戊二醛对蛋框细菌消亡率最高,为81.31%;复方戊二醛对运输车车轮细菌消亡率最高,为87.5%;聚维酮碘对鸭子脚部皮肤细菌的消亡率为72.45%。结论:1.鸭场中空气细菌菌落数为3.79×104CFU/m3,超出NY/T 388-1999畜禽场环境质量标准限值（25000 CFU/m3）;饮水菌落总数为12 CFU/m L,符合GB 5749—2006生活饮用水卫生标准（100 CFU/m L）;粪便菌落总数为2.67×107CFU/g,超出国标关于粪便处理标准（1×106CFU/g）;垫料菌落总数为3.7×106CFU/g,超出了国标规定的清洁土壤数值（1×104CFU/g）。2.基于16S r DNA高通量测序成功地检测了鸭场（粪便、垫料及饮水）细菌群落结构的多样性,获得了全面且深入的菌群信息。9个样品共获得有效序列总数为406145,优化序列的总数为336727,平均测序读长在319～529 bp之间;在97%的相似度水平下共产生有效OTUs个数为4375,涵盖了41门、44纲、82目、137科、311属、250种的细菌菌群。3.聚维酮碘溶液在稀释比为1:4,至少作用3 min可表现出较好杀菌效果;苯扎溴铵溶液在稀释比为1:25,至少作用5 min可表现出较好杀菌效果;月苄三甲氯铵溶液在稀释比为1:960,至少作用3 min可表现出较好杀菌效果;复方戊二醛溶液在稀释比为1:600,至少作用1 min可表现出较好杀菌效果;戊二醛癸甲溴铵溶液在稀释比为1:500,至少作用3 min可表现出较好杀菌效果。4.在大肠杆菌、葡萄球菌、鸭疫里默氏杆菌中均检测出qac E?1耐消毒剂基因,且阳性率为30%（3/10）。5.通过配制最小杀菌浓度的五种消毒剂对鸭场进行现场消毒试验中,复方戊二醛对漏缝地板、蛋框、运输车车轮的细菌消亡率最高,戊二醛癸甲溴铵对鸭舍空气、料槽的细菌消亡率最高,聚维酮碘对鸭子脚部的细菌的杀灭效果良好。
罗致茜[4]（2020）在《猪场消毒剂效果评价及细菌对消毒剂抗性研究》文中指出消毒是防控传染病最重要、高效、经济的措施,消毒剂的广泛应用为养殖场提高效益、预防和控制疾病发生发挥了巨大的作用。但随着消毒剂大量使用,导致细菌对其产生耐药性,使消毒效果出现下降,目前少见此方面的研究报道,给养殖场消毒带来困惑,因此,开展养殖场细菌对消毒剂的敏感性调查,对高效消毒剂选择,提高养殖场消毒效果和强化疾病防控意义重大。本研究通过调查贵州省5个规模化养猪场的细菌污染情况及消毒剂的耐药情况,采集猪场猪肛门拭子样品300份、皮肤拭子样品100份,按照国家标准和地方标准分离鉴定大肠杆菌、沙门氏菌、肠球菌和金黄色葡萄球菌。应用微量肉汤稀释法测定分离菌对常用的二氯异氰脲酸钠、聚维酮碘、戊二醛、氢氧化钠、过氧乙酸、复合酚、苯扎溴铵、百毒杀、月苄三甲氯铵9种消毒剂的MIC值,采用酚系数法测定对这9种消毒剂进行消杀效果研究,以评价目前常用消毒剂对猪场的消杀作用;并应用PCR方法对QACs消毒剂耐药基因进行检测。结果:（1）五个养殖场常用的消毒剂主要有卤素类（二氯异氰脲酸钠、聚维酮碘）、戊二醛、氧化剂类（过氧乙酸）、碱类（氢氧化钠）、酚类（复合酚）、季铵盐类（苯扎溴铵、百毒杀）。（2）常用9种消毒剂在推荐浓度下对标准菌株大肠杆菌（ATCC25922）和金黄色葡萄球菌（ATCC25923）具有相同的杀灭活性,其MIC值分别为二氯异氰脲酸钠2048mg/L、聚维酮碘1024mg/L、戊二醛512mg/L、氢氧化钠1024mg/L、过氧乙酸512mg/L、复合酚16mg/L、苯扎溴铵4mg/L、百毒杀8mg/L、月苄三甲氯铵32mg/L。9种消毒剂使用酚系数测定法对金黄色葡萄球菌标准菌株（ATCC6538）杀菌效力评价的结果表明:不同消毒剂对细菌的杀菌效力存在一定的差别,且季铵盐类消毒剂的消毒效果最好,酚系数按大小顺序排列为:百毒杀>苯扎溴铵>月苄三甲氯铵>复合酚>氢氧化钠>过氧化氢>戊二醛>聚维酮碘>二氯异氰脲酸钠,推荐优先使用季铵盐类消毒剂。（3）从猪场分离的大肠杆菌、沙门氏菌、肠球菌和金黄色葡萄球菌对9种消毒药的MIC值:复合酚128mg/L,MIC90值高于标准菌株8倍;过氧乙酸2048mg/L,MIC90值高于标准菌株4倍;二氯异氰脲酸钠4096mg/L,MIC90值高于标准菌株2倍;聚维酮碘2048mg/L,MIC90值高于标准菌株2倍;戊二醛1024mg/L,MIC90值高于标准菌株2倍苯扎溴铵8mg/L,MIC90值高于标准菌株2倍;百毒杀16mg/L,MIC90值高于标准菌株2倍;月苄三甲氯铵64mg/L,MIC90值高于标准菌株2倍;氢氧化钠1024mg/L,MIC90值与标准菌株相同。表明除氢氧化钠外分离菌株对常用消毒剂表现出一定程度的耐药性。（4）在分离菌种中检测到qac E?1、qac A/B、qac E、qac F、qac G、qac H、sug E（c）、sug E（p）、mec A 9种QACs消毒剂耐药基因,其中大肠杆菌、沙门氏菌、肠球菌中sug E（c）基因检出率最高,分别为87.23%、93.55%、88.16%;qac F检出率最高为67.44%,且耐药基因谱最广;qac A/B基因仅在金黄色葡萄球菌中仅检出,检出率为6.98%;qac E?1、qac E、qac F、sug E（c）、sug E（p）基因在4种细菌中普遍流行。结论:常用9种消毒剂在推荐使用范围内有杀菌效果,对标准菌株的均有较好的杀灭效果,但4种猪场分离菌株对除氢氧化钠以外的8种消毒剂呈现2-8倍的耐药,被调查猪场推荐使用氢氧化钠和二氯异氰脲酸钠,谨慎使用过氧乙酸,多数猪场不推荐使用复合酚制剂。消毒剂耐药基因在养猪场的大肠杆菌、沙门氏菌、肠球菌、金黄色葡萄球菌中普遍流行,应当引起重视。
王爱玲[5]（2016）在《四种消毒剂对猪场常见病原微生物的杀灭效果研究》文中认为随着养猪业的快速发展,规模化程度不断提高,在提高了养殖效益的同时,疫病的多发也成为困扰养猪场的重要问题。及时确定引起疫病的病原,并采取有效的生物安全措施是规模化猪场疫病防控的主要工作,消毒是一项经常性和基础性的生物安全措施,选取有效的消毒剂和作用方式,是保证消毒效果的关键。本研究在某规模化猪场发生的一起仔猪腹泻病原的分离鉴定、疫情扑灭的基础上选取生产中常用的四种消毒剂,在实验条件下研究其对大肠埃希菌、志贺菌、链球菌、金黄色葡萄球菌和伪狂犬病病毒等猪场常见病原的杀灭作用。取得以下结果:1.在排除仔猪腹泻是由猪流行性腹泻病毒（PEDV）和猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）引起的基础上,从患病猪肝脏中分离获得一株革兰氏阴性细菌,经生化试验和16s rRNA基因序列分析,确定其为大肠埃希菌;分离菌对头孢类抗生素高度敏感,对氧氟沙星类抗菌药物中度敏感,对氨苄西林?链霉素?哌拉西林等药物不敏感;经对病猪用敏感药物治疗和环境消毒,本次疫情得以扑灭。2.分别选取戊二醛-癸甲溴铵、溴化二甲基二癸基烃铵、过硫酸氢钾和次氯酸钠为候选消毒剂,大肠埃希菌、志贺菌、金黄色葡萄球和链球菌为目标菌,研究不同条件下各种消毒剂的最佳使用方法。（1）有效中和剂的选择在中和剂对细菌无明显影响的前提下,确定各种消毒剂的中和剂分别为:戊二醛-癸甲溴铵（500 mg/L）的中和剂为吐温-80（3 000 mg/L）+甘氨酸（1000mg/L）;溴化二甲基二癸基烃铵（250 mg/L）的中和剂为吐温-80（3000 mg/L）+卵磷脂（300 mg/L）;过硫酸氢钾（2 500 mg/L）的中和剂为硫代硫酸钠（300 mg/L）;次氯酸钠（275 mg/L）的中和剂为硫代硫酸钠（300 mg/L）。（2）对大肠埃希菌有效杀灭作用条件在无蛋白干扰物的条件下:戊二醛-癸甲溴铵（125 mg/L）、溴化二甲基二癸基烃铵（31.25 mg/L）、过硫酸氢钾（312.5 mg/L）、次氯酸钠（138 mg/L）对大肠埃希菌（1.57×107cfu）的完全杀灭条件为:37℃、25℃、4℃作用5 min。在有蛋白干扰物时:（1）有机物浓度为3%时:戊二醛-癸甲溴铵（250 mg/L）、溴化二甲基二癸基烃铵（62.5 mg/L）、过硫酸氢钾（312.5 mg/L）,次氯酸钠（138 mg/L）对大肠埃希菌（1.57×107 cfu）的完全杀灭条件为:25℃作用10 min。（2）有机物浓度为25%时,戊二醛-癸甲溴铵（1000 mg/L）、溴化二甲基二癸基烃铵（125 mg/L）、过硫酸氢钾（625 mg/L）、次氯酸钠（690 mg/L）对大肠埃希菌（1.57×107 cfu）的完全杀灭条件为:25℃作用10 min。（3）对金黄色葡萄球菌的有效杀灭条件在无蛋白干扰物的条件下:戊二醛-癸甲溴铵（125 mg/L）、溴化二甲基二癸基烃铵（31.25 mg/L）、过硫酸氢钾（312.5 mg/L）、次氯酸钠（138 mg/L）对金黄色葡萄球菌（2.15×107 cfu）的完全杀灭条件为:在37℃、25℃、4℃作用5 min。在有蛋白干扰物时:（1）有机物浓度为3%时:戊二醛-癸甲溴铵（125 mg/L）、溴化二甲基二癸基烃铵（125 mg/L）、过硫酸氢钾（1250 mg/L）、次氯酸钠（276 mg/L）对金黄色葡萄球菌（2.15×107）的完全杀灭条件为:在25℃作用10 min。（2）有机物浓度为25%时:戊二醛-癸甲溴铵（1250 mg/L）、溴化二甲基二癸基烃铵（250 mg/L）、过硫酸氢钾（2500 mg/L）、次氯酸钠（1104 mg/L）对金黄色葡萄球菌（2.15×107 cfu）的完全杀灭条件为:在25℃作用10 min。（4）对志贺菌的有效杀灭条件在无蛋白干扰物时:戊二醛-癸甲溴铵（125 mg/L）、溴化二甲基二癸基烃铵（31.25mg/L）、过硫酸氢钾（312.5 mg/L）、次氯酸钠（138 mg/L）对志贺氏菌（1.24×107 cfu）的完全杀灭条件为:在37℃、25℃、4℃作用5 min。（5）对链球菌的有效杀灭条件在无蛋白干扰物的条件下:戊二醛-癸甲溴铵（125 mg/L）、溴化二甲基二癸基烃铵（31.25 mg/L）、过硫酸氢钾（6250 mg/L）、次氯酸钠（138 mg/L）对链球菌（1.2×107cfu）的完全杀灭条件为:在37℃、25℃、4℃作用5 min。3.戊二醛-癸甲溴铵对伪狂犬病病毒的有效杀灭条件戊二醛-癸甲溴铵（125 mg/L）有效中和剂为甘氨酸（3000 mg/L）,此剂量消毒剂和中和剂均对PK15细胞生长无影响;对108.1TCID50的伪狂犬病病毒最佳杀灭条件为25℃作用30 min。在对猪场环境进行消毒杀灭病原时,四种消毒剂使用推荐作用条件为:戊二醛-癸甲溴铵（1250 mg/L）、溴化二甲基二癸基烃铵（250 mg/L）、过硫酸氢钾（2500 mg/L、）次氯酸钠（1104 mg/L）,室温条件下（25℃）,作用不少于10 min。
雷云峰,康润敏,曾凯,吕学斌,陈晓晖[6]（2015）在《市售15种猪场消毒剂消毒效果的比较》文中研究指明为评价市售的15种消毒剂的消毒效果,采用悬液定量杀菌试验对15种消毒剂的杀灭能力进行实验室评价,从中选择最有效的3种进行喷雾消毒,检测其杀菌率。结果:15种消毒剂中百毒杀S、百胜-30和新大卫均能够在10 min内100%的杀灭大肠杆菌、金黄色葡萄球菌,而作用10 min对枯草芽孢杆菌黑色变种芽孢的杀灭率分别能达到82.9%,56.8%和59.3%,喷雾消毒后30 min和48 h的杀菌率分别为81.5%,65.1%,80.9%和54.2%,43.5%,55.2%。表明:15种消毒剂中百毒杀S、百胜-30和新大卫的杀灭能力最强,现场消毒后以百胜-30和百毒杀S的杀菌和持续的效果最好。
伍清林,金兰梅,张玉红,马玉,刘红梅[7]（2012）在《猪舍环境中细菌总数测定和消毒剂对致病菌的敏感性试验》文中指出为掌握规模化养猪场环境中的细菌菌落总数,为了选择最佳的消毒剂,以便为养猪场细菌性疾病的预防与控制提供依据,本试验在南京市郊某规模化养猪场中采集空气样本进行细菌总数检测和主要致病菌的鉴定,应用常用的消毒剂对致病菌进行消毒效果试验。结果显示,不同种类的猪舍内细菌菌落总数不同,保育舍是103.18×103cfu/m3>哺乳仔猪舍90.89×103cfu/m3>生长育肥猪舍54.15×103cfu/m3,保育舍和哺乳仔猪舍严重超出国家规定的标准,生长育肥舍在标准范围内。舍内细菌菌落总数平均是82.74×103cfu/m3,高于舍外16.54×103cfu/m3。不同浓度的消毒剂对致病性金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的消毒效果不同,4种消毒剂与混合株菌悬液作用5min,使用0.125%的浓度,复方戊二醛对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的杀灭率均为100%,安贝洁的杀灭率分别是99.6%和93.1%,圣洁的杀灭率分别是95.9%和93.8%,菌克星消毒液（1210）几乎没有作用。从杀菌效果可以看出,复方戊二醛消毒剂的杀菌效果最好。
伍清林,金兰梅,张玉红,马玉,刘红梅[8]（2012）在《猪舍环境中主要致病菌的分离鉴定和对消毒剂的敏感性试验》文中研究说明为了解规模化养猪场环境中的细菌菌落总数,选择最佳的消毒剂,预防与控制猪细菌性疾病,本试验在南京市郊某规模化养猪场中采集空气样本,进行细菌总数检测和主要致病菌分离鉴定,应用常用的消毒剂对其进行消毒效果试验。结果显示,不同种类的猪舍内细菌菌落总数不同,保育舍是103.18×103cfu/m3>哺乳仔猪舍90.89×103cfu/m3>生长育肥猪舍54.15×103cfu/m3;舍内平均细菌菌落总数82.74×103cfu/m3,高于舍外16.54×103cfu/m3。保育舍和哺乳仔猪舍严重超出国家规定的标准,生长育肥舍在标准范围内。不同浓度的消毒剂对致病菌的消毒效果不同,4种消毒剂分别使用0.125%的浓度与混合株菌悬液作用5min,复方戊二醛对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的杀灭率均为100%,安贝洁的杀灭率分别是99.6和93.1%,圣洁的杀灭率分别是95.9%和93.8%,菌克星消毒液（1210）几乎没有作用。从杀菌效果可以看出,复方戊二醛消毒剂的杀菌效果最好。
唐维英[9]（2013）在《陕西省某猪场常见细菌病及消毒效果研究》文中指出目前，环境控制成为疫病预防的重要手段，消毒是环境控制的主要内容之一，本试验通过研究陕西省某猪场常用化学消毒剂对猪源致病菌的消毒效果，为生产使用兽用消毒剂提供参考。主要研究内容与结果如下：一、陕西省某猪场常见细菌病发病情况调查在实习期间，通过座谈、查阅防疫生产记录、实验室诊断等方法，统计了从2011年1月到2013年1月所发生的主要细菌性疾病，其中以大肠杆菌病、仔猪副伤寒、猪链球菌病、副猪嗜血杆菌病、猪传染性萎缩性鼻炎以及猪葡萄球菌病等6种疾病病例偏高，为该场猪只较为常见细菌性疾病，分析这6种细菌病的发病原因，提出针对性防治措施。为使用消毒剂预防猪场常见细菌性疾病提供一定的参考。二、陕西省某猪场猪舍外围环境消毒效果评价本试验目地在于评价该场车辆、人员活动频繁的猪舍外围区域的消毒效果。选择8处区域进行消毒前后采样，培养细菌，统计菌落数，计算菌落标准偏差，分析消毒前后菌落数降少率，发现该场猪舍外围大部分区域消毒效果比较理想，但有些区域消毒效果不理想，这与消毒前的清除工作有关，提出合理的消毒建议，为评价整个猪场消毒工作提供一定的参考。三、第三代季铵盐消毒剂对猪源致病菌的杀菌效果研究为了研究第三代季铵盐消毒剂对大肠杆菌、沙门氏菌、巴氏杆菌、副猪嗜血杆菌、链球菌、金黄色葡萄球菌等6种猪场常见致病菌的杀灭效果，并测定该消毒剂对上述常见致病菌的最小杀菌浓度（minimum bactericidal concentration,MBC）。按照GB15981-1995规定的液体消毒剂消毒效果评价方法与标准进行试验研究。该消毒剂与上述常见致病菌作用13min后，全量培养，杀菌率能达到100%，以及对大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌的最小杀菌浓度均为200mg/L，对巴氏杆菌、猪链球菌、副猪嗜血杆菌的最小杀菌浓度均为20mg/L，表明该消毒剂对猪场常见致病菌具有良好的杀菌效果。该消毒剂在兽医临床上值得推广使用。
王建[10]（2011）在《上海地区猪链球菌病流行情况调查及风险控制分析与实践》文中研究说明猪链球菌病（Swine Streptococcosis）是链球菌属(（Streptococcus）中马链球菌兽疫亚种（S. equi ssp. zooepidemicus）、马链球菌类马亚种（S. equi ssp. equisimilis）、猪链球菌（S. suis）、类猪链球菌（S. porcinus）、停乳链球菌类马亚种（S. dysgalactiae ssp. equisimilis）等链球菌引致猪疫病的总称。临床上主要表现为淋巴结脓肿、脑膜炎、关节炎以及败血症为主要特征,其中以败血症的危害最大,在某些特定诱因作用下,发病猪群的死亡率可以达到80%。其中,猪链球菌是世界范围内引致猪链球菌病最主要的病原,该茵可引起猪脑膜炎以及败血症等疫病,人通过特定的传播途径亦可感染该菌。近年来猪链球茵病在我国广泛流行,特别是猪链球菌2型、马链球菌兽疫亚种感染,严重影响着我国的养殖业,造成了很大的经济损失。通过对1998～2010年13年临床病例的回顾调查及猪场的采样监测,了解猪链球菌在畜间、空间分布的情况、以及茵株毒力和耐药性的变异情况、为防控本病提供依据。通过对1998～2010年上海及江苏、浙江、福建、江西、安徽等周边地区的猪链球菌病病例回顾调查和菌株收集,并于2009～2010年发放并回收《猪链球菌病调查表》,开展血清学、病原学监测等手段开展调查研究。结果表明,调查地区猪群链球菌病征复杂多样,败血症型和关节炎型最多,分别占30.13%和26.99%,其次为脑膜脑炎型和心内膜炎型分别占22.8%和14.64%,脑膜脑炎型近年来有上升趋势,临床上多与猪蓝耳病病毒、猪圆环病毒、伪狂犬病毒、副猪嗜血杆菌、大肠杆菌、沙门茵等形成多重感染,对宿主造成更大的危害。实验证实,猪链球菌是目前临床病例的优势菌株（47.78%）,其中猪链球菌2型有109株,占21.08%,其他分离到猪链球菌还包括1、3、4、5、7、8、9、l0、11、13、15、16、25、28等血清型。C群链球菌仍占有一定比例（16.05%）,其中马链球菌兽疫亚种（SeZ）有48株,占9.28%。另外排除猪链球菌交叉反应后D群有41株（7.93%）、B群有15株（2.9%）、A群1株（0.19%）,值得注意的是有159株（30.75%）不属于A～D、F和G群,也不是猪链球菌。说明猪链球菌2型作为一种危害严重的人畜共患病病原,已经成为主要的致病菌。健康猪群猪链球菌带茵率为8.55%,分离到2、3、4、5、9、10、11、13、15、16、19、21、22、25、26、29等血清型猪链球菌,其中15型最多（13.24%）,其次为2型（10.5%）、29型（6.85%）、26型（5.48%）、3型（5.48%）,另外从3家猪场的猪舍空气样本中检出24株猪链球菌,分离率为1.45%,其中3型4株,15型1株,29型2株,17株未鉴定血清型。采用7种毒力因子两组多重PCR方法,检测63株猪链球菌临床分离株及26株健康猪群分离株,结果发现,高毒力基因型mrp+epf+sly+gdh+gapdh+orf2+fbps+的菌株在上海地区猪链球菌2型分离菌株中占主导地位（68.75%）,健康猪携带菌株也具有临床菌株相似的毒力因子（60.86%）。106株猪源链球菌药敏试验结果表明,分离菌株已对多种抗生素产生了耐药性,对林可胺类、四环素类、大环内酯类、氨基糖苷类药物高度耐药,对磺胺类药物产生40%左右的耐药性；以往临床首选的青霉素、氨苄青霉素,也分别有34.9%和11.3%的菌株产生了耐药性。为控制猪场链球菌感染的风险,降低猪链球菌发病率。对猪链球菌感染的可能风险因素进行了分析,引入HACCP理念,绘制了猪场猪链球菌感染的流程图,识别出猪场猪链球菌感染的风险因子及关键控制点（CCP-like）:隐性带菌猪、混群饲养、精液、病毒性免疫抑制病（猪蓝耳病、PCV-2感染、猪伪狂犬病等）、疫苗免疫、药物预防。针对各关键控制点制定出相应的防控措施,为猪链球菌的防控提供技术思路。为能控制猪场链球茵感染的风险,根据识别出的猪链球菌感染的风险因子和关键控制点,制定了一套适用于上海地区猪场的猪链球菌综合防控措施。控制重点为隐性带菌及病死猪、猪链球菌疫苗免疫结合药物防治、二点四段猪群流动管理、猪蓝耳病、PCV-2感染、猪伪狂犬病等免疫抑制病的控制等。控制措施在嘉定区、浦东新区、松江区、崇明县年出栏为1万头以上的4个猪场以及2个农户示范应用,并定期进行监测和验证。结果表明,示范猪场猪链球菌隐性带茵猪的的比例由实施前的9.12%（31头）下降至6.47%（22头）,下降了2-3%,猪链球菌2型带菌率由实施前的1.47%（5头）,下降至0.29%（1头）,效果均显着（p<0.05）,但该措施的实施对猪场管理、设施等要求较高,需在良好操作规范的基础上实施,否则效果并不明显,如管理不到位的示范猪场四。
二、6种消毒剂对集约化猪场大肠杆菌病的预防效果（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、6种消毒剂对集约化猪场大肠杆菌病的预防效果（论文提纲范文）
（1）复方癸甲氯铵消毒剂杀菌作用的影响因素及现场消毒试验研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 英文缩略表 |
| 第1章 绪论 |
| 1.1 养殖场疾病现状 |
| 1.2 消毒剂的分类 |
| 1.3 国内外消毒剂研究进展 |
| 1.4 消毒剂杀菌效果的影响因素 |
| 1.5 研究目的与意义 |
| 第2章 复方癸甲氯铵消毒剂杀菌效果影响因素试验研究 |
| 2.1 材料与方法 |
| 2.2 结果 |
| 2.3 讨论 |
| 2.4 小结 |
| 第3章 复方癸甲氯铵消毒剂现场消毒试验研究 |
| 3.1 材料与方法 |
| 3.2 结果 |
| 3.3 讨论 |
| 3.4 小结 |
| 第4章 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 作者简历 |
（2）大肠杆菌S9922生物学特性及特有基因的原核表达（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 英文缩略词表 |
| 第一章 绪论 |
| 1 研究目的及意义 |
| 2.E.coli研究进展 |
| 2.1 E.coli生物学特性 |
| 2.2 E.coli系统发育分型的研究进展 |
| 3 Ex PEC研究进展 |
| 3.1 ExPEC流行情况 |
| 3.2 ExPEC毒力因子研究进展 |
| 4 E.coli耐药性现状 |
| 5 养殖环境疾病的预防 |
| 第二章 试验研究 |
| 试验一 大肠杆菌S9922生物学特性及不同环境消毒剂对其的杀灭作用 |
| 1 材料 |
| 1.1 供试菌株 |
| 1.2 实验动物以及分组 |
| 1.3 主要试剂 |
| 1.4 培养基 |
| 1.5 主要仪器及设备 |
| 1.6 主要试剂的配制 |
| 2 方法 |
| 2.1 细菌培养和鉴定 |
| 2.2 生化试验 |
| 2.3 种系发育分群 |
| 2.4 血清学鉴定 |
| 2.5 溶血性试验 |
| 2.6 E.coli S9922 LD_(50)的测定 |
| 2.7 耐药性的测定 |
| 2.8 环境消毒剂的杀灭作用 |
| 3 结果 |
| 3.1 细菌培养及鉴定结果 |
| 3.2 生化试验结果 |
| 3.3 系统发育分群试验结果 |
| 3.4 血清学鉴定结果 |
| 3.5 溶血性试验结果 |
| 3.6 LD_(50)的测定结果 |
| 3.7 药敏试验结果 |
| 3.8 环境消毒剂对E.coli S9922的杀灭作用 |
| 4 讨论 |
| 4.1 大肠杆菌S9922的生物学特性 |
| 4.2 不同环境消毒剂对E.coli S9922的杀灭作用 |
| 5.小结 |
| 试验二 大肠杆菌S9922 fliC3和fimD蛋白的生物信息学分析及克隆表达 |
| 1.材料 |
| 1.1 菌种 |
| 1.2 主要仪器设备 |
| 1.3 主要试剂与耗材 |
| 1.4 主要溶液配制 |
| 2.方法 |
| 2.1 黏附蛋白fliC3和fimD生物信息学分析 |
| 2.2 fliC3和fimD序列的引物设计 |
| 2.3 fliC3和fimD目的片段的克隆 |
| 2.4 重组原核表达载体pET-32a-fliC3和pET-32a-fimD的构建 |
| 2.5 重组蛋白的诱导表达 |
| 2.6 Western Blot检测 |
| 3 结果 |
| 3.1 fliC3和fimD基因生物信息学分析 |
| 3.2 fliC3基因和fimD基因的扩增 |
| 3.3 重组质粒的构建及双酶切鉴定 |
| 3.4 pET-32a-fliC3和pET-32a-fimD的诱导表达 |
| 3.5 重组蛋白的纯化 |
| 3.6 Western Blot检测结果 |
| 4 讨论 |
| 4.1 fliC3和fimD蛋白的生物信息学分析 |
| 4.2 fliC3和fimD蛋白的表达和纯化 |
| 5.小结 |
| 全文结论 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
| 导师评阅表 |
（3）五种消毒剂对鸭场常见细菌的杀菌效果分析（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 缩略词表 |
| 文献综述 消毒剂对微生物的杀灭效果研究进展 |
| 1 化学消毒发展简史 |
| 2 消毒剂的种类 |
| 3 消毒剂对微生物的杀菌机理 |
| 4 消毒剂对微生物的杀灭效果 |
| 4.1 环境微生物的检测方法 |
| 4.2 消毒剂对细菌的杀灭效果 |
| 4.3 消毒剂对病毒的杀灭效果 |
| 4.4 消毒剂对寄生虫的杀灭效果 |
| 5 消毒剂的耐药性 |
| 6 影响消毒效果的因素 |
| 前言 |
| 试验研究 |
| 第一章 贵州省某舍饲鸭场环境微生物的检测与分析 |
| 1 材料 |
| 1.1 主要试剂 |
| 1.2 主要仪器 |
| 1.3 舍饲鸭场基本情况 |
| 2 方法 |
| 2.1 鸭场环境(空气、粪便、垫料及饮水)菌落总数测定 |
| 2.2 鸭场环境(粪便、垫料及饮水)菌群16SrDNA高通量测序 |
| 2.2.1 DNA文库构建 |
| 2.2.2 文库定量及测序 |
| 3 结果 |
| 3.1 鸭场空气、粪便、垫料及饮水中的菌落总数测定结果 |
| 3.2 鸭场粪便、垫料及饮水菌群16SrDNA高通量测序结果 |
| 3.2.1 鸭场粪便、垫料及饮水样本PCR扩增结果 |
| 3.2.2 基于16SrDNA高通量测序结果 |
| 4 讨论 |
| 4.1 鸭场细菌菌落总数分析 |
| 4.2 基于16SrDNA高通量测序方法分析 |
| 5 小结 |
| 第二章 五种消毒剂对鸭场常见细菌的杀菌效果及消毒剂耐药基因检测与分析 |
| 1 材料 |
| 1.1 试验菌株 |
| 1.2 主要试剂 |
| 1.3 主要仪器 |
| 2 方法 |
| 2.1 菌悬液的制备 |
| 2.2 中和剂鉴定试验 |
| 2.3 五种消毒剂对鸭场常见五种病原菌的MIC测定 |
| 2.4 五种消毒剂对鸭场常见五种病原菌的MBC测定 |
| 2.5 悬液定量杀菌试验 |
| 2.6 耐消毒剂基因检测 |
| 3 结果 |
| 3.1 中和剂鉴定结果 |
| 3.2 五种消毒剂对鸭场常见病原菌的MICs测定结果 |
| 3.3 五种消毒剂对鸭场常见病原菌的MBCs测定结果 |
| 3.4 悬液定量杀菌试验结果 |
| 3.5 耐消毒剂基因检测结果 |
| 4 讨论 |
| 4.1 五种消毒剂消毒效果的比较 |
| 4.2 细菌的耐药性分析 |
| 5 小结 |
| 第三章 五种消毒剂对鸭场进行现场消毒试验 |
| 1 材料 |
| 1.1 主要试剂 |
| 1.2 主要仪器 |
| 2 方法 |
| 2.1 采样 |
| 2.2 菌落总数统计 |
| 2.3 消亡率的计算 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 5 小结 |
| 全文结论 |
| 参考文献 |
| 附录一 鸭场消毒规程的制定 |
| 附录二 攻读硕士期间发表论文情况 |
| 致谢 |
（4）猪场消毒剂效果评价及细菌对消毒剂抗性研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 1 文献综述 |
| 1.1 猪场疾病现状 |
| 1.2 猪场对传染性疾病的防控对策 |
| 1.3 消毒剂的作用与应用 |
| 1.3.1 消毒剂分类 |
| 1.3.2 消毒剂在防疫中的地位 |
| 1.3.3 消毒剂应用现状 |
| 1.3.4 消毒剂研究进展 |
| 1.3.5 消毒剂应用存在的问题 |
| 1.4 细菌对消毒剂的耐药现状 |
| 1.5 本研究的目的与意义 |
| 2 试验材料 |
| 2.1 标准菌株 |
| 2.2 试验仪器 |
| 2.3 试验药品与试剂 |
| 3 试验方法 |
| 3.1 采样及细菌分离鉴定 |
| 3.1.1 样品采集 |
| 3.1.2 细菌分离鉴定 |
| 3.2 细菌对消毒剂的MIC测定 |
| 3.2.1 菌悬液制备 |
| 3.2.2 消毒剂稀释液配制 |
| 3.2.3 MIC测定板制备 |
| 3.2.4 MIC值测定 |
| 3.2.5 MIC值结果判定 |
| 3.3 消毒剂消杀效果评价 |
| 3.3.1 酚系数测定法 |
| 3.3.2 消毒剂酚系数测定 |
| 3.4 消毒剂相关耐药基因的检测 |
| 3.4.1 DNA模板的制备 |
| 3.4.2 引物 |
| 3.4.3 PCR扩增 |
| 4 结果与分析 |
| 4.1 采样及分离鉴定结果 |
| 4.1.1 大肠杆菌分离鉴定结果 |
| 4.1.2 沙门氏菌分离鉴定结果 |
| 4.1.3 肠球菌分离鉴定结果 |
| 4.1.4 金黄色葡萄球菌分离鉴定结果 |
| 4.2 消毒剂MIC结果 |
| 4.2.1 标准菌株MIC值 |
| 4.2.2 不同消毒剂在不同浓度下菌株占比情况 |
| 4.2.3 QL养殖场细菌对消毒剂MIC分布情况 |
| 4.2.4 YX养殖场细菌对消毒剂MIC分布情况 |
| 4.2.5 JH养殖场细菌对消毒剂MIC分布情况 |
| 4.2.6 LS养殖场细菌对消毒剂MIC分布情况 |
| 4.2.7 RQ养殖场细菌对消毒剂MIC分布情况 |
| 4.2.8 分离菌株对消毒剂的MIC50和MIC_(90) |
| 4.2.9 各养殖场细菌对消毒剂的MIC_(90) |
| 4.3 酚系数测定结果 |
| 4.4 消毒剂相关耐药基因检测结果 |
| 4.4.1 消毒剂耐药基因PCR检测结果 |
| 4.4.2 消毒剂耐药基因百分比 |
| 4.4.3 QACs消毒剂耐药基因谱 |
| 4.4.4 QL养殖场细菌QACs消毒剂耐药基因流行情况 |
| 4.4.5 YX养殖场细菌QACs消毒剂耐药基因流行情况 |
| 4.4.6 JH养殖场细菌QACs消毒剂耐药基因流行情况 |
| 4.4.7 LS养殖场细菌QACs消毒剂耐药基因流行情况 |
| 4.4.8 RQ养殖场细菌QACs消毒剂耐药基因流行情况 |
| 5 讨论 |
| 5.1 消毒剂使用调查 |
| 5.2 消毒剂MIC结果 |
| 5.3 酚系数测定结果 |
| 5.4 消毒剂相关耐药基因流行情况 |
| 6 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
（5）四种消毒剂对猪场常见病原微生物的杀灭效果研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 文献综述 |
| 第一章 猪场常见病原微生物及消毒防控 |
| 1.1 规模化猪场常见病原微生物及卫生处理 |
| 1.1.1 常见细菌性病原的卫生处理 |
| 1.1.2 猪场常见病毒性病原及其卫生处理 |
| 1.2 消毒在规模化猪场疫病防控中的作用 |
| 1.2.1 消毒重要意义 |
| 1.2.2 猪场常用的消毒方法 |
| 1.2.3 化学消毒剂的使用与选择 |
| 1.3 常用化学消毒剂的作用机制 |
| 1.3.1 不同种类的消毒机剂对病原微生物的作用机制 |
| 1.3.2 影响消毒剂消毒效果的因素 |
| 1.3.3 消毒效果的检测 |
| 1.3.4 本研究的目的与意义 |
| 试验研究 |
| 第二章 陕西省某规模化猪场致仔猪腹泻病原的分离鉴定 |
| 2.1 材料 |
| 2.1.1 病情与检测样品采集 |
| 2.1.2 毒株 |
| 2.1.3 主要试剂 |
| 2.1.4 主要仪器 |
| 2.2 方法 |
| 2.2.1 样品中TGEV和PEDV的RT-PCR检测 |
| 2.2.1.1 引物设计和合成 |
| 2.2.1.2 病料总RNA的提取与cDNA合成 |
| 2.2.1.3 TGEV和PEDV目的基因的PCR扩增 |
| 2.2.2 样品中细菌分离鉴定 |
| 2.2.2.1 细菌分离及纯化 |
| 2.2.2.2 分离菌的生化鉴定 |
| 2.2.2.3 16s rRNA引物设计 |
| 2.2.2.4 细菌DNA的提取 |
| 2.2.2.5 细菌 16s rRNA的PCR的检测 |
| 2.2.2.6 PCR产物的序列测定 |
| 2.2.2.7 分离菌的药物敏感性试验 |
| 2.3 结果 |
| 2.3.1 病料中TGEV和PEDV的RT-PCR检测 |
| 2.3.2 细菌分离鉴定 |
| 2.3.2.1 细菌分离及纯化 |
| 2.3.2.2 分离菌株的生化 |
| 2.3.2.3 分离菌基因组 16s rRNA分析 |
| 2.3.2.4 分离菌的药敏试验 |
| 2.4 治疗效果 |
| 2.5 讨论 |
| 2.6 小结 |
| 第三章 四种化学消毒剂对猪场常见病原菌的杀菌作用研究 |
| 3.1 材料 |
| 3.1.1 菌株 |
| 3.1.2 主要试剂及培养基的配制 |
| 3.1.3 主要仪器 |
| 3.1.4 消毒剂的配制 |
| 3.2 方法 |
| 3.2.1 菌株的复苏 |
| 3.2.2 菌落总数的测定 |
| 3.2.3 菌悬液的制备 |
| 3.2.4 中和剂悬液定量鉴定试验 |
| 3.2.5 悬液定量杀菌试验 |
| 3.2.6 有机物对四种消毒剂的杀菌效果的影响 |
| 3.3 结果 |
| 3.3.1 菌落总数测定结果 |
| 3.3.2 中和剂使用量的确定 |
| 3.3.3 悬液定量杀菌结果 |
| 3.3.3.1 溴化二甲基二癸基烃铵消毒剂对4种病原菌的杀灭作用 |
| 3.3.3.2 戊二醛--癸甲溴胺消毒剂对4种病原菌的杀灭作用 |
| 3.3.3.3 过硫酸氢钾消毒剂对4种病原菌的杀灭作用 |
| 3.3.3.4 次氯酸钠消毒剂对4种病原菌的杀灭作用 |
| 3.3.4 有机物存在情况下四种消毒剂的杀菌作用 |
| 3.3.4.1 存在有机干扰物时四种消毒剂对大肠埃希菌的杀灭作用 |
| 3.3.4.2 存在有机干扰物时四种消毒剂对金黄色葡萄球菌的杀灭作用 |
| 3.4 讨论 |
| 3.5 小结 |
| 第四章 戊二醛－癸甲溴铵对猪伪狂病病毒的杀灭作用 |
| 4.1 材料 |
| 4.1.1 细胞、毒株 |
| 4.1.2 主要仪器与试剂 |
| 4.1.3 中和剂 |
| 4.1.4 PRV引物设计和合成 |
| 4.2 方法 |
| 4.2.1 细胞的复苏及病毒的增殖 |
| 4.2.2 伪狂犬病病毒滴度的测定 |
| 4.2.3 用于伪狂犬病病毒杀灭的消毒剂的中和剂的选择 |
| 4.2.4 消毒剂对伪狂犬病病毒的杀灭作用 |
| 4.3 结果 |
| 4.3.1 伪狂犬病病毒滴度的测定结果 |
| 4.3.2 中和剂的选择与最佳中和剂量确定 |
| 4.3.3 复合消毒剂对伪狂犬病病毒杀灭作用的影响 |
| 4.4 讨论 |
| 4.5 小结 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 缩略词表 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
（6）市售15种猪场消毒剂消毒效果的比较（论文提纲范文）
| 1材料与方法 |
| 1.1消毒剂及剂量 |
| 1.2试验菌株 |
| 1. 3试剂和仪器 |
| 1.4试验地点 |
| 1.5细菌悬液的制备 |
| 1.6中和剂的筛选 |
| 1.7悬液定量杀菌试验 |
| 1.8舍内细菌的采集 |
| 1.9消毒效果的检测 |
| 2结果 |
| 2.1中和剂的筛选 |
| 2.2悬液定量杀菌试验 |
| 2.3消毒效果 |
| 3讨论 |
（7）猪舍环境中细菌总数测定和消毒剂对致病菌的敏感性试验（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 猪场情况 |
| 1.2 试验设计 |
| 1.3 实验材料 |
| 1.3.1 培养基、试剂及仪器 |
| 1.3.2 消毒药品 |
| 1.3.3 实验动物 |
| 1.4 实验方法 |
| 1.4.1 空气环境中细菌总数测定 |
| 1.4.2 致病菌分离培养与鉴定 |
| 1.4.3 动物致病性试验 |
| 1.4.4 菌悬液的制备 |
| 1.4.5 消毒剂最小抑菌浓度的测定 |
| 1.4.6 消毒剂最小杀菌浓度的测定 |
| 1.4.7 消毒剂定量杀菌试验 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 猪舍环境中细菌总数 |
| 2.2 消毒剂最小抑菌浓度 |
| 2.3 消毒剂最小杀菌浓度 |
| 2.4 消毒剂定量杀菌试验 |
| 3 讨 论 |
（9）陕西省某猪场常见细菌病及消毒效果研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 文献综述 |
| 第一章 猪场环境消毒研究进展 |
| 1.1 猪场消毒概况 |
| 1.1.1 猪场消毒现状 |
| 1.1.2 猪场消毒存在误区 |
| 1.1.3 消毒建议 |
| 1.2 猪场常见细菌病及其消毒概况 |
| 1.2.1 副猪嗜血杆菌病 |
| 1.2.2 猪传染性萎缩性鼻炎 |
| 1.2.3 猪支原体肺炎 |
| 1.2.4 猪链球菌病 |
| 1.2.5 猪大肠杆菌病 |
| 1.2.6 仔猪副伤寒 |
| 1.3 兽用消毒剂研究进展 |
| 1.3.1 兽用消毒剂发展历程 |
| 1.3.2 兽用消毒剂作用过程 |
| 1.3.3 细菌对消毒剂的耐药性 |
| 1.3.4 兽用消毒剂协同杀菌作用 |
| 1.3.5 检测消毒剂效果方法 |
| 1.3.6 影响消毒剂消毒效果因素 |
| 试验研究 |
| 第二章 陕西省某猪场常见细菌病发病情况调查 |
| 2.1 材料 |
| 2.1.1 调查背景 |
| 2.1.2 主要培养基 |
| 2.1.3 主要试剂 |
| 2.1.4 主要仪器 |
| 2.1.5 试验动物 |
| 2.2 方法 |
| 2.2.1 临床调查法 |
| 2.2.2 实验室检测法 |
| 2.3 结果 |
| 2.3.1 临床调查结果 |
| 2.3.2 实验室检测结果 |
| 2.4 讨论 |
| 2.4.1 陕西省某猪场细菌性疾病发病情况分析 |
| 2.4.2 发病原因 |
| 2.4.3 防治措施 |
| 2.5 小结 |
| 第三章 陕西省某猪场猪舍外围环境消毒效果评价 |
| 3.1 材料与方法 |
| 3.1.1 试验地点 |
| 3.1.2 主要培养基 |
| 3.1.3 主要试剂 |
| 3.1.4 主要仪器 |
| 3.1.5 方法 |
| 3.2 结果 |
| 3.2.1 消毒室（气雾室、鞋底踩踏消毒池）消毒前后结果 |
| 3.2.2 饲料车车轮消毒前后菌落计数结果 |
| 3.2.3 空气消毒前后菌落计数结果 |
| 3.2.4 地磅消毒前后菌落计数结果 |
| 3.2.5 营业室消毒前后菌落计数结果 |
| 3.2.6 生猪展览室消毒前后菌落计数结果 |
| 3.2.7 大门消毒池更换消毒液前后的菌落计数结果 |
| 3.2.8 各区域菌落减少率结果 |
| 3.3 讨论 |
| 3.3.1 消毒效果 |
| 3.4 小结 |
| 第四章 第三代季铵盐消毒剂对猪源致病菌的杀菌效果研究 |
| 4.1 材料 |
| 4.1.1 试验菌 |
| 4.1.2 主要培养基 |
| 4.1.3 主要试剂 |
| 4.1.4 主要仪器 |
| 4.1.5 消毒剂 |
| 4.2 方法 |
| 4.2.1 菌落总数测定 |
| 4.2.2 菌悬液制备 |
| 4.2.3 中和剂配制 |
| 4.2.4 消毒剂浓度选择试验 |
| 4.2.5 中和剂选择试验 |
| 4.2.6 消毒剂定量杀菌试验 |
| 4.3 结果 |
| 4.3.1 菌落总数测定结果 |
| 4.3.2 消毒剂杀菌浓度选择结果 |
| 4.3.3 中和剂选择结果 |
| 4.3.4 消毒剂定量杀菌试验结果 |
| 4.4 讨论 |
| 4.4.1 菌落总数测定 |
| 4.4.2 消毒剂杀菌浓度选择试验 |
| 4.4.3 中和剂选择试验 |
| 4.4.4 消毒剂定量杀菌试验 |
| 4.5 小结 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
（10）上海地区猪链球菌病流行情况调查及风险控制分析与实践（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一篇 文献综述 |
| 第一章 猪链球菌病诊断及防控技术研究进展 |
| 1 概述 |
| 1.1 分类地位 |
| 1.2 病原 |
| 1.3 流行状况 |
| 2 临床诊断 |
| 2.1 流行病学特征 |
| 2.2 临床症状 |
| 2.3 病理变化 |
| 2.4 与其他疫病的鉴别诊断 |
| 3 病原学诊断 |
| 3.1 样品的采集 |
| 3.2 分离培养及生化鉴定 |
| 3.3 血清学鉴定 |
| 3.4 分子诊断技术 |
| 3.5 分子分型技术 |
| 3.5.1 MLST 分型 |
| 3.5.2 PFGE 分型 |
| 4 血清学诊断 |
| 4.1 猪链球菌 |
| 4.2 马链球菌兽疫亚种 |
| 5 防治措施 |
| 5.1 管理措施 |
| 5.2 免疫策略与疫苗免疫 |
| 5.3 药物防治 |
| 附图 |
| 参考文献 |
| 第二章 HACCP管理体系及其在畜禽养殖过程中的应用 |
| 1 HACCP简介 |
| 1.1 名词解释 |
| 1.2 HACCP的特点 |
| 1.3 HACCP原理 |
| 1.3.1 危害分析（原理 1) (Hazard Anaylsis- HA) |
| 1.3.2 确定关键控制点（原理2) (Critical Control Point- CCP) |
| 1.3.3 确定与各CCP相关的关键限值（原理3) (CL) |
| 1.3.4 确立CCP的监控程序（原理4) |
| 1.3.5 纠偏行动(原理5) |
| 1.3.6 验证程序(原理6) |
| 1.3.7 记录保存程序(原理7) |
| 2 畜禽养殖过程HACCP体系的应用 |
| 2.1 养殖过程中的安全危害 |
| 2.2 养殖过程安全危害的控制措施 |
| 2.3 养殖过程关键控制点和关键限值的监控 |
| 2.3.1 引种 |
| 2.3.2 词料采购、加工与储藏 |
| 2.3.3 药物疫苗采购与使用 |
| 2.3.4 饲养管理 |
| 3 结语 |
| 参考文献 |
| 第二篇 试验研究 |
| 第三章 上海地区猪链球菌病流行病学调查 |
| 摘要 |
| 1 材料和方法 |
| 1.1 调查方案 |
| 1.2 样品采集 |
| 1.3 病原分离和鉴定 |
| 1.4 药敏试验 |
| 2 结果 |
| 2.1 猪场猪链球菌病摸底调查 |
| 2.2 猪链球菌病临床病例发病情况 |
| 2.3 猪场健康猪群猪链球菌监测情况 |
| 2.4 细菌毒力因子谱基因型分布 |
| 2.4.1 猪链球菌临床分离株毒力因子谱分布 |
| 2.4.2 猪链球菌健康猪携带菌株毒力因子谱分布 |
| 2.5 耐药性分析 |
| 3 讨论 |
| 3.1 上海地区猪链球菌病临床表现形式 |
| 3.2 1998～2010年流行菌株分布情况 |
| 3.3 毒力因子分布特征 |
| 3.4 耐药性分析 |
| 参考文献 |
| ABSTRACT |
| 第四章 猪链球菌感染风险因子分析及控制要点 |
| 摘要 |
| 1 猪链球菌在环境及载体中存活能力 |
| 2 猪链球菌的传播途径 |
| 3 猪链球菌在猪体内分布 |
| 4 猪链球菌病的流行特点 |
| 5 猪链球菌病发病诱因 |
| 6 猪链球菌感染的风险因子分析 |
| 7 猪场猪链球菌感染的控制要点 |
| 8 讨论 |
| 参考文献 |
| ABSTRACT |
| 第五章 猪链球菌病综合防控体系的制定和应用效果 |
| 摘要 |
| 1 猪链球菌病综合防控措施的制定 |
| 1.1 制定思路和主要措施 |
| 1.2 体系文件的编制 |
| 2 示范猪场的选择 |
| 3 综合防控措施的实施 |
| 3.1 隐性带菌猪控制 |
| 3.2 二点四段猪群流动管理 |
| 3.3 疫苗免疫、药物防治 |
| 3.4 PRRS、PCV-2、PR等病毒性免疫抑制病的控制 |
| 3.5 其他主要措施 |
| 4 监测、验证情况 |
| 4.1 隐性带菌猪控制 |
| 4.2 精液疫病监测 |
| 4.3 猪群主要疫病监测 |
| 5 结果与讨论 |
| 6 防控效益 |
| 参考文献 |
| ABSTRACT |
| 全文总结 |
| 附件一 猪链球菌病调查问卷 |
| 附件二 规模猪场猪链球菌病综合防控技术规范 |
| 附件三 上海市中小规模家庭生态养猪场标准化技术操作规范及猪链球菌控制方案 |
| 附件四 规模猪场二点四段饲养管理技术规范 |
| 附件五 猪场消毒程序 |
| 附件六 规模猪场推荐免疫程序 |
| 致谢 |
| 攻读博士期间发表文章 |
四、6种消毒剂对集约化猪场大肠杆菌病的预防效果（论文参考文献）
- [1]复方癸甲氯铵消毒剂杀菌作用的影响因素及现场消毒试验研究[D]. 郭长梅. 新疆农业大学, 2021
- [2]大肠杆菌S9922生物学特性及特有基因的原核表达[D]. 钦倩. 石河子大学, 2020(01)
- [3]五种消毒剂对鸭场常见细菌的杀菌效果分析[D]. 吴伯梅. 贵州大学, 2020(02)
- [4]猪场消毒剂效果评价及细菌对消毒剂抗性研究[D]. 罗致茜. 贵州大学, 2020(03)
- [5]四种消毒剂对猪场常见病原微生物的杀灭效果研究[D]. 王爱玲. 西北农林科技大学, 2016(02)
- [6]市售15种猪场消毒剂消毒效果的比较[J]. 雷云峰,康润敏,曾凯,吕学斌,陈晓晖. 畜牧与兽医, 2015(04)
- [7]猪舍环境中细菌总数测定和消毒剂对致病菌的敏感性试验[J]. 伍清林,金兰梅,张玉红,马玉,刘红梅. 金陵科技学院学报, 2012(04)
- [8]猪舍环境中主要致病菌的分离鉴定和对消毒剂的敏感性试验[A]. 伍清林,金兰梅,张玉红,马玉,刘红梅. 生态环境与畜牧业可持续发展学术研讨会暨中国畜牧兽医学会2012年学术年会和第七届全国畜牧兽医青年科技工作者学术研讨会会议论文集——T01畜舍环境与调控技术专题, 2012
- [9]陕西省某猪场常见细菌病及消毒效果研究[D]. 唐维英. 西北农林科技大学, 2013(02)
- [10]上海地区猪链球菌病流行情况调查及风险控制分析与实践[D]. 王建. 南京农业大学, 2011(11)