类似西尼罗河脑炎的李斯特菌脑炎

一、酷似西尼罗河脑炎的单核细胞增多症李斯特菌脑炎（论文文献综述）

王晓囡^[1]（2018）在《多重聚合酶链式反应技术研究和应用》文中研究指明第一部分公共引物介导的多重PCR技术在13种转基因大豆品系检测中的应用目的:在本实验室针对12种转基因大豆品系建立的多重PCR基础上,引入2017年国家农业部允许进口的MON87705品系,用品系特异性检测的方法建立一种低成本、特异性高和灵敏度高的多重PCR体系,用来同时检测13种转基因大豆品系（MON87701、GTS40-3-2、MON89788、CV127、A2704、A5547、DP356043、DP305423、MON87705、MON87769、MON87708、DP305423×GTS40-3-2、MON87701×MON89788,其中复合性状转基因大豆品系为DP305423×GTS40-3-2、MON87701×MON89788）,提高多重PCR检测通量的同时,验证多重PCR体系的包容性。方法:检验已筛选的公共引物与新品系MON87705基因组的特异性,再以品系特异性的检测方法对MON87705品系设计特异性引物,在特异性引物5’端连接公共引物形成特异性嵌合引物（其他转基因大豆的特异性引物来自本实验室前期设计）,通过转基因大豆品系标准品,检测11种转基因大豆的特异性嵌合引物特异性和敏感性以及多重体系特异性和敏感性,建立最优的公共引物介导的多重PCR。对市场上可能含有转基因大豆成分的产品共73份,进行多重检测并与国家规定的方法进行比较。结果:在原来的10重PCR的基础上加入新品系MON87705,设计的特异性嵌合引物能够特异性扩增13种转基因大豆品系（包含2种复合性状）,MON87701、DP356043、DP305423、CV127、MON87769、A2704、GTS40-3-2、MON87705、MON87708、MON89788、A5547对应的条带大小分别是137bp、179bp、233bp、269bp、305bp、355bp、405bp、462bp、505bp、589bp、664bp。多重体系敏感性达到0.1%,超过欧盟标准0.9%。73份豆制品中共检出42份（57.5%）含有转基因成分,与国家农业部规定标准方法的检出数相同。结论:本课题构建了一种以公共引物为介导的多重PCR（UP-MPCR）检测体系,可同时检测目前为止我国允许进口的转基因大豆品系13种（包含2种复合性状转基因大豆品系）,具有高通量、高敏感性、高特异性的同时,具有一定的包容性。第二部分检测6种常见脑炎病毒多重PCR体系的建立和应用目的:建立单纯疱疹病毒1（HSVⅠ）,2型（HSVⅡ）、水痘带状疱疹病毒（VZV）、EB病毒（EBV）、肠道病毒71型（EV71）及巨细胞病毒（CMV）的多重聚合酶链式反应（mPCR）体系。方法:对HSVⅠ,HSVⅡ,VZV,EBV,EV71及CMV设计特异引物。建立mPCR检测方法,并进行敏感性验证。收集苏州大学附属第一医院收治的15例临床疑似病毒性脑炎（VE）患者脑脊液（CSF）标本,采用该mPCR体系进行核酸检测。结果:6对引物特异性扩增六种病毒,构建的mPCR体系敏感度超过103copies/μ;该mPCR体系对15例临床脑脊液标本进行检测,共6例阳性标本（6/15,40%）,其中HSVⅠ5例,CMV共1例。结论:初步建立了一种能够同时筛查6种常见脑炎病毒的mPCR方法。

蔡常洁,范欣,黄海辉,马玉燕,童荔,王婷,张雷^[2]（2018）在《中国实体器官移植供者来源感染防控专家共识（2018版）》文中进行了进一步梳理前言自启动器官捐献工作以来,我国器官捐献例数逐年增加,累积已超过一万例,已成为移植器官的主要来源[1]。器官捐献工作的快速推进在拯救大量器官功能衰竭患者生命的同时,也给移植界带来了一个重大挑战,即供者来源性感染（Donorderived Infection,DDI）[2]。DDI是指在器官捐献后,捐献者体内存在的病原体通过器官移植过程使受者罹患相同的感染。绝大部分捐献者入住过重症监护病房（ICU）,可能经历重大手术,持续气管插管或切开行机械通气,留置深静脉导

赵森,张松,宋宁,贾伟华,袁胜芳,郭宪立^[3]（2016）在《澳大利亚和新西兰成年人及儿童脑炎诊治指南解读》文中认为脑炎是由脑实质炎症引起的一种复杂的神经综合征。由于脑炎的病因多种多样、鉴别诊断复杂、病情进展迅速、常需加强支持治疗、且对多种原发病因缺乏特效治疗手段,使得脑炎的诊治成为挑战。2015年,澳大利亚感染病学会、澳大利亚急诊医学会、澳大利亚新西兰神经科医师联合会、澳大利亚公共卫生学会联合制定了澳大利亚和新西兰成年人及儿童脑炎诊治指南,这是迄今为止最新的关于脑炎诊治的区域性专家共识。该指南在欧美指南的基础上,综合了近年来脑炎研究的最新进展,在脑炎的流行病学、病因学、诊断、鉴别诊断、治疗及综合管理方面进行了系统的阐述。我们在此对该指南予以解读,以期为中国医师诊治脑炎提供参考。

黄祖瑚^[4]（2009）在《人兽共患病:感染病科医师的必修课》文中认为 根据世界卫生组织和联合国粮食及农业组织的定义,人兽共患病是指在人类和脊椎动物之间自然感染与传播的疾病,即人类和脊椎动物由共同病原体引起,在流行病学上又有关联的疾病。世界上已经证实的人兽共患感染性疾病有200多种,在我国已发现的也有100余种。20世纪70年代以来,全球范围的新出现传染病（emerginginfectious diseases,EID）和重新出现传染病(re-

张亚爽^[5]（2008）在《LAMP和PCR检测单核细胞增生性李斯特氏菌的研究》文中进行了进一步梳理单核细胞增生性李斯特氏菌（Listeria monocytogenes）简称单增李斯特,它是一种能够引起人畜共患的食源性致病菌,属李斯特菌属。它在自然界中分布广泛,如土壤、腐败的蔬菜及多种食品中。食用了被单增李斯特污染的食物后可以引起“李氏杆菌病”,使人和动物患脑膜炎、败血症、流产等,死亡率可达20%～30%。该菌主要侵袭孕妇、新生儿、老年人和免疫力低的人群。近年来由该菌引起的食物中毒事件越来越多,引起了人们的广泛关注。传统的检测单增李斯特的方法操作繁琐、检测时间较长,通常需要5～7d才能完成且灵敏度较低。不能满足食品中致病菌快速、灵敏的检测需要。因此需要建立快速、灵敏的单增李斯特的检验方法。目前,快速检测单增李斯特的方法报道最多的是应用PCR方法。环介导等温扩增技术（Loop-mediated isothermal amplification,简称LAMP）是2000年由日本的荣研株式会独自开发出来的一种新的核酸扩增方法。它是针对靶基因的6个区域设计4种特异的引物,利用一种链置换DNA聚合酶（Bst DNApolymerase）在恒温条件（65℃左右）下进行扩增。可以在1h之内,将靶DNA片段扩增109～1010倍。本研究以单增李斯特的李氏溶血素基因（hly）为靶基因,选择特异性引物进行PCR扩增,同时成功设计了LAMP引物进行LAMP反应,并与PCR进行比较。对PCR反应体系中镁离子浓度、退火温度和循环数等PCR影响要素进行优化,以确定适宜PCR反应体系和PCR扩增程序。PCR反应的总反应体系为50μL,其中含有5μL 10×PCR buffer,4μL dNTPs混合物,2μL 10μmol/L上游引物,2μL 10μmol/L下游引物,4μL氯化镁,0.5μL（5U/μL）Taq DNA聚合酶,32.5μL ddH2O;PCR扩增程序为:PCR反应采用冷启动,94℃预变性4min,再按94℃变性45s～60℃退火30s～72℃延伸45s进行35个循环,最后72℃再延伸5min。PCR反应产物在2%的琼脂糖凝胶中进行电泳,凝胶成像系统观察结果,产生预期大小的片段（702bp）。基于单增李斯特的hly基因利用官方设计软件设计出LAMP反应的外引物F3、B3和内引物FIP、BIP。并对反应时间、反应温度、镁离子浓度、内外引物浓度比等扩增条件进行优化。LAMP反应的总反应体系为25μL,其中含有0.8μmol/L的FIP和BIP,0.2μmol/L的F3和B3,400μmol/L的每种dNTP,1mol/L的甜菜碱,20mM Tris-HCl（pH8.8）,10mM KCI,10mM（NH4）2SO4,4mM MgSO4,0.1%Triton-100和一定量的模版DNA。将反应混合物在95℃加热5min后放置冰上冷却,然后加入8U的Bst DNA聚合酶大片段,在63℃孵育60min,然后在80℃加热10min终止反应。LAMP反应产物在2%的琼脂糖凝胶中进行电泳,凝胶成像系统观察结果,产生预期的梯形条带。对12株菌分别进行了PCR反应和LAMP反应来验证引物的特异性,结果表明:单增李斯特均为阳性结果,其它菌株均为阴性结果。采用FTA滤膜制备模板进行PCR和LAMP反应,其方法的灵敏度分别为1.4×102CFU/mL和7.3×10CFU/mL。利用PCR技术和LAMP技术直接检测人工污染的鸡肉中的单增李斯特,检出限分别为9.6×102CFU/g和8.9×10CFU/g。通过两种方法的比较,可知LAMP比PCR更快速、灵敏。有着更为广泛的发展前景。通过本课题的研究,为单增李斯特氏菌的快速检验构建了一个新的技术平台。

余文海^[6]（2004）在《酷似西尼罗河脑炎的单核细胞增多症李斯特菌脑炎》文中指出

二、酷似西尼罗河脑炎的单核细胞增多症李斯特菌脑炎（论文开题报告）

（1）论文研究背景及目的

此处内容要求：

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例：

本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。

（2）本文研究方法

调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

三、酷似西尼罗河脑炎的单核细胞增多症李斯特菌脑炎（论文提纲范文）

（1）多重聚合酶链式反应技术研究和应用（论文提纲范文）

（3）澳大利亚和新西兰成年人及儿童脑炎诊治指南解读（论文提纲范文）

（5）LAMP和PCR检测单核细胞增生性李斯特氏菌的研究（论文提纲范文）

四、酷似西尼罗河脑炎的单核细胞增多症李斯特菌脑炎（论文参考文献）

• [1]多重聚合酶链式反应技术研究和应用[D]. 王晓囡. 苏州大学, 2018(01)
• [2]中国实体器官移植供者来源感染防控专家共识（2018版）[J]. 蔡常洁,范欣,黄海辉,马玉燕,童荔,王婷,张雷. 中华器官移植杂志, 2018(01)
• [3]澳大利亚和新西兰成年人及儿童脑炎诊治指南解读[J]. 赵森,张松,宋宁,贾伟华,袁胜芳,郭宪立. 临床荟萃, 2016(12)
• [4]人兽共患病:感染病科医师的必修课[J]. 黄祖瑚. 中华传染病杂志, 2009(07)
• [5]LAMP和PCR检测单核细胞增生性李斯特氏菌的研究[D]. 张亚爽. 河北农业大学, 2008(08)
• [6]酷似西尼罗河脑炎的单核细胞增多症李斯特菌脑炎[J]. 余文海. 国外医学.病毒学分册, 2004(06)

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