一、温度对小鼠睾丸生精机能的影响（论文文献综述）
赵元淑,陈文彬,邹立斌,吕道均,张守波[1]（2021）在《磷酸甘油酸变位酶1在单次热应激小鼠睾丸中的表达变化》文中进行了进一步梳理目的:探讨磷酸甘油酸变位酶1（PGAM1）在单次热应激致小鼠睾丸中的表达变化。方法:C57雄性小鼠32只,随机分为对照组（n=16）和热应激组（n=16）。热应激组和对照组小鼠下腹部分别置于43℃和25℃水浴中干预15 min,于处理后1、7 d取睾丸组织。HE检测睾丸组织细胞形态改变,免疫组化染色检测PGAM1蛋白定位及表达,Western印迹检测PGAM1蛋白表达水平。结果:HE结果显示,在热应激后小鼠睾丸体积显着减小,生精小管结构紊乱,细胞数量减少,第7天后细胞基本消失。免疫组化显示,PGAM1蛋白在睾丸生精小管广泛表达,热应激1天后睾丸组织中PGAM1的表达显着高于对照组,第7天睾丸组织中PGAM1表达较第1天下调,但仍显着高于对照组。Western印迹检测显示,与对照组相比,热应激后PGAM1蛋白表达明显增加。结论:小鼠睾丸热应激处理后PGAM1蛋白表达量在睾丸中出现动态变化,这种变化与热应激后睾丸生精细胞的增殖分裂相关。
张飞[2]（2021）在《长白公猪性成熟前后睾丸组织环状RNA、信使RNA N6-腺苷甲基化修饰的发掘鉴定及差异表达分析》文中进行了进一步梳理睾丸发育、精子生成过程涉及生殖细胞、间质细胞和支持细胞在内的多种细胞协同作用,该过程受到极其复杂和严格的分子时空调控,人们对其理解仍十分有限。环状RNA作为一类新的长链非编码RNA存在于人和牛等动物的睾丸及精清中,可能参与调控睾丸发育及精子发生过程。然而,公猪睾丸组织发育成熟过程中环状RNA的表达谱及其潜在生物学功能尚不清楚。N6-甲基腺苷（m6A）修饰是存在于RNA内部最常见的一类修饰,参与调控细胞分化、个体发育等多种生理病理进程,但关于m6A与睾丸发育、精子发生之间的关系目前仍知之甚少。因此,本文选取性成熟前后两个不同发育阶段的长白公猪睾丸组织,利用高通量测序技术和生物信息学等手段,揭示不同阶段睾丸中的环状RNA和m6A表达特征并比较分析其表达差异,预测和解析差异表达的环状RNA、m6A修饰在睾丸发育和精子发生事件中的潜在生物学功能,为增进了解环状RNA、m6A修饰参与公猪精子发生、睾丸发育调控等提供新的线索。本论文得到研究结果如下:本研究对未成年（30日龄,D30）和性成熟（210日龄,D210）长白公猪睾丸进行组织形态学观察。H&E染色结果显示,30日龄长白公猪睾丸曲细精管尚未发育完整,睾丸内未见明显管腔,处于性成熟前阶段;210日龄长白公猪睾丸体积显着增大,曲细精管发育完全,内含大量不同类型的生殖细胞并产生大量圆形精子及长形精子,已达到性成熟后阶段。使用去除核糖体RNA及线性RNA的总RNA-Seq来检测D30和D210长白公猪睾丸组织中环状RNA的表达谱。高通量测序显示睾丸组织中含有丰富的环状RNA,性成熟前后睾丸中分别鉴定出34521与31803个环状RNA。生物信息学分析发现这些环状RNA广泛分布于常染色体和性染色体上,长度主要位于100～10000 nt之间（58.97%）,主要来源于源头基因的外显子区域,大部分环状RNA由1-7个外显子形成（86.54%）,并且部分源头基因可以产生多个环状RNA。在公猪睾丸成熟过程中共发现来源于1526个源头基因的2326个差异表达的环状RNA,其中1003个D210公猪睾丸组织中上调,1323个下调。此外,差异表达的环状RNA源头基因GO功能分析显示这些环状RNA主要与精子发生、激素生物合成过程的正调控、生殖细胞发育、雄性减数分裂等生物过程有关。KEGG通路富集分析发现他们分别参与了干细胞多能性调节、紧密连接、粘附连接、cAMP等信号通路。因此,以上结果表明性成熟前后公猪睾丸表达大量的环状RNA,这些环状RNA呈现发育阶段特异性的动态表达模式,且主要与睾丸发育、精子发生等生物学过程密切相关。这些结果将有望为鉴定种公猪睾丸发育状态及筛选优秀种公猪提供一种潜在的分子标记物。同时为了研究睾丸发育成熟过程中m6A甲基化修饰的动态变化,本研究绘制了长白猪性成熟前后睾丸转录组范围信使RNA m6A甲基化图谱。本研究描述了m6A甲基化修饰在睾丸发育过程中的广泛分布模式,并分析了基因表达与m6A甲基化修饰的关系,同时广泛地鉴定了性成熟前后m6A甲基化修饰差异基因,这些基因可能与睾丸的生物学功能的密切相关。这些结果为确定睾丸中mRNA m6A甲基化的存在及其图谱提供了依据,并扩展了对m6A在哺乳动物器官发育和生长中作用的认识。
陶钰荣[3]（2021）在《PCB118暴露对ICR小鼠精子发生的影响及其机制的初步探究》文中进行了进一步梳理多氯联苯（Ploychlorinated biphenyls,PCBs）是一类有209种同系物的环境雌激素,可划分为二恶英类和非二恶英类多氯联苯。其中PCB118（2,3,4,4,5‐pentachlorobiphenyl）属于二恶英类多氯联苯,毒性较强,会对哺乳动物的神经系统、生殖系统产生损伤。青春期和孕期是哺乳动物生长发育的关键期,PCB118可以在母亲的胎盘以及乳汁中积聚,通过胎盘和母乳将毒性传递给子代,进而对子代的生殖系统产生不可逆转的损伤;PCB118也可以在青春期（生殖器官发育的关键期）对动物的生殖器官直接产生影响。目前关于PCB118对雄性生殖系统造成影响的研究较少。本论文通过对青春期和妊娠期ICR小鼠进行PCB118暴露,探究这两个敏感时期PCB118对睾丸的影响及其对精子发生的损伤机制。第一部分:在孕鼠妊娠8.5-13.5天分别对亲代小鼠进行0、20、100μg/kg/day的PCB118灌胃处理。在F1代小鼠生长到7-8周龄时,取其睾丸和附睾中精子,运用实时荧光定量PCR、免疫组化、蛋白凝胶电泳等分子生物学技术,探究亲代暴露于PCB118对子代雄性小鼠产生的影响。结果如下（与对照组相比）:（1）PCB118未对F1代小鼠的出生体重以及性别比例产生影响（P>0.05）,但造成F1代小鼠睾丸的脏器系数显着降低（P<0.05）。（2）PCB118对F1代小鼠的生精小管直径以及生精上皮厚度产生了显着影响（P<0.05）。主要表现在生精上皮厚度增加,生精小管直径增加。（3）PCB118造成F1代小鼠的精子畸形率显着升高,且精子活力明显降低（P<0.05）。（4）精原细胞的标记基因Pcna、Stra8、Plzf的表达量随着染毒剂量的升高,呈现剂量依赖性下降（P<0.05）。第二部分:对3-7周的小鼠进行0、50、500μg/kg/day PCB118的灌胃处理。取7周小鼠的睾丸和附睾中的精子,运用实时荧光定量PCR、免疫组化、蛋白凝胶电泳等分子生物学手段,探究小鼠青春期暴露于PCB118后,性成熟期睾丸以及精原细胞所受到的影响。结果如下（与对照组相比）:（1）PCB118未对小鼠的体重增长产生影响（P>0.05）。但剂量组中小鼠的肝脏湿重和睾丸湿重明显降低（P<0.05）。（2）PCB118会导致青春期小鼠睾丸中生精小管直径显着减小（P<0.05）,睾丸的生精小管的组织学切片中出现空泡化现象。（3）剂量组小鼠的精子畸形率显着升高,精子活力明显降低（P<0.05）。（4）精原细胞的标记基因Pcna、Stra8、Plzf的表达量随着染毒剂量的升高,表达量显着降低（P<0.05）。以上结果表明,小鼠在两个敏感的时期暴露于PCB118的环境下,会导致小鼠睾丸内部结构产生损伤,精子质量受损,精子畸形率升高,与精子发生相关基因的表达量发生改变。
乔祚[4]（2021）在《补肾解毒方对电离辐射损伤孕鼠胎盘组织活性及妊娠结局的防治作用研究》文中研究表明目的观察中、低剂量电离辐射对雌鼠孕产水平、妊娠结局及胎盘活性的影响,探究补肾解毒方对中、低剂量电离辐射致雌鼠生殖机能及妊娠结局损伤的防护作用,通过研究孕鼠胎盘活性的变化,对补肾解毒方防治生殖机能辐射损伤的相关作用和靶点做进一步探讨。方法将购入的180只实验小鼠（雄鼠60只,雌鼠120只）,按照性别分隔并展开为期3d的适应性喂养,并将处于动情期阶段的雄性小鼠和雌性小鼠在第4d早上8:00时,按照1:2比例进行合笼饲养。至第5d早上8:00,观察雌性小鼠是否形成阴栓,如观察到阴栓已形成则视为受孕成功,并将当日记为妊娠第1d。随机抽取105只受孕成功的雌鼠,其后随机分组为:空白对照组,1Gy辐射组、1Gy中药组,2Gy辐射组、2Gy中药组,4Gy辐射组、4Gy中药组,共7组,每组15只。从妊娠第1d开始,每天早上8:00对各组孕鼠进行灌胃,3个中药组灌服补肾解毒方汤剂（浓度13.5g/kg）,0.2ml/只;空白对照组和3个辐射组则灌服生理盐水,0.2ml/只,此实验步骤连续进行10d。妊娠第11d早上暂停灌胃,对孕鼠分别称重后,除去空白对照组,其余6组要按实验要求分别接受与辐射源等距离的1Gy、2Gy、4Gy60Coγ-射线进行全身性辐照。妊娠第12d恢复灌胃操作,至妊娠第20d停止。妊娠第20d不再进行灌胃,对各组孕鼠一般体征进行记录后,用10%水合氯醛对各组孕鼠以腹腔注射的方式实施麻醉,其后进行解剖,取出仔鼠及胎盘,记录孕鼠妊娠结局,计算胎盘系数,对孕鼠胎盘组织抗氧化酶水平进行检测及比较,对孕鼠胎盘病理形态学改变进行观察。结果胎盘系数比较:相较于空白对照组,1Gy辐射组及1Gy中药组的系数都有所下降（P<0.05）,1Gy中药组胎盘系数比1Gy辐射组更高（P<0.05）;2Gy辐射组及2Gy中药组的系数均小于空白对照组（P<0.05）,2Gy中药组大于2Gy辐射组（P<0.05）;而相较于空白对照组,4Gy辐射组及4Gy中药组胎盘系数下降明显（P<0.05）,但4Gy中药组仍大于4Gy辐射组（P<0.05）。胎盘组织活性比较:相较于空白对照组,1Gy辐射组、1Gy中药组胎盘组织中SOD、GSH-Px水平均有所降低（P<0.05）,MDA含量相较于空白对照组均出现上涨的情况（P<0.01）;1Gy中药组中SOD及GSH-Px与1Gy辐射组相比含量更高（P<0.05）,而MDA含量则低于1Gy辐射组（P<0.05）。2Gy辐射组、2Gy中药组胎盘组织中的SOD水平与空白对照组相比偏低（P值分别为P<0.01,P<0.05）,且GSH-Px水平也均低于空白对照组（P<0.05）,MDA则高过空白对照组的含量（P<0.05）;2Gy中药组中的SOD、GSH-Px水平均高于2Gy辐射组（P值分别为P<0.01,P<0.05）,MDA水平则低于2Gy辐射组（P<0.05）。4Gy辐射组、4Gy中药组SOD水平与空白对照组相比下降明显（P值分别为P<0.01,P<0.05）,而两组的GSH-Px水平也均低于空白对照组（P值分别为P<0.05,P<0.01）,两组MDA水平则均高于对照组（P<0.05）,4Gy中药组的SOD、GSH-Px活性比4Gy辐射组更强（P值分别为P<0.05,P<0.01）,而MDA水平均低于4Gy辐射组（P<0.05）。胎盘组织病理形态学观察:空白对照组胎盘绒毛丰富,组织结构和细胞结构未见异常。3个辐射组的胎盘组织存在着不同程度的受损现象,1Gy辐射组变化较小,间质水肿,绒毛血管扩张受阻,滋养层细胞排列规则度下降;2Gy、4Gy辐射组的损伤呈加重趋势,胎盘绒毛数量减少、结构紊乱,滋养层细胞数量下降,细胞形态结构改变,出现细胞器消失、空泡化,甚至变性、坏死等情况,胎盘组织破坏程度随辐射剂量的加大而增加。3个中药组胎盘组织结构破坏程度均低于辐射组,细胞变性、坏死程度与同剂量辐射组相比减轻。结论中、低剂量电离辐射会造成孕鼠状态异常、体重减轻,同时会降低胎盘系数和胎盘组织抗氧化活性,使胎盘组织病理形态发生改变,影响孕鼠妊娠结局。补肾解毒方可一定程度上减轻电离辐射对孕鼠机体造成的损伤,提升辐射后孕鼠体重及机体状态的恢复水平,减轻胎盘组织病理形态方面损伤,修复胎盘组织抗氧化能力,提高胎盘系数和组织活性,从而对孕鼠孕产起到良性干预,改善其妊娠结局。补肾解毒方对于电离辐射损伤孕鼠胎盘组织活性和妊娠结局具有较好的防治效果,对于生殖相关辐射防护而言具有持续研究的价值。
姚贝贝[5]（2020）在《ASX对OTA中毒小鼠雄性生殖机能保护作用的研究》文中指出赭曲霉毒素A（OTA）是大自然中最为常见的一类真菌毒素。有研究表明,OTA会影响动物睾丸组织发育和精子发生。另外,OTA作为一种内分泌干扰物,影响类固醇激素的合成,进而影响雄性生殖系统的性能。虾青素（ASX）作为一种有效的抗氧化剂,在机体康健和营养物吸收中具备相当大的潜力和应用,ASX具有的生物活性已经在男性不育的临床研究里得到验证。然而,ASX对OTA染毒的雄性小鼠生殖系统损害的保护作用到目前尚不清楚。本试验利用ASX处理OTA感染的雄性小鼠,将80只雄性C57小鼠分为空白对照组、OTA组、ASX组、OTA+ASX组,通过灌胃的方法喂药,试验周期28天。通过检测小鼠睾丸指数、结构、精液品质、血清睾酮含量、抗氧化指标、m TOR信号通路和血睾屏障的相关基因表达水平。探讨ASX对OTA致小鼠生殖损伤解毒效果的研究。结果如下:（1）ASX对OTA小鼠睾丸组织毒性的影响（1）与对照组比较,单独OTA灌胃,睾丸脏器指数显着降低。与OTA组比较,灌胃OTA+ASX,睾丸脏器指数显着升高,说明了添加ASX能够缓解OTA对睾丸组织发育的损伤作用。（2）睾丸HE染色观察:对照组小鼠睾丸组织的生精小管内的构造相对完整,以及各级生精细胞表现为分列紧凑有序。OTA组小鼠睾丸组织生精细胞分层紊乱,呈不规则外形或脱落,生精小管直径变小。ASX组显示出生精细胞排列比较整齐,紧密,脱落数量减少。OTA+ASX组小鼠睾丸组织的生精细胞空泡化减弱和精原细胞数量增加。睾丸超微结构观察:对照组各个生精细胞和支持细胞的内部构造清晰完整,核膜,核仁外观清晰。线粒体存在于细胞质中,形态正常,显现卵形或短棒状。OTA组鼠睾丸组织的生精细胞中有自噬体的出现,线粒体在形状上发生了变动,有的线粒体呈现不规则形状,线粒体呈现了局部空泡化的现象。ASX组小鼠睾丸组织各个生精细胞细胞内的结构清晰完整,形态正常,核膜完好,线粒体没有肿胀空泡的现象,内质网状态无明显的差别。OTA+ASX组小鼠睾丸组织细胞中的内质网出现轻微的肿胀现象。说明ASX能够缓解OTA对睾丸组织结构的损伤。（3）与对照组比较,单独OTA灌胃,血清中睾酮的分泌水平降低。与OTA组比较,灌胃OTA+ASX,明显增高血液睾酮水平。说明ASX对OTA引起的睾丸组织的损伤具有一定的修复作用。（4）与对照组比较,单独OTA灌胃,精子畸形率增高,精子活动参数降低。与OTA组比较,灌胃OTA+ASX,降低精子畸形率,增高精子活动参数。说明ASX能够减少OTA对精子的毒性作用。（2）ASX对OTA小鼠抗氧化损伤的影响与对照组比较,单独OTA灌胃,使睾丸组织MDA的含量增加,CAT、SOD和GSH活力减弱。与OTA组比较,灌胃OTA+ASX,使睾丸组织中MDA的含量减少,CAT、SOD和GSH的活力增强。说明ASX可以减缓OTA对睾丸组织的氧化损害。（3）ASX对OTA小鼠睾丸组织m TOR信号通路和血睾屏障的影响与对照组比较,单独OTA灌胃,提高Beclin、ULK、ATG5、LC3、NDP52的m RNA表达水平,以及降低m TOR、cldn11、Vim、Occludin、N-cad和ZO-1的m RNA表达水平。与OTA组相比,灌胃OTA+ASX,降低Beclin、ULK、ATG5、LC3、NDP52的m RNA表达水平,以及升高m TOR、cldn11、Vim、Occludin、N-cad和ZO-1的m RNA表达水平。说明ASX对能够抑制OTA引起的睾丸组织m TOR信号通路和血睾屏障的激活。结论:ASX可以抑制OTA对雄性小鼠睾丸组织损伤、精子毒性、氧化损伤以及m TOR信号通路和血睾屏障的激活。
姚紫兰[6]（2020）在《矢车菊素-3-O-葡萄糖苷对3-氯-1,2-丙二醇暴露下小鼠生殖损伤的保护作用》文中研究说明目的:3-氯-1,2-丙二醇（3-monochloropropane-1,2-diol,3-MCPD）作为常见的食品污染物,能靶向作用于睾丸和附睾引起精子质量下降,是造成雄性生殖损伤的原因之一。3-MCPD对雄性生殖系统的靶向作用引起了人们的广泛关注。矢车菊素-3-O-葡萄糖苷（Cyanidin-3-Oglucoside,C3G）作为日常广泛摄入的抗氧化花色苷类物质,具有良好的生物活性功能,是拮抗3-MCPD造成的生殖损伤的潜在营养因子。本课题主要通过建立3-MCPD暴露的雄性生殖损伤模型,同时进行C3G干预,在体内探讨C3G对3-MCPD致雄性生殖损伤的保护作用及其机制。方法:采用6周龄ICR雄鼠每天灌胃10 mg/kg·bw 3-MCPD溶液建立生殖损伤模型,同时设置三组营养干预组,分别给予25 mg/kg·bw、50 mg/kg·bw和100 mg/kg·bw C3G进行灌胃干预,实验持续12周。干预结束,分离血清、睾丸、附睾、精子,测定相关指标。（1）通过苏木素-伊红染色进行睾丸和附睾组织学评价及进行睾丸生精上皮评分,表征C3G干预对3-MCPD致睾丸组织损伤的保护作用。（2）采用计算机辅助精液分析系统测定精子的数量、畸形率、活率、活力及运动相关参数,证明C3G干预对3-MCPD致精子质量下降的保护作用。（3）通过酶联免疫吸附实验（Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA）检测血清中相关性激素激素的含量,探讨C3G对3-MCPD致性激素分泌紊乱的调控作用。（4）利用RNA-sequence高通量测序,收集、比对与分析在3-MCPD暴露下的转录样本数据和C3G干预后的样本数据,筛选差异表达基因。通过与公共数据库GO、KEGG的对比,进行unigene功能注释,对关键表达过程进行筛选,分析差异化表达基因和通路。（5）采用实时荧光定量PCR（Real-time quantitative PCR,q PCR）分析相关差异基因的表达,验证C3G对3-MCPD引起的基因表达的调节作用。结果:（1）与3-MCPD造模组相比,摄入100 mg/kg·bw C3G干预改善睾丸的病理学损伤,有效地提高了睾丸生精上皮评分。（2）与3-MCPD造模组相比,进行C3G干预使精子数量上升,提高了精子活力及活率,改善了精子运动能力,降低了精子畸形率,有效地提高了精子质量。（3）3-MCPD暴露会干扰性激素分泌使得卵泡刺激素（Follicle-stimulating hormone,FSH）和睾酮（Testosterone,T）明显下降,促黄体素（Luteinizing hormone,LH）和抑制素（InhibinB,INH-B）升高,而C3G维持激素水平正常,使得精子发生正常进行。（4）3-MCPD造成睾丸中69个基因明显下调,21个基因明显上调,C3G拮抗3-MCPD上调38个基因,下调22个的基因的表达。通过基因功能分析及通路分析,发现C3G能有效调节细胞周期、免疫调节相关的通路,改善炎症作用,并与线粒体的损伤,精子蛋白酶复合体、内质网等有明显的关联。（5）3-MCPD下调Fbxw15的表达,影响HBO1表达。C3G可以拮抗3-MCPD引起的Fbxw15表达紊乱,降低HBO1的表达,调节AR表达,为T进入管腔内提供通道,与稳定精子发生所需的雄激素环境,调控睾丸内性激素调控精子生成过程正常,从而改善精子质量与睾丸损伤。结论:3-MCPD引起性激素紊乱、小鼠睾丸损伤和精子质量下降,而C3G可以维持正常性激素合成分泌,并且改善睾丸损伤和精子质量。C3G通过调节激素水平,提高T含量,增加FSH含量,从而维持生精过程中所必须的激素环境,为由激素水平紊乱导致的精子数量和质量下降提供保护作用;同时C3G通过对Fbxw15的干预作用,影响HBO1的含量,从而调节AR正常激活,为T进入管腔内提供通道,与稳定精子发生所需的雄激素环境,为精子发生及分化提供良好的环境,保障精子质量。本研究可以为3-MCPD暴露人群做出多摄入花色苷类食物的合理膳食指导提供实验依据,从而减轻男性精子质量下降程度。
晏斌[7]（2020）在《灵归方对奥硝唑诱导的弱精子症模型大鼠附睾功能影响的实验研究》文中进行了进一步梳理背景:2010年世界卫生组织（World Health Organization,WHO）估计全世界大约有4850万对夫妇（8～12%）患有不孕不育,其患病率因国家和地区而异,男性因素所致生育问题的分布在20%～70%之间,精子数量少、形态异常、运动能力差是与男性因素相关的常见原因。随着世界范围内男性不育症的不断增多,它已成为一个越来越引起临床重视的健康问题。目前西医治疗男性不育症主要方式为药物治疗、手术及辅助生殖技术,但是存在疗效不确定、造成侵入性损害、价格高,或伴随不良反应和其他高风险的问题,使得男性不育症患者寻求其他治疗策略。随着中医药研究的发展,中医药成为男性不育症治疗中重要的方法之一,提供了安全、有效的治疗选择。灵归方为中国中医科学院西苑医院男科经验处方,由仙灵脾、当归、熟地黄、山药等13味药组成,具有补肾、活血的功效,前期临床研究发现灵归方有提高弱精子症患者精子活动率的作用,但其具体作用机制不明,故设计本研究以阐明灵归方改善精子活动率的可能机制。实验分为两部分,第一部分为探索使用奥硝唑（Ornidazole,ORN）制备弱精子症动物模型,观察不同剂量（200,400,800 mg/（kg·d））的ORN对于雄性SD大鼠精子浓度、活动率的影响;第二部分为保护性实验,设置对照组、模型组、灵归方组、左卡尼汀组,综合评价灵归方对弱精子症模型大鼠精液质量、附睾左旋肉碱（L-carnitine,LC）含量、附睾肉碱转运蛋白（Carnitine/organiccation transporter2,OCTN2）的蛋白及mRNA表达水平的影响,并检测灵归方干预后大鼠血清性激素水平,附睾SOD、GSH-Px活性以及MDA含量,光学显微镜观察睾丸、附睾组织病理学变化。第一部分:ORN诱导弱精子症模型大鼠的研究目的:观察不同剂量的ORN灌胃对雄性SD大鼠精液质量的影响,以制备弱精子症模型大鼠。方法:将40只雄性SD大鼠进行编号,使用电子秤称重并详细记录。按照随机数字表法将其分为对照组、模型1组、模型2组、模型3组各10只,具体给药方法为:模型 1 组:200mg/（kg·d）ORN;模型 2 组:400mg/（kg·d）ORN;模型 3组:800mg/（kg·d）ORN;对照组:1ml/100g0.5%CMC-Na（由于 ORN 水溶性差,故采用CMC-Na溶解后灌胃）。按照1ml/100g体重进行给药,连续灌胃20天,观察大鼠一般情况变化,在末次给药24小时后用5%水合氯酸溶液（0.7ml/100g）进行腹部注射麻醉,水合氯酸溶液使用剂量为按照0.4ml/100g体质量进行计算,大鼠麻醉后,称体重,取睾丸及附睾分别称重,计算睾丸、附睾脏器系数,并取大鼠左侧附睾尾进行精子浓度和活动率（PR+NP级精子百分率）分析。结果:1.在实验进行过程中,由于灌胃操作导致模型3组1只大鼠死亡。对照组一般状态良好,饮食正常,体毛浓密,且有光泽,大小便正常,活动量大,较活跃,存在笼内打斗现象;与对照组比较,模型1组上述各项征象无显着下降,饮食无明显减少,饮水量相当,体毛正常,光泽度稍差,活动量未见减少,存在笼内打斗现象,精神可;模型2组较对照组上述征象有下降,饮食量减少,体毛较稀疏,体毛光泽度不及模型1组,活动量以及打斗现象无明显减少,精神尚可;模型3组较对照组上述指标有显着下降,饮食量减少,体毛稀疏,体毛光泽度明显降低且不及模型2组,活动量少,打斗现象减少,精神差。2.与对照组比较,模型1组大鼠体重,睾丸、附睾重量,以及睾丸、附睾脏器系数变化差异均无统计学意义（P>0.05）;模型2组体重,睾丸、附睾重量以及睾丸、附睾脏器系数有下降趋势,但无统计学差异（P>0.05）;模型3组体重,睾丸、附睾重量以及睾丸、附睾脏器系数均下降,有统计学差异（P<0.05）。3.与对照组比较,模型1组与模型2组精子浓度改变无统计学差异（P>0.05）,模型3组精子浓度下降（P<0.01）;与对照组比较,模型1组（PR+NP）级精子浓度及精子活动率无统计学改变（P>0.05）,模型2组、模型3组（PR+NP）级精子浓度及精子活动率均下降（P<0.01）。结论:1.200 mg/（kg·d）ORN灌胃20天对于大鼠体重,睾丸、附睾重量及脏器系数,精子浓度、（PR+NP）级精子浓度及活动率均无影响。2.400 mg/（kg·d）ORN灌胃20天,对大鼠精子浓度无影响,但可导致（PR+NP）级精子浓度及精子活动率下降,可用于制备弱精子症模型大鼠。3.800 mg/（kg·d）ORN灌胃20天可导致大鼠精子浓度、（PR+NP）级精子浓度及活动率均明显下降,可用于制备少弱精子症模型大鼠。第二部分:灵归方对ORN诱导的弱精子症模型大鼠附睾功能影响的实验研究实验一:灵归方对ORN诱导的弱精子症模型大鼠附睾LC相关通路的影响目的:观察灵归方对ORN诱导弱精子症模型大鼠精液质量、附睾LC含量,附睾OCTN2蛋白及mRNA表达水平的影响,揭示ORN诱导弱精子症模型大鼠附睾能量代谢障碍以及灵归方改善弱精子症大鼠附睾功能的相关机制。方法:将40只雄性SD大鼠进行编号,使用普通电子秤称重并详细记录。按照随机数字表法将其分为对照组、模型组、左卡尼汀组、灵归方组,每组各10只,具体给药方法为:对照组:1ml/100g 0.5%CMC-Na;模型组:400mg/（kg·d）ORN;左卡尼汀组:LC 100mg/（kg·d）+400mg/（kg·d）ORN;灵归方组:灵归方浓缩液,按 17.5g 生药/kg+400mg/（kg·d）ORN,连续灌胃 20 天,ORN 均为上午 8:00-9:00灌胃,干预药物为下午5:30-6:30灌胃。末次给药24 h后,5%的水合氯醛腹腔麻醉,剪开阴囊,取出实验大鼠右侧附睾,用于进行精子浓度及活动率检测;左侧附睾在（pH 7.2～7.4）0.01mol/LPBS缓冲液配制的4%多聚甲醛固定液中进行固定,用于附睾LC含量、OCTN2蛋白与mRNA表达的检测。其中高效液相色谱法测定附睾中LC含量,免疫印迹法（Western Blotting,WB）检测大鼠附睾OCTN2蛋白表达,逆转录聚合酶链反应（Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction,RT-PCR）检测大鼠附睾OCTN2 mRNA表达。结果:1.与对照组比较,各组精子浓度改变无统计学差异（P>0.05）;模型组（PR+NP）级精子浓度及精子活动率下降（P<0.05）。与模型组比较,灵归方组与左卡尼汀组（PR+NP）级精子浓度及精子活动率升高,有统计学差异（P<0.05）;灵归方组与左卡尼汀组比较,（PR+NP）级精子浓度及精子活动率差异无统计学意义（P>0.05）。2.与对照组比较,模型组附睾LC含量下降（P<0.05）;与模型组比较,灵归方组与左卡尼汀组附睾LC含量升高（P<0.05）;且左卡尼汀组附睾LC含量高于灵归方组（P<0.05）。3.与对照组比较,模型组OCTN2蛋白表达下降（P<0.05）;与模型组比较,灵归方组、左卡尼汀组OCTN2蛋白表达升高（P<0.05）;灵归方组与左卡尼汀组比较,OCTN2蛋白表达差异无统计学意义（P>0.05）。4.与对照组比较,模型组OCTN2 mRNA表达下调（P<0.05）;与模型组比较,灵归方组、左卡尼汀组OCTN2 mRNA表达上调（P<0.05）;灵归方组与左卡尼汀组比较,OCTN2 mRNA表达差异无统计学意义（P>0.05）。结论:1.400mg/（kg·d）ORN连续灌胃20天可导致大鼠精子活动率下降,可能与抑制附睾OCTN2蛋白及mRNA表达,引起血浆向附睾LC转运减少,导致附睾LC含量下降有关。2.灵归方能够提高ORN诱导弱精子症模型大鼠（PR+NP）级精子浓度及精子活动率,可能与增加大鼠附睾LC含量有关。3.灵归方可以上调ORN所致弱精子症模型大鼠附睾中OCTN2蛋白及mRNA的表达,从而增加LC从血浆向附睾转运。实验二:灵归方对弱精子症模型大鼠血清性激素及附睾氧化应激反应的影响目的:观察灵归方对ORN所致弱精子症模型大鼠血清性激素水平,附睾SOD、GSH-Px、MDA的影响,进一步揭示ORN造成弱精子症模型大鼠的可能机制以及灵归方的保护作用。方法:分组及灌胃方式同实验一。股动脉取血,酶联免疫吸附试验法测定大鼠血清中FSH、LH、T含量,取右侧附睾组织制备成5%的组织匀浆,将匀浆3000rpm离心10min,取上清进行SOD、GSH-Px活性以及MDA含量的检测。左侧睾丸、附睾部分置于4%多聚甲醛固定,随后用于观察睾丸、附睾结构组织病理学变化。结果:1.与对照组比较,各组FSH、LH及T水平改变均无统计学差异（P>0.05）。2.与对照组比较,模型组附睾GSH-Px、SOD活性下降,MDA含量升高（P<0.05）;与模型组比较,左卡尼汀组及灵归方组GSH-Px、SOD活性升高,MDA含量下降,均有统计学差异（P<0.01）;灵归方组与左卡尼汀组相比GSH-Px、SOD活性以及MDA含量比较无统计学差异（P>0.05）。3.在显微镜下可见各组大鼠睾丸中各生精小管结构正常,管腔明显,整齐排列,大量精子及精子细胞充满生精小管管腔,形态正常;各级生精细胞结构完整,层次清晰,各级生精细胞分裂活跃,各细胞形态未见明显异常,各组之间的形态学差异并不明显;各组附睾组织形态学改变并不明显,管腔中可见大量的精子,模型组附睾管腔中可见少量脱落细胞成分。结论:1.400mg/（kg·d）ORN连续灌胃20天对雄性SD大鼠血清性激素水平,睾丸、附睾组织形态并无显着影响,但是会引起附睾GSH-Px、SOD活性下降,MDA含量升高,可能是导致大鼠精子活动率下降的原因之一。2.灵归方可以增加附睾SOD、GSH-Px活性,降低MDA含量,减少ORN所致弱精子症模型大鼠附睾氧化损伤,维持正常的精子成熟环境。
管斯琪[8]（2020）在《补肾生精法治疗少弱精子症及其调控生精细胞增殖与凋亡的研究》文中研究表明目的人类生育力逐年降低已经成为影响发展的医学和社会学问题,男性因素导致的不孕不育占了 40%-50%,其中少弱精子症是男性不育症最常见的病因之一。对于特发性精液异常,西药治疗效果欠佳,手术治疗的应用范围存在一定局限性,而中医药具有较好的疗效。菟枸助育汤是在五子衍宗丸的基础上加减化裁而来,临床用于治疗少弱精子症逾20年,但目前尚无相关的研究。故本研究设计临床试验,观察评价菟枸助育汤对男性不育少弱精子症患者的临床疗效,并设计动物实验探究菟枸助育汤的核心药对“菟丝子-枸杞子”对生精功能障碍模型大鼠生精功能的影响,并对其具体的作用机制进行探讨。方法临床研究:收集男性不育少弱精子症76例,采用无病例对照研究的方法,观察菟枸助育汤对少精子症和弱精子症受试者精液质量（包括精液液化状态、精液量、精子活动率、精子浓度和总数等指标）和中医证候评分的干预作用。入组时,采集所有受试者的一般信息、病史、合并用药、体格检查等相关资料。研究第1天起每日给予入组的受试者菟枸助育汤中药免煎颗粒治疗,疗程共90天,分别于第0、30、60、90天各进行一次访视,记录受试者的精液常规结果和中医证候评分,同时进行安全性观察,记录各类不良事件,填写病例报告表,每次访视时严格进行脱落、剔除的评估,最后统计所有数据。实验研究:1.将78只SD大鼠随机分为空白对照组（NC组）、模型对照组（GTW组）、左卡尼汀组（GTW+LEV组）、菟丝子-枸杞子药对组（GTW+SCFL组）和药对+抑制剂组（LY+SCFL组）。2.除NC组以外,其余各组用雷公藤多苷（40mg/kg）灌胃4周,建立生精功能障碍模型。3.第5周起GTW+LEV组（予10ml/kg左卡尼汀灌胃）、GTW+SCFL组（予菟丝子-枸杞子中药液灌胃）和LY+SCFL组（予菟丝子-枸杞子中药液灌胃）每日分别予以相应药物干预,LY+SCFL组于第1周起每周1次尾静脉注射PI3K抑制剂。4.实验8周后测定各组大鼠精子质量、附睾/睾丸脏器系数,检测性激素、抑制素B、附睾肉毒碱的水平,光镜下和透射电镜下观察睾丸的组织病理形态和细胞的超微结构,用免疫组化法、western blot以及Real-Time PCR技术检测大鼠睾丸组织SCF、c-kit、PI3K、p-Akt、Bad、Bcl-2 和 Bax 蛋白及 mRNA 的表达。结果临床研究:本研究共完成临床病例76例,纳入研究的男性不育少精子症和弱精子症患者经过菟枸助育汤治疗后,总体的精液质量中液化状态、PR精子百分比、PR+NP精子百分比、精子浓度和精子总数等疗效性指标显着改善,具有统计学意义（P<0.05或P<0.01）;中医证候评分随着治疗进行有了明显的下降（P<0.05或P<0.01）;疗效判定为“痊愈”的11例,“显效”29例,“有效”32例,“无效”4例,总有效率为94.74%。整个观察期间脱落病例4例,无剔除病例,未见任何不良反应报告。实验研究:经菟丝子-枸杞子干预后的GTW+SCFL组与GTW组相比,大鼠的一般状态、附睾脏器系数、精子质量、卵泡生成素（FSH）、黄体生成素（LH）、泌乳素（PRL）和附睾肉毒碱均有显着的改善,差异有统计学意义（P<0.05或P<0.01）;睾丸组织病理形态及细胞的超微结构观察发现,GTW+SCFL组与GTW组比较,生精小管结构、排列较正常,生精细胞明显增多,形态改善,内含的线粒体等细胞器增多;免疫组化、western blot和Real-Time PCR结果显示,与GTW组比较,GTW+SCFL组大鼠睾丸SCF、c-kit、PI3K、p-Akt和Bcl-2蛋白含量升高,Bax、Bad蛋白表达下降（P<0.05或P<0.01）;LY+SCFL组与GTW+SCFL组相比,SCF、c-kit和PI3K的表达无明显差异,p-Akt和Bcl-2表达减少,Bad和Bax的蛋白表达增加（p<0.05或P<0.01）。结论1.菟枸助育汤在改善男性不育少弱精子症患者的精液参数和肾虚证候中医评分方面疗效显着,能提高患者的生精功能。2.菟枸助育汤中的核心药对“菟丝子-枸杞子”可以改善生精功能障碍模型大鼠一般状态、附睾脏器系数、精子质量、FSH、LH、PRL和附睾肉毒碱,并对雷公藤多苷致睾丸组织和生精细胞的形态结构和功能的损伤具有较好的修复作用。3.“菟丝子-枸杞子”药对可以有效调控模型大鼠睾丸组织SCF、c-kit、PI3K、p-Akt、BAD、Bcl-2、Bax 蛋白及其 mRNA 的表达,通过调控 SCF/c-kit-PI3K-Bcl-2 信号通路促进生精细胞增殖和抑制生精细胞凋亡的作用。综上,菟枸助育汤可有效提高男性不育少弱精子症患者的生精功能,临床疗效显着,其作用机制可能是通过SCF/c-kit--PI3K--Bcl-2通路调控生精细胞增殖和凋亡来实现的。
申艳超[9]（2020）在《褪黑素对热应激种公牛精子质量的影响》文中研究表明高温作为一种热应激源对种公牛的精子质量有着严重影响,可造成其射精量减少,精子活力及活率下降等诸多负面影响。甚至导致夏季冻精生产被迫停产2-3个月,成为制约夏季冻精生产和肉牛产业发展的重要因素之一,是目前畜牧业生产中亟待解决的重要问题。褪黑素在雄性动物生殖过程中具有广泛作用参与诸如精子发生、精子运动等生理过程。但是,针对褪黑素保护热应激精子质量的研究和应用较少。因此,本试验首先分析了不同季节对不同品种种公牛的精液品质影响;以西门塔尔牛为例,依据精子活力及活率、质膜完整性、顶体完整性、线粒体膜完整性等多个精子质量指标,建立体外精子热应激模型,筛选褪黑素保护热应激精子质量的最佳浓度;初步探讨褪黑素保护热应激种公牛精子质量的受体类型。主要研究内容与结果如下:1、不同季节不同种公牛精液品质检测。在河南省鼎元种牛育种有限公司挑选4个品种的种公牛各3头,分别在春（3-5月）、夏(6-8月、秋（9-11月）、冬（12-2月）不同季节采集种公牛精液进行精液品质检测,并调查和统计质量变化。结果显示:在夏季（6-8月）时,不同种公牛的射精量有不同程度的减少,原精及冻后活率显着降低（p<0.05）,精子密度显着下降（p<0.05）,而精子畸形率均显着增加（p<0.05）。2、种公牛精子体外热应激模型的建立。探讨在不同温度（35℃、37℃、39℃、41℃、43℃）培养1h种公牛精子顶体完整率、质膜完整率、线粒体膜完整率等质量变化,采用低渗肿胀试验,通过倒置显微镜检测精子质膜完整性;采用FITC/PNA荧光染色法,通过荧光显微镜检测精子顶体完整性;采用PI/Rh123荧光染料联合双染,检测精子线粒体膜完整性。结果显示:37℃培养时种公牛精子质量各指标的表达水平最高;37℃之后随着温度的升高精子质量指标的各表达水平均显着下降（p<0.05）。3、探讨不同浓度褪黑素对热应激精子质量的影响。添加不同浓度褪黑素(0、10-3mol/L、10-44 mol/L、10-55 mol/L、10-66 mol/L、10-77 mol/L),在体外热应激培养1h,检测并分析褪黑素浓度对热应激精子质量的影响。结果显示:褪黑素浓度为10-33 mol/L时种公牛精子质量显着提高（p<0.05）。4、褪黑素保护热应激精子质量的受体类型。分别采用10-7 mol/L luzindole（褪黑素总抑制剂）和10-7 mol/L 4-P-PDOT（褪黑素受体2拮抗剂）,以检测各组别精子质量的变化。结果显示:luzindole组与Melatonin组相比,精子质量各指标的表达水平显着下降（P<0.05）;而4-P-PDOT组与Melatonin组相比,精子质量各指标的表达水平没有显着变化（P<0.05）。初步探明褪黑素保护热应激西门塔尔牛精子质量,主要是通过激活MT1发挥作用。
宋连杰[10]（2020）在《蒙古马睾丸精原干细胞体外分离培养与鉴定》文中进行了进一步梳理马业由古老的产业向现代马术和赛马产业发展,已经成为当今重要的经济支柱,我国是养马大国,以蒙古马居多。蒙古马具有抗寒、抗病、耐粗饲的特点,在马的遗传资源中是一个及其珍贵的基因库。但是蒙古马的育种繁殖方面研究相对薄弱,从而影响了马匹改良进程。精原干细胞是雄性动物体内唯一能够进行有丝分裂,并且能把遗传信息传递给下一代的干细胞,然而在众多睾丸细胞中精原干细胞数量较少,为其后续分离纯化带来难度。迄今为止,模型动物精原干细胞的纯化培养体系日渐成熟,然而对于马属动物的精原干细胞的体外分离培养却仍然处于初级阶段。因此,本研究通过建立蒙古马睾丸精原干细胞体外分离培养体系,有利于对精原干细胞的长期培养和生长条件的进一步探索,不仅可以揭示蒙古马睾丸精原干细胞的体外增殖特点,还可以进一步探究蒙古马睾丸发育和精子产生机制,对蒙古马的改良以及育种有着重要意义。本实验以2岁蒙古马为研究对象,取其睾丸通过机械分离法和酶逐步消化法获得睾丸单细胞悬液,经过差速贴壁法进行分离纯化精原干细胞,然后接种于事先复苏好的支持细胞饲养层上,并采用碱性磷酸酶（AKP）染色、免疫荧光染色、qRT-PCR进行特异性标志基因鉴定。研究结果如下:1.支持细胞饲养层的制备,采用机械分离法和胶原酶、胰酶逐步消化法联合使用提取睾丸单细胞悬液,使用明胶包被的培养皿进行差速贴壁以期纯化支持细胞,其生长活性旺盛。2.对纯化的支持细胞进行HE染色,发现其形状不规则或者呈辐射状,细胞核染色为蓝紫色,胞质染色为红色,细胞之间紧密相连,符合支持细胞生长特征。3.连续8天检测支持细胞生长活率,发现其生长曲线呈“S”型,根据生长曲线选择前三代生存活力旺盛的细胞进行丝裂霉素C灭活留作饲养层有较高的使用价值。4.采用qRT-PCR方法检测培养5 d的蒙古马睾丸支持细胞特异性表达基因并选用蒙古马成纤维细胞（EFF）为对照,根据计算结果,P值小于0.01,表明支持细胞特异性基因GATA4和GDNF在支持细胞与成纤维细胞中的差异极显着。证明本次关于蒙古马睾丸支持细胞的体外分离与培养实验成功。5.蒙古马睾丸精原干细胞的制备,将睾丸样品进行分离消化,采用明胶、大鼠尾胶原、层粘连蛋白不同基质包被的培养皿差速贴壁法进行纯化,分离纯度为82%。6.使用经过丝裂霉素C灭活的支持细胞作为饲养层相对使用层粘连蛋白作为饲养层,精原干细胞增殖较快,一周以内出现细胞克隆团,细胞活力稳定。7.将精原干细胞进行（AKP）染色,细胞被染成棕褐色,即AKP 阳性,细胞具有干性,属于蒙古马精原干细胞。qRT-PCR检测精原干细胞特异性标志基因TSPYL2、Gfra1、Pgp9.5、CD9、MHC-I,以蒙古马成纤维细胞作为对照,结果为差异极显着（P<0.01）,即所培养的为蒙古马精原干细胞,经过免疫荧光染色,检测到干细胞标记物Pgp9.5表达,再次确定所培养的细胞为蒙古马睾丸精原干细胞。
二、温度对小鼠睾丸生精机能的影响（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、温度对小鼠睾丸生精机能的影响（论文提纲范文）
（1）磷酸甘油酸变位酶1在单次热应激小鼠睾丸中的表达变化（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.1.1 实验动物 |
| 1.1.2 主要试剂 |
| 1.2 方法 |
| 1.2.1 睾丸热损伤模型建立及标本制备 |
| 1.2.2 HE检测睾丸石蜡切片 |
| 1.2.3 免疫组化染色 |
| 1.2.4 Western印迹检测PGAM1蛋白 |
| 1.3 统计学分析 |
| 2 结果 |
| 2.1 单次热刺激小鼠模型验证 |
| 2.2 PGAM1蛋白Western印迹检测 |
| 2.3 PGAM1免疫组化检测 |
| 3 讨论 |
（2）长白公猪性成熟前后睾丸组织环状RNA、信使RNA N6-腺苷甲基化修饰的发掘鉴定及差异表达分析（论文提纲范文）
| 本项研究受下列基金资助 |
| 致谢 |
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 缩写与符号清单 |
| 第一章 文献综述 |
| 1.1 猪睾丸发育过程及其表观遗传调控 |
| 1.1.1 公猪的性成熟 |
| 1.1.2 猪睾丸发育过程 |
| 1.1.3 间质细胞在睾丸发育与精子发生中的作用 |
| 1.1.4 睾丸发育与精子发生的表观遗传调控 |
| 1.2 环状RNA在睾丸发育与精子发生中的作用 |
| 1.2.1 环状RNA的生物起源、特性及功能 |
| 1.2.2 环状RNA的数据发掘、分析及研究方法 |
| 1.2.3 环状RNA在睾丸发育与精子发生中的作用 |
| 1.2.4 结论和展望 |
| 1.3 m6A修饰在睾丸发育与精子发生中的作用 |
| 1.3.1 m6A修饰概述 |
| 1.3.2 m6A修饰的检测 |
| 1.3.3 m6A修饰的生物学功能 |
| 1.3.4 哺乳动物精子发生过程中m6A修饰的动态调节 |
| 1.3.5 结论与展望 |
| 第二章 性成熟前后长白种公猪睾丸组织学观察与分析 |
| 引言 |
| 2.1 材料与方法 |
| 2.1.1 实验材料 |
| 2.1.2 实验方法 |
| 2.2 结果与分析 |
| 2.2.1 睾丸大小 |
| 2.2.2 性成熟前后长白种公猪睾丸组织学特征 |
| 2.2.3 睾丸组织显微观察结果 |
| 2.3 讨论 |
| 2.3.1 石蜡切片及H&E染色 |
| 2.3.2 性成熟前后长白种公猪睾丸发育情况 |
| 2.3.3 性成熟前后长白种公猪睾丸组织结构观察 |
| 2.4 小结 |
| 第三章 性成熟前后公猪睾丸文库构建及环状RNA的鉴定与基本特征 |
| 引言 |
| 3.1 材料与方法 |
| 3.1.1 实验材料 |
| 3.1.2 实验方法 |
| 3.2 结果与分析 |
| 3.2.1 睾丸组织样本RNA提取及质检结果 |
| 3.2.2 RNA文库构建及高通量测序数据质量分析 |
| 3.2.3 环状RNA的鉴定 |
| 3.2.4 性成熟前后长白种公猪睾丸组织中环状RNA的基本特征 |
| 3.3 讨论 |
| 3.4 小结 |
| 第四章 性成熟前后长白种公猪睾丸环状RNA的差异表达及生物信息学分析 |
| 引言 |
| 4.1 材料与方法 |
| 4.1.1 实验材料 |
| 4.1.2 实验方法 |
| 4.2 结果与分析 |
| 4.2.1 性成熟前后公猪睾丸组织中显着差异表达环状RNA的鉴定与分析 |
| 4.2.2 性成熟前后公猪睾丸组织环状RNA测序结果的试验验证 |
| 4.2.3 差异环状RNA的GO分析 |
| 4.2.4 差异环状RNA的 KEGG信号通路富集分析 |
| 4.2.5 环状RNA靶miRNA预测 |
| 4.3 讨论 |
| 4.4 小结 |
| 第五章 性成熟前后长白种公猪睾丸转录组信使RNA甲基化图谱的建立 |
| 引言 |
| 5.1 材料与方法 |
| 5.1.1 实验材料 |
| 5.1.2 实验方法 |
| 5.2 结果与分析 |
| 5.2.1 数据质控与序列统计 |
| 5.2.2 参考基因组比对 |
| 5.2.3 全基因组m6A Peak扫描分析 |
| 5.2.4 差异Peak分析 |
| 5.2.5 m6A Motif分析 |
| 5.2.6 RNA-seq基因/转录本差异结果分析 |
| 5.2.7 RNA-seq中差异基因GO富集分析 |
| 5.2.8 RNA-seq中差异基因KEGG富集分析 |
| 5.2.9 MeRIP-seq中差异m6A Peak GO富集分析 |
| 5.2.10 MeRIP-seq中差异m6A Peak KEGG富集分析 |
| 5.3 讨论 |
| 5.4 小结 |
| 第六章 结论与展望 |
| 6.1 结论 |
| 6.2 创新点 |
| 6.3 展望 |
| 参考文献 |
| 作者简介 |
（3）PCB118暴露对ICR小鼠精子发生的影响及其机制的初步探究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 缩略词表 |
| 第一章 多氯联苯的结构及其理化性质 |
| 1.1 多氯联苯的结构、理化性质及其来源 |
| 1.2 多氯联苯的污染问题 |
| 1.2.1 空气中的多氯联苯 |
| 1.2.2 土壤中的多氯联苯 |
| 1.2.3 水体中的多氯联苯 |
| 1.3 多氯联苯对动物的主要危害 |
| 1.3.1 对神经系统造成损伤 |
| 1.3.2 对生殖系统造成损伤 |
| 第二章 雄性生殖系统简介 |
| 2.1 睾丸的基本结构 |
| 2.2 附睾的基本结构 |
| 2.3 几种睾丸中的主要细胞 |
| 2.3.1 精原细胞 |
| 2.3.2 支持细胞 |
| 2.3.3 间质细胞 |
| 2.3.4 精子细胞 |
| 第三章 孕期暴露于PCB118对F1代小鼠睾丸的影响 |
| 3.1 前言 |
| 3.2 材料与方法 |
| 3.2.1 实验动物 |
| 3.2.2 主要实验试剂 |
| 3.2.3 主要实验仪器 |
| 3.2.4 PCB118的配制 |
| 3.2.5 动物模型的建立 |
| 3.2.6 主要实验试剂的配制 |
| 3.2.7 主要实验方法 |
| 3.2.8 数据分析 |
| 3.3 实验结果 |
| 3.3.1 孕期暴露于PCB118对子一代小鼠出生体重及性别比例的影响 |
| 3.3.2 孕期暴露于PCB118对F1代小鼠睾丸的影响 |
| 3.3.3 孕期暴露于PCB118对F1代小鼠精子形态的影响 |
| 3.3.4 RT-qPCR检测Pcna、Stra8、Sox-9、Hsd3b1、Plzf基因的表达 |
| 3.3.5 IHC检测PCNA蛋白的表达 |
| 3.3.6 Western Blot检测睾丸中PCNA以及STRA8 蛋白的表达 |
| 3.3.7 PCNA和DNMT1蛋白互作图 |
| 3.4 讨论 |
| 第四章 青春期暴露于PCB118对小鼠睾丸的影响 |
| 4.1 前言 |
| 4.2 材料与方法 |
| 4.2.1 实验动物 |
| 4.2.2 主要实验试剂 |
| 4.2.3 主要实验仪器 |
| 4.2.4 PCB118的配制 |
| 4.2.5 动物模型的建立 |
| 4.2.6 主要实验试剂的配制 |
| 4.2.7 主要实验方法 |
| 4.2.8 数据分析 |
| 4.3 实验结果 |
| 4.3.1 青春期暴露于PCB118对小鼠体重的影响 |
| 4.3.2 青春期暴露于PCB118对小鼠脏器的影响 |
| 4.3.3 青春期暴露于PCB118对小鼠睾丸组织结构的影响 |
| 4.3.4 青春期暴露于PCB118对小鼠精子形态的影响 |
| 4.3.5 RT-qPCR检测Pcna、Stra8、Sox-9、Hsd3b1、Plzf基因表达量的影响 |
| 4.3.6 IHC检测PCNA的表达 |
| 4.3.7 Western Blot检测睾丸中PCNA以及STRA8蛋白的表达 |
| 4.4 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
（4）补肾解毒方对电离辐射损伤孕鼠胎盘组织活性及妊娠结局的防治作用研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 英文缩略语表 |
| 前言 |
| 实验材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 本研究创新型的自我评价 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 一、文献综述 中医药防治辐射导致生殖系统受损的相关研究 |
| 参考文献 |
| 二、在学期间科研成绩 |
| 三、致谢 |
| 四、个人简介 |
（5）ASX对OTA中毒小鼠雄性生殖机能保护作用的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 1.1 OTA的概述 |
| 1.1.1 OTA种类和理化性质 |
| 1.1.2 OTA国内外污染现状及限量标准 |
| 1.1.3 OTA对生殖的危害 |
| 1.1.4 OTA预防和保护措施 |
| 1.2 ASX的简介 |
| 1.2.1 ASX的理化性质和结构 |
| 1.2.2 ASX的抗氧化性和安全性 |
| 1.2.3 ASX在雄性生殖中的作用 |
| 1.3 自噬以及mTOR通路的简介 |
| 1.4 血睾屏障的简介 |
| 1.5 与雄性生殖系统相关激素的简介 |
| 1.6 研究的目的和意义 |
| 第一章 ASX对 OTA中毒小鼠睾丸组织毒性的影响 |
| 1.1 材料和方法 |
| 1.1.1 动物和分组 |
| 1.1.2 化学药品和试剂 |
| 1.1.3 主要仪器 |
| 1.1.4 样品采集 |
| 1.1.5 小鼠睾丸脏器指数检测 |
| 1.1.6 小鼠睾丸组织结构形态学变化的影响 |
| 1.1.7 小鼠血清中睾酮含量的检测 |
| 1.1.8 小鼠精子活动参数的检测 |
| 1.1.9 小鼠精子畸形率检测 |
| 1.1.10 数据统计分析 |
| 1.2 试验结果 |
| 1.2.1 ASX对 OTA小鼠睾丸脏器指数的检测 |
| 1.2.2 ASX对 OTA小鼠睾丸组织形态学变化的影响 |
| 1.2.3 ASX对 OTA小鼠血清睾酮含量的检测 |
| 1.2.4 ASX对 OTA小鼠精子活动参数的检测 |
| 1.2.5 ASX对 OTA小鼠精子畸形率的检测 |
| 1.3 讨论 |
| 1.4 小结 |
| 第二章 ASX对 OTA中毒小鼠睾丸组织抗氧化的影响 |
| 2.1 材料和方法 |
| 2.1.1 试验动物和分组 |
| 2.1.2 化学药品和试剂 |
| 2.1.3 主要仪器 |
| 2.1.4 小鼠睾丸组织的取材和匀浆 |
| 2.1.5 小鼠睾丸组织BCA总蛋白定量测定 |
| 2.1.6 小鼠睾丸组织总超氧化物歧化酶活力测定 |
| 2.1.7 小鼠睾丸组织丙二醇含量测定 |
| 2.1.8 小鼠睾丸组织过氧化氢酶活力检测 |
| 2.1.9 小鼠睾丸组织谷胱甘肽过氧化物酶含量检测 |
| 2.1.10 统计学分析 |
| 2.2 试验结果 |
| 2.3 讨论 |
| 2.4 小结 |
| 第三章 ASX对 OTA小鼠睾丸m TOR信号通路和血睾屏障的影响 |
| 3.1 材料和方法 |
| 3.1.1 试验动物和分组 |
| 3.1.2 化学药品和试剂 |
| 3.1.3 主要仪器 |
| 3.1.4 样品RNA的提取 |
| 3.1.5 样品RNA的反转录 |
| 3.1.6 引物合成 |
| 3.1.7 qPCR和结果计算 |
| 3.1.8 统计学分析 |
| 3.2 试验结果 |
| 3.3 讨论 |
| 3.4 小结 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
（6）矢车菊素-3-O-葡萄糖苷对3-氯-1,2-丙二醇暴露下小鼠生殖损伤的保护作用（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 前言 |
| 1.1 3-MCPD概述 |
| 1.1.1 3-MCPD的来源和污染现状 |
| 1.1.2 3-MCPD的代谢 |
| 1.1.3 3-MCPD生殖毒性 |
| 1.2 花色苷概述 |
| 1.2.1 花色苷的分离提纯 |
| 1.2.2 花色苷的生物活性 |
| 1.2.3 花色苷对生殖的保护作用 |
| 1.3 论文背景思路 |
| 1.4 技术路线图 |
| 第二章 材料方法 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.1.1 实验相关试剂 |
| 2.1.2 实验仪器与设备 |
| 2.2 C3G的提取与制备 |
| 2.2.1 实验方法 |
| 2.3 动物实验及样品采集 |
| 2.3.1 实验动物 |
| 2.3.2 动物饲料及试剂 |
| 2.3.3 动物分组 |
| 2.3.4 动物样本采集 |
| 2.4 动物组织标本测定 |
| 2.4.1 PCR引物信息 |
| 2.4.2 实验试剂配制 |
| 2.4.3 附睾尾精子参数测定 |
| 2.4.4 组织固定及HE染色 |
| 2.4.5 睾丸生精上皮Johnsen’s 评分 |
| 2.4.6 RNA提取及RT-q PCR |
| 2.4.7 血清性激素ELISA测定 |
| 2.5 小睾丸组织RNA-Sequence测序 |
| 2.5.1 RNA提取 |
| 2.5.2 去DNA |
| 2.5.3 mRNA分离与片段化 |
| 2.5.4 双链cDNA合成 |
| 2.5.5 接头连接 |
| 2.5.6 连接产物纯化和片段大小分选 |
| 2.5.7 文库扩增 |
| 2.5.8 差异基因选择及GO、KEGG富集 |
| 2.6 数据处理及统计分析 |
| 第三章 结果与分析 |
| 3.1 C3G对小鼠生殖系统的保护作用 |
| 3.1.1 动物饲养期间行为表现 |
| 3.1.2 小鼠体重、摄食量变化 |
| 3.1.3 小鼠脏器系数变化 |
| 3.1.4 小鼠睾丸及附睾病理学检测 |
| 3.1.5 C3G改善3-MCPD致小鼠附睾精子参数 |
| 3.1.6 讨论 |
| 3.1.7 小结 |
| 3.2 C3G调节性激素表达含量 |
| 3.2.1 实验结果 |
| 3.2.2 结果讨论 |
| 3.2.3 小结 |
| 3.3 C3G和3-MCPD对睾丸m RNA转录组的影响 |
| 3.3.1 RNA质量分析 |
| 3.3.2 转录组测序产量统计分析 |
| 3.3.3 基因表达丰度统计 |
| 3.3.4 3-MCPD组与control组之间的差异 |
| 3.3.5 3-MCPD造模差异基因GO富集分析 |
| 3.3.6 3-MCPD造模差异基因KEGG富集分析 |
| 3.3.7 高剂量C3G组与3-MCPD组之间的差异 |
| 3.3.8 高剂量C3G干预差异基因GO富集分析 |
| 3.3.9 高剂量C3G干预差异基因KEGG富集分析 |
| 3.3.10 control组、3-MCPD造模组与高剂量C3G组差异基因分析 |
| 3.3.11 差异表达基因RT-q PCR验证 |
| 3.3.12 讨论 |
| 3.3.13 小结 |
| 第四章 结论与展望 |
| 4.1 全文总结 |
| 4.2 前景与展望 |
| 4.3 创新点 |
| 参考文献 |
| 英文缩略词汇总表 |
| 致谢 |
| 攻读硕士学位期间的科研情况 |
（7）灵归方对奥硝唑诱导的弱精子症模型大鼠附睾功能影响的实验研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 英文缩略语 |
| 综述一 中医诊治男性不育症研究进展 |
| 参考文献 |
| 综述二 西医诊治男性不育症研究进展 |
| 参考文献 |
| 实验研究 |
| 前言 |
| 第一部分 ORN诱导弱精子症模型大鼠的研究 |
| 1. 材料与方法 |
| 2. 数据分析 |
| 3. 实验结果 |
| 3.1 大鼠一般状态 |
| 3.2 大鼠体重,睾丸、附睾重量 |
| 3.3 大鼠睾丸、附睾脏器系数 |
| 3.4 精子浓度及活动率 |
| 4. 小结 |
| 第二部分 灵归方对ORN诱导的弱精子症模型大鼠附睾功能影响的实验研究 |
| 实验一 灵归方对ORN诱导弱精子症大鼠附睾LC相关通路的影响 |
| 1. 材料与方法 |
| 2. 数据分析 |
| 3. 实验结果 |
| 3.1 精子浓度及活动率 |
| 3.2 附睾LC含量 |
| 3.3 灵归方对附睾OCTN2蛋白表达的影响 |
| 3.4 灵归方对附睾OCTN2 mRNA表达的影响 |
| 实验二 灵归方对弱精子症大鼠血清性激素及附睾氧化应激反应的影响 |
| 1. 材料与方法 |
| 2. 数据分析 |
| 3. 实验结果 |
| 3.1 灵归方对血清性激素水平的影响 |
| 3.2 灵归方对附睾组织GSH-Px、SOD活性,MDA含量的影响 |
| 3.3 灵归方对睾丸、附睾组织结构的影响 |
| 讨论 |
| 1. 选择LC相关通路作为研究的依据 |
| 2. 选择ORN作为造模药物的依据 |
| 3. 灵归方组方分析 |
| 4. 灵归方改善弱精子症大鼠作用机制 |
| 4.1 灵归方增加弱精子症大鼠附睾LC含量 |
| 4.2 灵归方上调OCTN2蛋白及mRNA在附睾中的表达 |
| 4.3 灵归方抗氧化作用 |
| 结论 |
| 创新点 |
| 不足与展望 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简介 |
| 附录 |
（8）补肾生精法治疗少弱精子症及其调控生精细胞增殖与凋亡的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 符号说明 |
| 第一部分 文献综述 |
| 综述一 中医药诊治男性不育少弱精子症的研究进展 |
| 1 少弱精子症诱因 |
| 2 中医病名 |
| 3 中医病因病机 |
| 4 中医药治疗 |
| 5 总结与展望 |
| 参考文献 |
| 综述二 生精细胞增殖、凋亡相关蛋白及通路的研究进展 |
| 1 精子发生的三个阶段 |
| 2 生精细胞的增殖 |
| 3 生精细胞的凋亡 |
| 4 生精细胞增殖、凋亡相关蛋白 |
| 5 总结与展望 |
| 参考文献 |
| 第二部分 临床研究 菟枸助育汤治疗男性不育少弱精子症的临床研究 |
| 前言 |
| 1 研究对象 |
| 2 研究方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 参考文献 |
| 第三部分 实验研究 |
| 实验一 菟丝子-枸杞子对生精功能障碍SD大鼠生精功能的影响 |
| 前言 |
| 1 材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 参考文献 |
| 实验二 基于SCF/c-kit--PI3K--Bcl-2通路探讨菟丝子-枸杞子调控生精细胞增殖与凋亡的作用机制 |
| 前言 |
| 1 材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 参考文献 |
| 结语 |
| 附录1 |
| 附录2 |
| 致谢 |
| 个人简介 |
（9）褪黑素对热应激种公牛精子质量的影响（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 文献综述 |
| 第一章 褪黑素影响热应激种公牛精子质量的研究进展 |
| 1.1 精子生物学特性 |
| 1.1.1 精子结构 |
| 1.1.2 精子代谢 |
| 1.1.3 精子运动 |
| 1.2 精子质量常规检测指标 |
| 1.2.1 精子活力及活率 |
| 1.2.2 精子质膜的完整性 |
| 1.2.3 精子顶体完整性 |
| 1.2.4 精子线粒体膜的完整性 |
| 1.3 热应激对精子质量的影响 |
| 1.3.1 热应激概述 |
| 1.3.2 热应激对精子质量的影响 |
| 1.4 褪黑素对雄性动物生殖机能的影响 |
| 1.4.1 褪黑素概述 |
| 1.4.2 褪黑素对睾丸发育的影响 |
| 1.4.3 褪黑素对精子发生的影响 |
| 1.4.4 褪黑素对精子质量与运动的影响 |
| 1.4.5 褪黑素对精子超活化和受精的影响 |
| 1.4.6 褪黑素对精液品质与保存的影响 |
| 1.4.7 褪黑素对热应激雄性动物生殖机能的影响 |
| 本试验目的与意义 |
| 试验部分 |
| 第二章 季节对种公牛精液品质的影响 |
| 2.1 试验材料与方法 |
| 2.1.1 试验器材和试剂 |
| 2.1.2 试验动物 |
| 2.1.3 种公牛精液采集 |
| 2.1.4 冻精制作 |
| 2.1.5 精液品质鉴定方法 |
| 2.2 数据处理 |
| 2.3 结果与分析 |
| 2.3.1 同一品种不同季节种公牛精液品质 |
| 2.3.2 不同品种种公牛在夏季精液品质 |
| 2.4 讨论 |
| 2.4.1 不同季节种对同一品种种公牛精液品质的影响 |
| 2.4.2 不同季节对不同品种种公牛精液品质的影响 |
| 2.5 小结 |
| 第三章 热应激对西门塔尔牛精子质量的影响 |
| 3.1 试验材料与方法 |
| 3.1.1 主要试剂 |
| 3.1.2 主要仪器设备 |
| 3.1.3 主要试验试剂配制 |
| 3.1.4 精子质量检测方法 |
| 3.1.5 数据统计分析 |
| 3.2 试验设计 |
| 3.3 结果与分析 |
| 3.3.1 热应激对精子活力和精子活率的影响 |
| 3.3.2 热应激对精子顶体完整性的影响 |
| 3.3.3 热应激对精子质膜完整性的影响 |
| 3.3.4 热应激对精子线粒体膜完整性的影响 |
| 3.4 讨论 |
| 3.5 小结 |
| 第四章 褪黑素对热应激西门塔尔牛精子质量的影响 |
| 4.1 试验材料与方法 |
| 4.1.1 主要试剂 |
| 4.1.2 主要仪器设备 |
| 4.1.3 主要试验试剂配制 |
| 4.1.4 精子质量检测方法 |
| 4.1.5 数据统计分析 |
| 4.2 试验设计 |
| 4.3 结果与分析 |
| 4.3.1 添加不同浓度褪黑素对精子活力和活率的影响 |
| 4.3.2 添加不同浓度褪黑素对精子顶体完整性的影响 |
| 4.3.3 添加不同浓度褪黑素对精子质膜完整性的影响 |
| 4.3.4 添加不同浓度褪黑素对精子线粒体膜完整性的影响 |
| 4.4 讨论 |
| 4.5 小结 |
| 第五章 褪黑素保护热应激西门塔尔牛精子质量的受体类型 |
| 5.1 试验材料与方法 |
| 5.1.1 主要试剂 |
| 5.1.2 主要仪器设备 |
| 5.1.3 主要试验试剂配制 |
| 5.1.4 精子质量检测方法 |
| 5.1.5 数据统计分析 |
| 5.2 试验设计 |
| 5.3 结果与分析 |
| 5.3.1 褪黑素受体对热应激精子活力和活率的影响 |
| 5.3.2 褪黑素受体对热应激精子顶体完整性的影响 |
| 5.3.3 褪黑素受体对热应激精子质膜完整性的影响 |
| 5.3.4 褪黑素受体对热应激精子线粒体膜完整性的影响 |
| 5.4 讨论 |
| 5.5 小结 |
| 全文结论 |
| 参考文献 |
| 附录 A |
| 附录 B |
| 缩略词表 |
| 致谢 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 |
（10）蒙古马睾丸精原干细胞体外分离培养与鉴定（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 1 引言 |
| 1.1 蒙古马简介及其特点 |
| 1.2 睾丸发育和精子发生过程 |
| 1.2.1 睾丸组织学构造及功能 |
| 1.2.2 精子发生过程 |
| 1.2.3 精子发生的微环境 |
| 1.3 精原干细胞(spermatogonial stem cells SSCs) |
| 1.3.1 精原干细胞简介 |
| 1.3.2 精原干细胞来源 |
| 1.3.3 精原干细胞生物学特点 |
| 1.3.4 精原干细胞的特殊生长环境 |
| 1.3.5 精原干细胞表面分子标记物 |
| 1.3.6 精原干细胞自我更新分化方式 |
| 1.3.7 精原干细胞的培养 |
| 1.3.8 精原干细胞体外培养研究进展 |
| 1.3.9 温度对精原干细胞的影响 |
| 1.4 精原干细胞应用前景 |
| 1.5 本研究目的及意义 |
| 1.6 技术路线 |
| 2 实验一 蒙古马睾丸支持细胞(饲养层)的制备 |
| 2.1 材料与方法 |
| 2.1.1 实验材料 |
| 2.2 试验方法 |
| 2.2.1 支持细胞原代分离培养及纯化 |
| 2.2.2 支持细胞的低渗处理 |
| 2.2.3 支持细胞生长曲线绘制 |
| 2.2.4 支持细胞饲养层制备 |
| 2.2.5 支持细胞鉴定 |
| 2.3 结果与分析 |
| 2.3.1 支持细胞生长曲线观察 |
| 2.3.2 HE染色结果 |
| 2.3.3 qRT-PCR结果 |
| 2.4 讨论 |
| 2.5 小结 |
| 3 实验二 蒙古马睾丸精原干细胞体外分离培养 |
| 3.1 材料与方法 |
| 3.1.1 材料 |
| 3.2 实验前工作准备 |
| 3.3 试验方法 |
| 3.3.1 蒙古马睾丸单细胞悬液制备 |
| 3.3.2 利用差异贴壁法将蒙古马睾丸精原干细胞的纯化 |
| 3.4 将精原干细胞转移到支持细胞饲养层上培养 |
| 3.4.1 支持细胞饲养层复苏 |
| 3.4.2 精原干细胞的培养 |
| 3.4.3 精原干细胞的纯化效率 |
| 3.5 精原干细胞的鉴定 |
| 3.5.1 精原干细胞生长情况检测和形态学观察 |
| 3.5.2 精原干细胞(SSCs)碱性磷酸酶(AKP)染色鉴定 |
| 3.5.3 精原干细胞SSCs免疫荧光化学染色鉴定 |
| 3.6 实验结果 |
| 3.6.1 支持细胞饲养层形态 |
| 3.6.2 精原干细胞分离纯化效率检测 |
| 3.6.3 在不同饲养层上的形态 |
| 3.6.4 碱性磷酸酶(AKP)染色法鉴定SSCs |
| 3.6.5 精原干细胞免疫荧光染色结果 |
| 3.6.6 qRT-PCR结果 |
| 3.7 讨论 |
| 3.8 小结 |
| 4 全文结论 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 个人简介 |
四、温度对小鼠睾丸生精机能的影响（论文参考文献）
- [1]磷酸甘油酸变位酶1在单次热应激小鼠睾丸中的表达变化[J]. 赵元淑,陈文彬,邹立斌,吕道均,张守波. 中华男科学杂志, 2021(09)
- [2]长白公猪性成熟前后睾丸组织环状RNA、信使RNA N6-腺苷甲基化修饰的发掘鉴定及差异表达分析[D]. 张飞. 安徽农业大学, 2021
- [3]PCB118暴露对ICR小鼠精子发生的影响及其机制的初步探究[D]. 陶钰荣. 山东师范大学, 2021(12)
- [4]补肾解毒方对电离辐射损伤孕鼠胎盘组织活性及妊娠结局的防治作用研究[D]. 乔祚. 锦州医科大学, 2021(01)
- [5]ASX对OTA中毒小鼠雄性生殖机能保护作用的研究[D]. 姚贝贝. 沈阳农业大学, 2020(04)
- [6]矢车菊素-3-O-葡萄糖苷对3-氯-1,2-丙二醇暴露下小鼠生殖损伤的保护作用[D]. 姚紫兰. 暨南大学, 2020(03)
- [7]灵归方对奥硝唑诱导的弱精子症模型大鼠附睾功能影响的实验研究[D]. 晏斌. 中国中医科学院, 2020(01)
- [8]补肾生精法治疗少弱精子症及其调控生精细胞增殖与凋亡的研究[D]. 管斯琪. 北京中医药大学, 2020(04)
- [9]褪黑素对热应激种公牛精子质量的影响[D]. 申艳超. 河南科技学院, 2020
- [10]蒙古马睾丸精原干细胞体外分离培养与鉴定[D]. 宋连杰. 内蒙古农业大学, 2020(05)