一、脓毒症大鼠多器官白介素18表达及其与内毒素血症的关系（论文文献综述）
吕雅婷[1]（2021）在《FECH基因IVS3-48突变及KIM-1、NGAL与高温高湿运动所致肝肾损伤相关性研究》文中研究表明一、FECH IVS3-48基因突变与中国汉族青年男性热应激损伤的相关性研究目的:探讨亚铁螯合酶（FECH）基因IVS3-48T/C多态性与中国汉族青年男性高温运动致多器官功能损伤的相关性。方法:以141名中国汉族健康青年男性为研究对象,在高温高湿环境条件下,3km长跑运动前后采血,应用全自动生化分析仪检测血浆乳酸、肝功能（AST、ALT）、肾功能（CCr）、细胞酶学（CK、LDH）,应用Sanger测序检测受试者的FECH IVS3-48等位基因。根据受试者组织细胞损伤情况,将其分为损伤组与非损伤组。对比分析FECH IVS3-48基因多态性与高温高湿环境下机体运动性损伤的相关性。结果:⑴组织细胞损伤:32例（22.70%）受试者运动后出现组织细胞的损伤;⑵FECH IVS3-48等位基因:FECH IVS3-48T>C等位基因在研究人群中等位基因频率为34.04%;其中损伤组为34.38%,非损伤组为33.94%;⑶FECH IVS3-48基因型:三种基因型在研究人群中的分布频率依次为TT基因型共62例（43.97%）,TC基因型共62例（43.97%）、CC基因型为17例（12.06%）;⑷基因型与运动性损伤的相关性:TT、TC、CC基因型在损伤组中分别为12例（37.50%）、18例（56.25%）、2例（6.25%）,在非损伤组中分别为50例（45.87%）、44例（40.37%）、15例（13.76%）,两组基因型分布差异无统计学意义（Fisher=2.709,p=0.273）;⑸Logistic回归分析:在排除BMI、年龄的影响后FECH IVS3-48基因型与高温高湿环境下运动性组织细胞损伤无明显相关性。结论:⑴高温高湿条件下剧烈运动是造成人体组织细胞损伤的高危因素,可使部分青年男性出现组织细胞损伤;⑵FECH具有多态性,IVS3-48T>C在研究人群中等位基因频率为34.04%;⑶研究结果显示IVS3-48T>C突变与中国青年男性高温高湿运动所致组织细胞损伤的风险无明显关联。二、高温高湿环境下运动所致肝肾损伤早期损伤分子研究目的:探讨高温高湿环境下运动所致人体肝肾损伤的新型分子标志。方法:以热习服超过1年以上的100名部队官兵为研究对象,根据环境温度湿度不同将其分为两组:常温常湿组（环境温度26±2℃,湿度50±5%）,高温高湿组（环境温度33±2℃,湿度65±5%）,分别在3km长跑训练前后采集受试者静脉血,应用全自动生化分析仪肝功能（ALT、AST）、肾功能（Cr）,应用ELISA检测血浆NGAL、KIM-1的水平。结果:⑴温度湿度对运动性肝肾损伤影响:高温高湿运动组较常温常湿运动组更易发生肝肾损伤,运动后ALT、AST、Cr均有所升高,与运动前相比差异均具有统计学意义（p<0.001）,高温高湿组升高的幅度更大,AST、Cr与常温常湿组相比差异具有统计学意义（p<0.05）。⑵运动性损伤早期分子改变:运动后两组受试者NGAL、KIM-1均有上升,仅高温高湿组与运动前相比差异具有统计学意义（p<0.05）;但运动后高温高湿组与常温常湿组相比差异无统计学意义（p>0.05）;⑶热运动所致肾损伤多重线性回归分析:运动时的环境温度、运动速度、ΔCCr与ΔSCr具有线性关系,与年龄、军龄、BMI、ΔNGAL、ΔKIM-1无明显线性关系。结论:⑴高温高湿环境下运动较常温常湿环境更易发生肝肾损伤;且运动速度越快发生肝肾损伤的风险越大;⑵肾脏早期损伤分子KIM-1和NGAL运动后即时检测对判断肝肾损伤无明显临床意义。
李祥[2]（2021）在《乌司他丁通过抑制NLRP3活化减轻脓毒症肠道炎症反应的研究》文中认为目的:探讨NLRP3炎症小体活化在脓毒症大鼠肠道黏膜屏障破坏中的作用及乌司他丁（UTI）对脓毒症大鼠肠道核转录因子-κB（NF-κB）/NLRP3炎症小体信号通路表达的影响。方法:64只雄性Wistar大鼠按随机数字表法分成假手术（Sham）组、盲肠结扎穿孔术（CLP）组、UTI及UTI预处理组,16只/组。UTI组于CLP术后1、6、12、18 h以100 k U/kg UTI腹腔注射;UTI预处理组于CLP术前1 h 100 k U/kg UTI腹腔注射,其余处理同UTI组。苏木素-伊红（HE）染色进行回肠病理评分;采用酶联免疫吸附试验（ELISA）测定肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-1β）、肠型脂肪酸结合蛋白（I-FABP）水平;应用蛋白质免疫印迹试验（Wertern Blot,WB）检测小肠组织NF-κB p65、NLRP3、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶1（Caspase-1）、凋亡相关斑点蛋白（ASC）、肠道紧密连接蛋白-1（Claudin-1）水平;免疫组化（IHC）法检测Claudin-1、闭合蛋白（Occludin）以及NLRP3、ASC、Caspase-1的表达。结果:相比Sham,CLP组术后24h存活率下降;肠道病理学评分升高;I-FABP及IL-1β、TNF-α水平均明显升高;WB提示NF-κB p65、NLRP3、Caspase-1、ASC蛋白明显增加而Claudin-1的明显降低;IHC提示组织Claudin-1、Occludin表达减少,NLRP3、Caspase-1、ASC增加。与CLP组相比,UTI干预或UTI预处理后,24h存活率无明显差别（均P>0.05）,但肠道损伤明显缓解,Chiu评分及血浆中TNF-α、IL-1β、I-FABP水平明显降低（均P<0.05）,小肠NF-κB p65、NLRP3、Caspase-1、ASC的表达明显下降（均P<0.05）;IHC提示,小肠组织Claudin-1、Occludin阳性表达面积百分比（Area%）升高（均P<0.05）。NLRP3、Caspase-1、ASC阳性Area%降低（均P<0.05）。但UTI组与UTI预处理组的改善作用差异均无统计学意义。结论:脓毒症时肠道屏障功能障碍可能与肠黏膜中NLRP3炎症小体活化有关;UTI肠道黏膜保护作用可能与抑制肠黏膜中NLRP3炎症小体活化有关,但UTI预处理与UTI干预比较无明显优势。
江银玲[3]（2020）在《原花青素β2对百草枯所致急性呼吸窘迫综合征的保护作用及机制研究》文中认为研究背景与目的:急性呼吸窘迫综合征（acute respiratory distress syndrome,ARDS）是常见的呼吸危重症,可由多种原因引起,其发生与发展过程复杂,发病机理尚未完全阐明。可能的机制包括氧化应激损伤、炎症因子风暴等损伤肺上皮细胞与微血管内皮细胞,引起肺血管通透性增加,大量含蛋白质的液体进入肺间质和肺泡腔,从而诱发顽固性呼吸衰竭。百草枯是一种常用的杂环除草剂,因其具有嗜肺性,中毒后主要引起急性呼吸窘迫综合征而具有较高的毒性,可用于制作ARDS动物模型,且百草枯中毒目前暂无有效解毒剂,故进一步深入探究其引起急性呼吸窘迫综合征的致病机制具有极大的临床价值。鉴于氧化损伤与炎症反应是引起百草枯的系列毒性反应的主要原因,我们设想抗氧化与抗炎治疗可有效防治百草枯引起的肺损伤。抗氧化应激损伤、减轻炎症反应也一直是这几年来ARDS治疗领域的研究热点。原花青素是具有很强抗氧化能力的天然提取物,其对于百草枯所致ARDS有无治疗作用及相关作用机理暂未见报道。本研究通过使用原花青素β2处理百草枯染毒大鼠ARDS模型观察其疗效,并探究其可能的机制。研究方法:1.ARDS模型的建立:通过腹腔注射百草枯染毒SD大鼠,观察动物一般情况及肺组织切片HE染色,确定成功制备ARDS动物模型。2.对氧化应激、肺血管通透性的影响:实验动物分为对照组（control组）,百草枯组（PQ组）,低剂量原花青素β2组（25mg/kg-PCβ2）,中等剂量原花青素β2组（50mg/kg-PCβ2）,高剂量原花青素β2组（100mg/kg-PCβ2）。处死大鼠后测定肺组织MDA、SOD、MPO等过氧化指标、肺湿干比及肺泡灌洗液中PMN。3.机制研究:Elisa法测定肺泡灌洗液中IL-1β、IL-18,RT-PCR法测定肺组织中IL-1β、IL-18 m RNA含量,western blot测定肺组织NLRP3炎性小体的表达。4.静默NLRP3基因,观察各组大鼠肺通透性、BALF中PMN的变化,测定肺组织中IL-1β、IL-18含量进一步探究NLRP3炎性小体在百草枯所致ARDS中的作用及原花青素β2发挥肺保护作用的机制。研究结果:1.大鼠一般情况:生理盐水组活泼强壮,食欲、反应均正常,活动敏捷,毛色均匀有光泽,呼吸平稳。造模组大鼠腹腔注射百草枯溶液30分钟-2小时左右即开始出现进食饮水减少、活动减少、反应迟钝、毛发竖起。72小时后精神萎靡、毛发蓬松、饮食欠佳、呼吸急促,口唇、肢端、鼠尾发绀明显,有的出现鼻腔、口腔出血,深大呼吸等。PCβ2组一般状况较PQ组有所改善,呈剂量依赖性。2.肺组织病理改变:对照组大鼠肺组织镜下肺泡结构清晰正常,肺泡腔清晰,肺泡壁结构无异常,肺泡间隔均匀一致,没有出血、坏死及炎症渗出。PQ组大鼠肺泡内皮细胞肿胀、毛细血管充血、肺泡腔内大量渗出、有大量炎性细胞浸润、肺泡壁明显增厚;PCβ2组肺组织内皮细胞肿胀、毛细血管充血、炎性细胞浸润均较PQ组减轻,且呈剂量依赖性。PQ组肺损伤评分显着高于空白对照组（P<0.001）,PCβ2组肺损伤评分较PQ组下降（P<0.05）,且呈剂量依赖性。3.肺湿干比计算:对照组大鼠未见明显肺水肿,PQ组大鼠肺含水量增加,肺水肿明显,肺湿干比明显高于对照组（P<0.001）,而PCβ2组大鼠肺含水量随剂量增加依次减轻,肺湿干比呈下降趋势,且呈剂量依赖性（P<0.05）。4.肺通透指数检测:PQ组肺通透指数显着高于对照组,P<0.001,PCβ2组肺通透指数明显下降,且随着给药剂量的增加,肺通透指数下降更明显,较PQ组变化均有统计学意义,但仍高于空白对照组。5.肺泡灌洗液PMN计数:PQ组BALF中PMN计数显着高于空白对照组,而PCβ2组BALF中PMN计数呈下降趋势,且呈剂量依赖性。6.氧化应激指标的变化:PQ组与PCβ2组较对照组MDA水平、MPO活性明显升高,PCβ2组（低、中、高剂量组）与PQ组相比较,MDA水平、MPO活性均有不同程度的下降。PQ组与PCβ2组较对照组SOD活性明显下降,PCβ2组（低、中、高剂量组）与PQ组相比较,SOD均有不同程度的上升。7.BALF中IL-1β、IL-18含量的变化:PQ组IL-1β、IL-18水平较对照组明显升高,PCβ2组（低、中、高剂量组）与PQ组相比较,IL-1β、IL-18含量均有不同程度的下降,且随着原花青素剂量的增加,IL-1β、IL-18含量均呈下降趋势。8.肺组织中IL-1β、IL-18 m RNA的变化:PQ组IL-1β、IL-18m RNA水平较对照组明显升高,PCβ2组（低、中、高剂量组）与PQ组相比较,IL-1β、IL-18 m RNA含量均有不同程度的下降,且随着原花青素剂量的增加,IL-1β、IL-18 m RNA含量均呈下降趋势。9.肺组织中NLRP3、ASC、caspase-1水平的变化:PQ组NLRP3、ASC、caspase-1水平较对照组明显升高,PCβ2组（低、中、高剂量组）与PQ组相比较,NLRP3、ASC、caspase-1含量均有不同程度的下降,且呈剂量依赖性。10.静默NLRP3基因对肺组织及IL-1β、IL-18水平的影响:NLRP3基因静默组肺组织W/D、肺通透性及BALF中PMN较PQ组明显下降,其肺组织中IL-1β与IL-18的含量较PQ组明显下降（P<0.01）,PCβ2组IL-1β与IL-18的含量与基因静默组相仿,差异无统计学意义。NLRP3基因静默组大鼠IL-1β、IL-18较空白对照组明显上升,差异有统计学意义（P<0.05）。研究结论:本实验通过腹腔注射百草枯成功建立ARDS模型,可用于ARDS的研究。原花青素β2可降低ARDS大鼠肺血管通透性,减轻肺水肿,降低BALF中PMN。其抗氧化作用可降低肺组织中MDA水平与MPO活性,上调SOD活性从而减轻肺损伤。静默NLRP3基因提示NLRP3炎性小体参与介导百草枯所致的ARDS。原花青素β2可通过抑制NLRP3炎性小体而下调IL-1β、IL-18的表达从而对百草枯所致ARDS起到一定的干预效果。
谢云[4]（2020）在《抗凝血酶Ⅲ预测脓毒症相关性急性肾损伤的临床研究》文中研究说明背景和目的 脓毒症相关性急性肾损伤（AKI）发病率和死亡率居高不下,早期诊断尤为重要。有研究发现抗凝血酶III（ATⅢ）除了在体内抗凝作用中起关键作用外,还在抗炎反应中起重要作用,尤其与AKI相关。我们通过阅读和总结与脓毒症相关性AKI诊断相关生物标志物的文献,并进行临床研究探讨ATⅢ在脓毒症相关性AKI的预测价值。方法 阅读2019年1月11日之前发表的诊断脓毒症相关性AKI的中英文文章,进行生物标志物的荟萃分析。回顾性研究（2015年10月至2018年3月）联合前瞻性研究（2018年3月至2020年1月）入住上海交通大学附属第一人民医院急诊危重病科的脓毒症患者,主要结局指标:28天内发生脓毒症相关性AKI,次要结局指标:28天内死亡。记录脓毒症相关性AKI诊断前,入ICU48小时内获得ATⅢ水平。通过测量血清肌酐水平和尿量来评估肾功能。结果 1、尿液和血清中性粒细胞明胶酶相关脂质载体蛋白（NGAL）,尿白介素18（IL-18）,尿肾损伤因子-1（KIM-1）,尿神经轴突导向因子-1（Netrin-1）作为脓毒症相关性AKI的诊断生物标志物敏感性特异性都较高。2、根据SROC曲线下面积,脓毒症相关AKI生物标志物的诊断顺序为尿KIM-1>尿NGAL>血液NGAL>尿IL-18。3、ATⅢ水平降低是老年患者脓毒症相关性AKI的预测因子（AUC-ROC=0.729,灵敏度0.700和特异性0.714）。ATⅢ/Cr比值降低也是脓毒症相关性AKI的预测因子（AUC-ROC=0.971,灵敏度0.900和特异性1）。ATⅢ和ATⅢ/Cr在预测生存率方面的准确性是中等的,AUC-ROC分别为0.681和0.804,灵敏度范围在0.802和0.596之间,特异性在0.542和0.875之间。4、在老年脓毒症患者中,使用约登指数计算临界值,分为低ATⅢ组和高ATⅢ组,相比之下,高ATⅢ组的ICU住院时间显着降低,无机械通气时间、无CRRT时间和存活时间明显延长。5、男性、心血管疾病、低ATⅢ为脓毒症相关性AKI的独立危险因素。高龄、免疫疾病、低ATⅢ为脓毒症患者死亡的独立危险因素。6、非AKI组血浆ATⅢ水平高于AKI组。存活组的血浆ATⅢ水平高于非存活组。No-CRRT组的血浆ATⅢ水平高于CRRT组。No-CKD组的血浆ATⅢ水平高于CKD组。7、ATⅢ在发生肺部感染组比未发生肺部感染组明显升高。ATⅢ在发生腹腔感染组比未发生腹腔感染组明显降低。ATⅢ在内科患者中比外科患者明显高。8、基于ATⅢ建立的脓毒症AKI预测模型为:IN[P/（1-P）]=-1.211Gender-0.017ATⅢ+0.022Cr+0.004BUN-2.8192。模型拟合优度检验P=0.000,模型ROC曲线下面积=0.9862。提示,该模型具有较高的区分度和校准度。结论 ATⅢ降低是脓毒症相关性AKI的独立危险因素,也是脓毒症患者死亡的独立危险因素。ATⅢ降低可以预测脓毒症相关性急性肾损伤。较低的ATⅢ预示预后较差。
伏春艳[5]（2020）在《富马酸二甲酯减轻LPS诱导的心肌细胞线粒体损伤的机制研究》文中认为背景脓毒症是一种严重威胁人类生命的全身性炎症反应综合征,可发展为脓毒性休克及多器官功能障碍综合征。资料显示,罹患心功能障碍的脓毒症患者的死亡率约为70%-90%,明显高于无心功能不全患者（20%）。大量的研究表明,氧化应激、线粒体结构和功能受损是脓毒症诱导心功能障碍的基本病理生理学机制。然而,目前对脓毒症诱导的心功能障碍缺乏有效的治疗策略。富马酸二甲酯（Dimethyl fumarate,DMF）是一种富马酸的衍生物,可在酯酶水解的作用下,生成富马酸单甲酯。由于DMF及其代谢产物在神经、肝脏、心脏等多种组织中均表现出抗炎和抗氧化的特性。因此,我们推测它也可能对抗脓毒症引起的心肌损伤。核因子E2相关因子2（nuclear factor E2-related factor 2,Nrf2）是细胞中对抗氧化应激损伤的一种重要的保护性蛋白,多表达于心脏、肺和肝脏。当细胞受到刺激时,Nrf2可从细胞质转位进入细胞核内,与基因启动子区域的抗氧化反应元件结合,从而促进具有抗氧化特性的靶基因的表达。已有研究表明,DMF对神经的保护作用是通过Nrf2依赖性机制而实现的。Nrf2是否在DMF对抗脓毒症诱导的心肌损伤中也起着重要的作用,目前尚不清楚。目的观察DMF是否可对抗脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）诱导的心肌细胞损伤,并进一步探讨Nrf2途径是否参与了DMF的心肌保护作用。方法（1）取培养的大鼠H9C2心肌细胞,用1μg/m L LPS刺激建立心肌细胞损伤模型。（2）细胞随机分为以下几组:对照组,LPS组,DMF组,LPS+DMF组,Nrf2-si RNA组,LPS+Nrf2-si RNA组,LPS+DMF+Nrf2-si RNA1组,PD98059组,LPS+DMF+PD98059组。（3）CCK-8法检测心肌细胞生存率;Annexin V-PI流式细胞技术检测心肌细胞的凋亡。（4）Western blotting检测心肌细胞Nrf2、HO-1、p-ERK1/2、ERK1/2、Lamin A/C、GAPDH蛋白的表达。（5）比色法检测乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase,LDH）的释放量,心肌丙二醛（malondialdehyde,MDA）和总谷胱甘肽（glutathione,GSH）含量,超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase,GSH-Px）活性。（6）ELSIA试剂盒检测细胞炎症因子（IL-1β和IL-18）水平。（7）激光共聚焦显微镜观察Nrf2的细胞内定位以及线粒体形态。（8）JC-1荧光指示剂检测心肌细胞线粒体膜电位变化情况。（9）Mito SOX Red指示剂检测线粒体超氧化物的产生量。（10）Seahorse生物分析仪测量线粒体呼吸功能,分析基础呼吸、呼吸贮备、质子泄漏、和ATP产生时的耗氧率（oxygen consumption rate,OCR）。结果（1）与对照组相比,心肌细胞用1μg/m L LPS孵育后,细胞生存率下降,细胞凋亡发生率和LDH释放量增加（P<0.01）。而与LPS组相比,DMF（10、20、或40μM）预处理后,细胞生存率增加,细胞凋亡发生率和LDH释放量减少（P<0.01）。（2）Western blotting和免疫荧光结果均显示,LPS处理后,心肌细胞总Nrf2蛋白表达和细胞核Nrf2蛋白量明显减少;DMF预处理不仅可使细胞总Nrf2蛋白表达量和细胞核Nrf2水平明显增加,还可使HO-1蛋白的表达显着增高（P<0.05）。（3）心肌细胞转染Nrf2-si RNA后,DMF诱导的总Nrf2表达增高、Nrf2核转位、和HO-1的表达增加现象均被明显抑制（P<0.01）。此外,Nrf2-si RNA不仅可取消DMF预处理引起的细胞凋亡率、炎症因子、MDA、和LDH的下降,还能抑制DMF诱导的细胞生存率和抗氧化剂（SOD、GSH-Px和GSH）的增加（P<0.01）。（4）DMF预处理可增加p-ERK1/2水平（P<0.01）。ERK1/2特异性抑制剂PD98059可抑制DMF诱导的总Nrf2蛋白、细胞核Nrf2水平、HO-1蛋白,以及生存率的增加（P<0.01）。（5）与LPS组相比,LPS+DMF组细胞的线粒体超氧过物水平和线粒体片段化程度均降低,线粒体膜电位增高,线粒体呼吸功能增强（P<0.01）。以上作用均可被Nrf2-si RNA所阻断（P<0.01）。结论DMF可保护心肌细胞免受LPS的攻击。其机制可能与ERK1/2依赖性的Nrf2/HO-1途径激活有关,并通过减轻氧化应激,改善线粒体形态和能量代谢起作用。
翟明见[6]（2020）在《Caspase-1介导的细胞焦亡在脓毒症心肌损伤中的作用与机制研究》文中研究说明目的:探讨Caspase-1介导的细胞焦亡在脓毒症心肌损伤过程中的作用及其可能的作用机制。方法:1.雄性C57BL/6小鼠,6-8w,行盲肠穿刺结扎术（Cecal ligation and puncture,CLP）构建脓毒症模型,分别于造模后0h、8h、16h及24h取材,病理学检查评定小鼠心肌损伤程度。2.将6-8w雄性C57BL/6小鼠分为三组:对照组（control）、模型组（model）、干预组（intervention）,模型组行盲肠穿刺结扎术（CLP）构建脓毒症模型,对照组只做开腹探查,不做盲肠穿刺结扎,干预组行盲肠穿刺结扎术之前1小时先腹腔注射Caspase-1的抑制剂（Ac-YVAD-cmk）进行预处理,造模后24h小时取材,进行心肌苏木精-伊红染色法（Hematoxylin-eosin staining,HE）染色、透射及扫描电镜检查;用酶联免疫吸附测定法（Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）比较三组小鼠心肌组织匀浆中IL-6、肌酸激酶同工酶（CK-MB）和肌钙蛋白I（cTn-I）等细胞因子的水平高低,用蛋白免疫印迹法（Western Blot,WB）检测三组小鼠心肌组织中IL-1β、Caspase-1和GSDMD的表达量差异。结果:1、CLP术后小鼠出现精神萎靡不振,毛发缺少光泽,活动量明显减少,并有明显的眼部分泌物增多并伴随腹泻症状。2、组织病理结果显示,CLP术后8h小鼠心肌组织轻微水肿,心肌细胞结构完整,无明显炎性细胞浸润;CLP术后16h小鼠心肌组织水肿加重、组织间隙增宽,少量心肌细胞损伤,少量炎性细胞浸润;CLP术后24h小鼠心肌组织严重水肿、组织间隙明显增宽,大量心肌细胞损伤,大量炎性细胞浸润。3、组织病理结果显示,对照组小鼠心肌组织正常,无水肿及炎性细胞浸润,细胞排列紧密,组织间隙正常;模型组小鼠心肌组织严重水肿,组织间隙明显增宽,出现大量心肌细胞损伤,大量炎性细胞浸润;干预组小鼠心肌组织水肿程度较轻,组织间隙较宽,少量心肌细胞损伤,少量炎性细胞浸润。4、透射电镜显示,模型组小鼠心肌细胞线粒体膜结构被大量破坏,线粒体嵴消失,并可见细胞内有大量漂浮的脂滴;对照组小鼠心肌细胞线粒体结构完整,线粒体内膜可见明显的嵴结构;干预组小鼠的心肌细胞损伤程度介于对照组和模型组之间。扫描电镜显示,模型组小鼠心肌细胞膜上形成许多凸起物,细胞膜完整性被破坏;对照组小鼠心肌细胞膜较平整,膜结构完好;干预组小鼠的心肌细胞损伤程度介于对照组和模型组之间。5、酶联免疫吸附试验结果显示,与对照组相比,模型组小鼠心肌组织匀浆中的IL-6、CK-MB和cTn-I含量明显增多（P<0.05）,干预组小鼠心肌组织匀浆中的IL-6、CK-MB和cTn-I含量介于对照组和模型组之间（均P<0.05）。6、蛋白免疫印迹实验结果显示,与对照组相比,模型组小鼠的心肌组织中IL-1β、Caspase-1及GSDMD的蛋白表达量均明显增加（P<0.05）,而干预组小鼠心肌组织中IL-1β、Caspase-1及GSDMD的蛋白表达量介于对照组和模型组之间（均P<0.05）。结论:Caspase-1介导的细胞焦亡参与了CLP诱导的小鼠脓毒症心肌损伤的发生发展,阻断Caspase-1通路,可以减轻心肌损伤。
杨蕊[7]（2018）在《探究PI3K/AKT在大鼠腹腔感染性脓毒症急性肾损伤发病中的作用》文中提出目的:探究3-磷酸肌醇激酶/蛋白激酶B（phosphoinositide 3-kinase/protein kinaseB,PI3K/AKT）在大鼠腹腔感染性脓毒症相关急性肾损伤发病中的作用。内容:本次实验的实验对象为雄性清洁级Sprague-Dawley（SD）大鼠,体重为220-250g,实验设计分为两部分,第一部分为:建立腹腔感染性脓毒症大鼠模型。按照随机数字表的方法,采用盲肠结扎穿孔法（cecal ligation and puncture,CLP）制备腹腔感染性脓毒症模型。将70只大鼠分为CLP6h组（n=12）,CLP12h组（n=12）,CLP24h组（n=12）,CLP48h组（n=12）,CLP72h组（n=12）及假手术组（n=10）,假手术组进行水合氯醛麻醉、开腹、分离盲肠,但不进行盲肠的结扎和穿孔操作。手术后在规定时间点记录各实验组及假手术组的生存率,同时取存活大鼠腹主动脉血,采用酶联免疫吸附法（enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）检测CLP各组及假手术组在对应时间节点即术后6h、12h、24h、48h、72h血清中肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor alpha,TNF-α）、白介素-1β（Interleukin-1β,IL-1β）的浓度水平。第二部分为:分别提取CLP各组及假手术组大鼠腹主动脉血3ml,采用全自动生化分析仪检测血清中血肌酐（Serum creatinine,Scr）、血尿素氮（blood urea nitrogen,BUN）的浓度水平,处死动物并留取血清和肾脏组织标本备用。采用实时定量聚合酶链式反应（real-time polymerase chain reaction,RT-PCR）技术检测CLP6h组、CLP12h组、CLP24h组、CLP48h组、CLP72h组及假手术组大鼠肾脏组织中PI3K/AKT mRNA的表达水平。采用蛋白质免疫印迹实验（Western Blot,WB）检测CLP各组及假手术组大鼠肾脏组织中NLRP3、ASC和Caspase-1的蛋白表达水平,采用免疫组织化学技术(（immunohistochemistry,IHC）检测CLP各组及假手术组肾脏组织中NLRP3、ASC和Caspase-1的阳性细胞数。采用ELISA检测CLP各组及假手术组大鼠血清中白介素-18（Interleukin-18,IL-18）的浓度水平。结果:第一部分:与术前相比,假手术组大鼠在开关腹腔手术后72小时内生命体征及腹部解剖无明显变化。CLP各组大鼠在手术前皮毛顺滑,饮食及饮水均为正常,排便较为规律,且活泼好动,目光灵敏;术后6小时开始大鼠皮毛干枯,食欲减退,出现腹泻症状,活动减少,精神萎靡,目光呆滞;剖腹探查可见腹腔内多脏器出现粘连、淤血,回肠末端组织肿胀明显,腹腔出现渗液并伴有恶臭等炎症改变;且症状随术后时间延长而加重。假手术组、CLP6h组、CLP12h组、CLP24h组、CLP48h组及CLP72h组的生存率分别为:100%、91.6%、83.3%、66.7%、50%、33.3%。假手术组大鼠血清炎症因子TNF-α、IL-1β浓度水平较低且较为稳定;CLP组大鼠从术后6小时开始血清炎症因子TNF-α浓度水平显着升高,且随时间延长其表达水平出现升高,差异具有统计学意义（P<0.01）。第二部分:CLP术后各组Scr、BUN水平显着增加,并且随术后时间延长,Scr、BUN水平逐渐升高（Scr:45.79±7.63,66.76±6.45,68.75±7.89,79.4±5.96,80.42±8.87,82.88±9.78;BUN:7.78±1.53,12.47±1.15,14.67±0.89,18.35±2.21,20.97±2.05,24.53±1.79;单位:μmol/L）,差异具有统计学意义（P<0.05）。RT-PCR的检测结果显示,假手术组大鼠肾脏组织中PI3K mRNA、AKT mRNA的表达水平相对较为稳定;与假手术组相比,CLP各组PI3K mRNA的表达水平明显升高,且随时间延长其表达水平出现升高,差异具有统计学意义（P<0.05）。与假手术组相比,CLP各组AKT mRNA的表达水平明显升高,且随时间延长其表达水平出现升高,差异具有统计学意义（P<0.05）。WB检测结果表明,CLP各组NLRP3、ASC、Caspase-1的蛋白表达水平自术后6小时开始出现显着增高,且随着时间的延长其表达量持续升高,差异具有统计学意义（P<0.01）,手术24小时以后随着时间的延长NLRP3、ASC、Caspase-1的蛋白表达水平趋于稳定（P>0.05）。IHC结果表明,CLP各组NLRP3、ASC、Caspase-1阳性细胞数从术后6小时开始出现明显增多,且随时间延长其表达水平出现升高。ELISA检测结果表明,CLP各组从术后6小时开始血清炎症因子IL-18浓度水平显着升高,且随时间延长其浓度水平持续升高,差异具有统计学意义（P<0.01）。至术后24小时血清炎症因子IL-18浓度水平开始降低,且随时间延长其表达水平出现下降,差异具有统计学意义（P<0.01）。结论:1、通过本次实验验证了大鼠腹腔感染性脓毒症相关AKI时PI3K和AKT的表达水平显着升高,说明PI3K/AKT通路可能在脓毒症相关AKI的发病中起作用。2、NLRP3炎性小体在大鼠腹腔感染性脓毒症相关AKI发病时其表达量呈现出明显增高,且炎性因子IL-1β、IL-18的表达水平也随之升高,表明NLRP3炎性小体及IL-18可能在脓毒症相关AKI的发病中起作用。
卢海源[8]（2014）在《Cs菌丝粉对大鼠脓毒性急性肾损伤中klotho蛋白表达的影响》文中认为目的通过检测脓毒血症急性肾损伤大鼠肾组织中klotho蛋白的表达情况，并应用Cs菌丝粉干预，来研究klotho蛋白在脓毒血症急性肾损伤发病机制中的作用。方法选取健康雄性SD大鼠72只（等级：SPF），体重250g左右，4周龄，随机分为空白对照组（n=16）、CLP组（模型组）（n=28）、Cs菌丝粉干预组（n=28）。对照组普通进食水，开腹后找到盲肠只作轻轻挤压，不结扎穿刺，模型组普通进食水，行CLP术；干预组为Cs菌丝粉干预组，于术前1周开始冬虫夏草[Cs]组5g／（kg·d）灌胃，行CLP术。对照组术前15min、术后3h皮下注射生理盐水20mg/kg，后2组分别于术前15min、术后3h皮下注射盐酸左氧氟沙星20mg/kg，术后为补充手术过程中丢失体液量给以生理盐水5ml/kg皮下注射。每组分别于术后6h、12h、24h通过腹主动脉采血（对照组每组每个时间点2只，其余每组每个时间点6只），然后分离血清（用3000r/min离心机离心15min），检测血清肌酐及尿素氮，ELISA法测定肾组织匀浆中的klotho蛋白、MDA、CAT水平；取静脉血做细菌培养；取出肾脏，将右肾放入4%多聚甲醛中固定24至48小时，之后用石蜡包被，通过HE染色观察肾组织病理损伤，免疫组化法检测klotho蛋白表达及定位。每组于术后12小时分别随机取一只老鼠左肾上级约1cm3放入戊二醛中固定，用于电镜检测行电镜检测。每组余10只大鼠观察生物学行为变化及4天、7天存活率。结果1模型组大鼠精神欠佳，运动迟缓；进食水较少；毛发散乱直立。剖腹可见腹水为淡血性，且量较多，明显恶臭味；肠管充血水肿，肠管组织粘连较重，部分盲肠末端发黑。对照组无上述变化。干预组大鼠术后一般状况介于A、模型组之间。2血肌酐：干预组各时间点血肌酐浓度显着低于模型组（P<0.05），于12h后开始下降，24h接近对照组水平（P>0.05），但仍稍高于对照组；与对照组比较，模型组血肌酐浓度则显着升高（P<0.05）。3血尿素氮：与对照组比较，模型组各时间点尿素氮水平均显着升高（P<0.05），干预组各时间点血尿素氮水平较模型组明显降低（P<0.05），但6h时与对照组差异不大（P>0.05），但仍明显高于对照组。4免疫组化肾组织klotho蛋白表达情况：与对照组、模型组相比，干预组肾组织klotho蛋白表达明显上升（P<0.05）。5肾组织匀浆klotho蛋白水平：模型组血klotho蛋白水平明显低于对照组（P<0.05），干预组则明显高于模型组（P<0.05）。6肾组织匀浆MDA水平：模型组明显升高（P<0.05），干预组较模型组明显下降（P<0.05）。7肾组织匀浆CAT含量：干预组较模型组明显升高（P<0.05），模型组较对照组明显下降（P<0.05）。8血细菌培养，对照组无细菌生长，模型组、干预组均可见细菌生长，可检出大肠杆菌、变形杆菌、假单胞菌属和少量格兰阳性球菌。9对照组、模型组、干预组4天存活率分别为100%、30%、40%；干预组与模型组比较差异虽无统计学意义，但干预组死亡大鼠的存活时间可延长24h左右。对照组、模型组、干预组7天存活率分别为100%、20%、30%，模型组、干预组比较差异无统计学意义（P>0.05）。结论1Cs菌丝粉能增强脓毒性急性肾损伤大鼠koltho蛋白的表达，对肾脏具有一定的保护作用。2氧化应激损伤参与了脓毒性急性肾损伤的发病过程。3Cs菌丝粉能改变脓毒性急性肾损伤大鼠的预后。
高敏[9]（2013）在《C/EBPs诱饵寡核苷酸对脓毒症小鼠多器官损伤的保护作用及机制研究》文中认为背景及目的：脓毒症（sepsis）是感染导致的全身炎症反应综合征（system inflammatory response syndrome, SIRS）,是重症监护病房（ICU）内常见并发症及首要死亡原因。脓毒症治疗花费高,医疗资源消耗大,对人类健康和社会经济造成巨大威胁。CCAAT增强子结合蛋白（CCAAT enhancer binding protein, C/EBPs）是一组属于碱性亮氨酸拉链（basic region leucine zipper, bZIP）家族的转录调控因子,目前已发现6个成员：α、β、γ、δ、ε和ζ。其中成员α、β、δ及ε在各种炎症性疾病急性期反应中发挥关键作用,且作为转录因子有着共同的特异性识别序列RTTGCGYAAY（其中R为A或G,Y为C或T）。因此,为了寻找新的脓毒症防治靶点,本研究采用转录因子诱饵策略（transcription factor decoy strategy, TFDs）体外合成针对转录因子C/EBPs的哑铃形诱饵寡脱氧核苷酸（C/EBPs decoy ODNs）,然后探讨了C/EBPs decoy ODNs对脓毒症的影响及其机制。方法：1)体外实验：先采用免疫印迹分析（western blot, WB）及凝胶滞留实验（electrophoretic mobility shift assay, EMSA）观察LPS（1μg/mL）刺激下RAW264.7细胞内C/EBPs蛋白表达水平及DNA结合活性的变化以期验证C/EBPs在炎症反应中发挥重要作用；然后设计合成针对转录因子C/EBPs的特异性哑铃形decoy ODNs及用于对照的突变寡脱氧核苷酸（C/EBPs mutant ODNs）,在采用电泳及EMSA验证ODNs的合成符合设计要求后用阳离子转染试剂TurboFect将荧光基团FAM标记的ODNs转染入RAW264.7细胞,分别采用流式细胞术检测ODNs转染效率；Hoechst染核后经荧光显微镜观察decoy ODNs在细胞内的分布；alamarBlue实验观察ODNs的细胞毒性；WB观察其对C/EBPs蛋白表达水平的影响；采用ELISA检测|C/EBPs decoy ODNs对LPS （1μg/mL）刺激下RAW264.7细胞上清中细胞因子TNF-a, IL-1β及IL-6的表达影响；采用Real-time PCR检测C/EBPs decoy ODNs对LPS （1μg/mL）刺激下RAW264.7细胞内多个C/EBPs炎症相关靶基因的表达影响。2)体内试验：采用盲肠结扎穿刺（CLP）制备脓毒症小鼠模型,经量效实验和时效实验观察C/EBPs decoy ODNs对脓毒症小鼠存活率的影响；尾静脉注射FAM标记的C/EBPs decoy ODNs6h及24h后检测组织匀浆上清荧光密度观察decoy ODNs的器官分布及停留情况；然后通过检测反应多器官损伤的血清生化指标及多器官光镜下形态学变化观察C/EBPs decoy ODNs对脓毒症小鼠多器官损伤的保护作用；采用ELISA检测C/EBPs decoy ODNs对脓毒症小鼠血清细胞因子TNF-α, IL-1β及IL-6的表达影响,采用Real-time PCR检测C/EBPs decoy ODNs对肺组织中多个C/EBPs炎症相关靶基因表达的影响。结果：1)体外实验：RAW264.7细胞中CEBPα蛋白在基础状态下表达较高,LPS刺激后1h即开始降低,于6h降到最低峰,之后又开始上升,于24h恢复到基础水平；CEBPβ基础水平较低,LPS刺激后1h即开始升高,于12h达到高峰,24h又开始下降,但仍高于基础水平；CEBPδ基础水平较低,LPS刺激后1h即开始升高,一直持续至24h;CEBPε于LPS刺激后6h开始升高,24h又开始下降,但仍高于基础水平。细胞核中CEBPα、β、δ及ε的表达变化与其在细胞总蛋白中的表达情况基本一致；但CEBPα蛋白在LPS刺激后6h才开始降低；CEBPε则于LPS刺激后1h则有所下降,于3h开始升高,一直持续至24h。C/EBPsDNA结合活性在LPS刺激后1h即开始增加,于6h和12h时达到高峰,C/EBPs的这种高水平的DNA结合活性一直持续到24h；且CEBP（3及CEBPδ的DNA结合活性远高于CEBPα和CEBPε。电泳及EMSA结果表明C/EBPs decoy ODNs和mutant ODNs符合设计要求。转染ODNs4h之后,RAW264.7细胞C/EBPs decoy ODNs和C/EBPs mutant ODNs的转染效率分别为87.35%及87.71%；荧光显微镜下观察,发现转染4h之后decoy ODNs大部分定位于细胞核；C/EBPs decoy ODNs和mutant ODNs均无明显细胞毒性作用；C/EBPs decoy ODNs和：mutant ODNs不影响RAW264.7细胞中CEBPα、β、δ及ε蛋白表达水平。C/EBPs decoy ODNs能抑制LPS刺激下RAW264.7细胞TNF-α, IL-1β及IL-6的表达。C/EBPs decoy ODNs能抑制LPS刺激下RAW264.7细胞IL-6, IL-1β, IL-18, MCP-1, MIF, caspase-1, NF-κB1, ICAM1, VCAM1和Fgα的mRNA表达。2）体内试验：量效实验表明CLP后立即给予小剂量（10μg）、中剂量（30μg）、大剂量（90μg） C/EBPs decoy ODNs干预分别可使CLP所致的脓毒症小鼠存活率提高30%、60%及70%; C/EBPs mutant ODNs干预则对脓毒症小鼠存活率无明显影响。时效实验发现术后0、3、6、12h给予C/EBPs decoy ODNs （30μg）干预可使脓毒症小鼠存活率提高60%、50%、40%及30%。尾静脉注射6h后,C/EBPs decoy ODNs在肝、肺、肾组织中均有分布；注射24h之后,C/EBPs decoy ODNs在肝、肺组织中仍有停留,而肾组织中则已检测不到。C/EBPs decoy ODNs降低脓毒症小鼠血清生化指标BUN, Cr, ALT, AST, LDH及CK-MB水平,减轻其心、肝、肺、肾的组织损伤；C/EBPs decoy ODNs降低脓毒症小鼠血清炎症因子TNF-α, IL-1β及IL-6表达水平；C/EBPs decoy ODNs降低脓毒症小鼠肺组织多个炎症相关因子IL-6, IL-1β, IL-18, MCP-1, MIF, caspase-1, NF-κB1, ICAM1, VCAM1及Fgα的mRNA表达。结论：C/EBPs在LPS所致的炎症反应中发挥重要作用,可作为脓毒症防治的潜在干预靶点；C/EBPs decoy ODNs通过干扰C/EBPs DNA结合活性而抑制多个炎症相关靶基因的表达,从而发挥对脓毒症小鼠多器官损伤的保护作用。
钱程[10]（2013）在《脓毒性休克早期大鼠血清细胞因子变化及不同液体复苏后对其影响的研究》文中指出目的：探讨大鼠脓毒性休克早期经不同液体（0.9%生理盐水、低分子右旋糖酐、清蛋白）复苏后不同时间（6h、12h、24h）的血清细胞因子（TNF-α、IL-6、IL-1β、IL-10、IL-4）表达水平。方法：将114只雄性SD大鼠随机分为6组,对各组大鼠做不同处理,分别在不同观察时间段（6h、12h、24h）采血离心取血清,采用酶联免疫吸附法（ELISA）定量检测血清细胞因子（TNF-α、IL-6、IL-1β、IL-10、 IL-4）浓度,并进行对比及统计学分析。分组及处理：（1）正常对照组24只（对照组,n=24）：不做任何手术处理,作为本实验的正常对照值。（2）脓毒性休克组18只（休克组,n=18）：采用盲肠结扎穿刺法（cecalligation and perforation,简称CLP）制作脓毒性休克大鼠模型。（3）假手术组18只（假手术组,n=18）：仅将盲肠翻出并还纳,不进行穿孔处理。（4）液体干预组54只（其中随机分为3个亚组,每亚组18只）：采用CLP法制作脓毒性休克大鼠模型3h后分别给予不同液体进行复苏干预治疗,①生理盐水复苏组（生理盐水组,n=18）：生理盐水l0ml.kg-1,鼠尾静脉20min缓慢推注。②低分子右旋糖酐复苏组（低右组,n=18）：低分子右旋糖酐10m1.kg-1,鼠尾静脉20min缓慢推注。③清蛋白复苏组（清蛋白组,n=18）：人血清蛋白10m1.kg-1,鼠尾静脉20min缓慢推注。另外将40只SD雄性大鼠随机分成休克组、假手术组、生理盐水组、低右组和清蛋白组5组（每组n=8）,处理方法同上,观察休克组、假手术组、生理盐水组、低右组、清蛋白组大鼠7d生存情况,计算各组大鼠7d生存率。结果：（1）与对照组大鼠比较,休克组大鼠6h、12h、24h时血清TNF-α、IL-6、IL-1β、IL-10水平均升高（P<0.05）,且12h达到高峰水平,休克组大鼠血清IL-4水平各观察时间点无差别（P>0.05）。（2）生理盐水组、低右组、清蛋白组大鼠6h时血清TNF-α水平有所升高与休克组大鼠之间差异无统计学意义（P>0.05）,但随着时间推移12h、24h时TNF-α水平逐渐回落,较休克组大鼠血清TNF-α水平降低（P<0.05）,且表现为高峰提前出现,峰值降低,但三个液体复苏组间无统计学差异（P>0.05）。（3）生理盐水组、低右组、清蛋白组大鼠12h、24h时血清IL-6水平回落,低于休克组大鼠血清TNF-α水平（P<0.05）,三个液体复苏组间无统计学差异（P>0.05）。（4）生理盐水组、低右组大鼠6h、12h、24h时血清IL-1β水平与休克组大鼠比较均降低（P<0.05）,清蛋白组大鼠早期（6h时）血清IL-1β水平与休克组大鼠差异无统计学意义（P>0.05）,随时间进展,12h、24h时血清IL-1β水平低于休克组大鼠（P<0.05）。三组干预组之间无统计学差异（P>0.05）。（5）低右组大鼠6h、12h、24h时血清IL-10水平与休克组大鼠比较均升高（P<0.05）,清蛋白组大鼠早期（6h时）血清IL-10水平较休克组高（P<0.05）,生理盐水组大鼠各观察时间点与休克组比较均无统计学差异（P>0.05）。其中在各干预组间,清蛋白组大鼠早期（6h时）血清IL-10水平升高最明显（P<0.05）,低右组大鼠晚期（24h时）血清IL-10水平升高最明显（P<0.05）。（6）三个干预组大鼠6h、12h血]1清IL-4水平与休克组大鼠比较均无统计学差异（P>0.05）,晚期（24h）各干预组血清IL-4水平均高于休克组大鼠（P<0.05）,但三组干预组间无统计学差异（P>0.05）。（7）从7d生存率来看,各干预组大鼠存活率明显高于休克组大鼠（P<0.05）,各干预组间大鼠存活率无统计学差异（P>0.05）。结论：脓毒性休克早期,促炎因子与抗炎因子均有表达,随着脓毒性休克的发展,促炎因子升高越明显；不同液体复苏（生理盐水、低分子右旋糖酐及人血清白蛋白）,促炎因子可逐渐下降到正常,抗炎因子逐渐升高,特别是IL-10水平呈较高水平的表达。晶体液与胶体液（生理盐水、低分子右旋糖酐及人血清白蛋白）复苏对细胞因子的影响无明显差别。脓毒性休克早期液体复苏能降低脓毒症大鼠的死亡率。
二、脓毒症大鼠多器官白介素18表达及其与内毒素血症的关系（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、脓毒症大鼠多器官白介素18表达及其与内毒素血症的关系（论文提纲范文）
（1）FECH基因IVS3-48突变及KIM-1、NGAL与高温高湿运动所致肝肾损伤相关性研究（论文提纲范文）
| 英文缩略词表 |
| 中文摘要 |
| abstract |
| 一、FECH基因多态性与中国汉族青年男性热应激损伤的关联性研究 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 二、高温高湿环境下运动所致组织器官损伤早期损伤分子研究 |
| 前言 |
| 对象与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 文献综述 急性肾损伤早期生物学标志物的研究进展 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
（2）乌司他丁通过抑制NLRP3活化减轻脓毒症肠道炎症反应的研究（论文提纲范文）
| 中英文缩略词对照表 |
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 研方内容与方法 |
| 1 研究对象 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 实验仪器 |
| 1.3 实验试剂 |
| 2.实验方法 |
| 2.1 物品准备及实验分组 |
| 2.2 脓毒症模型的构建 |
| 2.3 标本的获取及保存 |
| 2.4 ELISA法测各组大鼠血清中IL-1β、TNF-α、I-FABP的表达水平 |
| 2.5 苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠肠道病理改变 |
| 2.6 Western Blot 法测定大鼠小肠组织 NF-κB p65 及 NLRP3 炎症小体蛋白的表达 |
| 2.7 免疫组化(IHC)法检测肠道组织 Claudin-1、Occludin、NLRP3、Caspase-1、ASC 的表达水平 |
| 3 质量控制 |
| 4 统计方法 |
| 5 技术路线图 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 综述 脓毒症肠道功能障碍的研究进展 |
| 参考文献 |
| 攻读硕士学位期间的成果 |
| 导师评阅表 |
（3）原花青素β2对百草枯所致急性呼吸窘迫综合征的保护作用及机制研究（论文提纲范文）
| 英文缩略词表 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 第一部分 百草枯所致ARDS模型的建立及原花青素β2的干预作用 |
| 1 引言 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 动物及材料 |
| 2.2 实验动物分组及处理 |
| 2.3 实验方法 |
| 2.4 统计分析 |
| 3.结果 |
| 3.1 大鼠一般情况监测 |
| 3.2 肺组织大体观察 |
| 3.3 肺湿干比 |
| 3.4 各组大鼠肺通透指数的改变 |
| 3.5 各组大鼠肺组织及肺泡灌洗液中炎症细胞的变化 |
| 3.6 肺组织病理学观察及肺损伤评分 |
| 4 讨论 |
| 4.1 ARDS模型的建立与评价 |
| 4.2 百草枯与ARDS |
| 4.3 原花青素β2对肺通透性的影响 |
| 4.4 原花青素β2对炎症反应的影响 |
| 4.5 原花青素β2对百草枯所致ARDS的治疗作用 |
| 5 结论 |
| 第二部分 原花青素β2改善百草枯所致急性呼吸窘迫综合征的机制研究 |
| 1 引言 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 实验药品与试剂 |
| 2.2 溶液配制 |
| 2.3 实验仪器 |
| 2.4 实验方法 |
| 2.5 统计分析 |
| 3 结果 |
| 3.1 原花青素β2对百草枯所致中性粒细胞炎症和氧化应激的影响 |
| 3.2 原花青素对百草枯中毒大鼠肺泡灌洗液中IL-1β、IL-18含量的影响 |
| 3.3 原花青素对百草枯中毒大鼠肺组织中IL-1β、IL-18 mRNA的影响 |
| 3.4 原花青素对百草枯中毒大鼠肺组织中NLRP3、ASC、caspase-1水平的影响 |
| 4 讨论 |
| 4.1 氧化应激与ARDS |
| 4.2 原花青素β2通过抗氧化应激作用减轻肺损伤 |
| 4.3 NLRP3炎性小体与ARDS |
| 4.4 IL-1β与ARDS |
| 4.5 IL-18与ARDS |
| 5 结论 |
| 第三部分 NLRP3炎性小体在百草枯所致急性呼吸窘迫综合征中的作用研究 |
| 1 引言 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 实验材料与动物分组 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.3 统计分析 |
| 3 结果 |
| 3.1 静默NLRP3基因对大鼠一般状况的影响 |
| 3.2 静默NLRP3基因对肺湿干比的影响 |
| 3.3 静默NLRP3基因对肺通透性的影响 |
| 3.4 静默NLRP3基因对肺泡灌洗液PMN的影响 |
| 3.5 静默NLRP3基因对肺组织中IL-1β与IL-18的表达情况的影响 |
| 4 讨论 |
| 5 结论 |
| 本课题的创新点与局限性 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
| 综述 急性呼吸窘迫综合征发病机制及治疗的研究进展 |
| 参考文献 |
（4）抗凝血酶Ⅲ预测脓毒症相关性急性肾损伤的临床研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 英文缩略词表 |
| 绪论 |
| 参考文献 |
| 第一章 诊断脓毒症相关性急性肾损伤的生物标志物:系统评价和荟萃分析 |
| 1 引言 |
| 2 资料与方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 5 小结 |
| 参考文献 |
| 第二章 ATⅢ对老年脓毒症患者AKI及预后的预测 |
| 1 引言 |
| 2 材料和方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 5 小结 |
| 参考文献 |
| 第三章 基于ATⅢ建立脓毒症相关性急性肾损伤诊断模型 |
| 1 引言 |
| 2 材料和方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 5 小结 |
| 参考文献 |
| 全文结论 |
| 本研究的不足与展望 |
| 附表1 APACHEⅡ评分计算方法 |
| 附表2 SOFA评分计算方法 |
| 附表3 急性肾损伤的标准 |
| 附表4 AKIN AKI分期标准 |
| 附表5 KDIGO AKI分期标准 |
| 附表6 RIFLE AKI分期标准 |
| 攻读学位期间发表文章 |
| 攻读学位期间主持课题 |
| 攻读学位期间获得荣誉 |
| 致谢 |
（5）富马酸二甲酯减轻LPS诱导的心肌细胞线粒体损伤的机制研究（论文提纲范文）
| 致谢 |
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 缩写、符号清单、术语 |
| 1.前言 |
| 2.方法和材料 |
| 3.实验结果 |
| 3.1 DMF抑制LPS诱导的H9C2 细胞损伤 |
| 3.2 DMF抑制LPS诱导的H9C2 细胞凋亡 |
| 3.3 DMF诱导心肌细胞Nrf2 及其下游蛋白HO-1 的激活 |
| 3.4 Nrf2-si RNA对心肌细胞Nrf2和HO-1 表达的影响 |
| 3.5 Nrf2 参与了DMF对抗细胞凋亡和促进细胞生存率的作用 |
| 3.6 DMF抑制LPS诱导的氧化应激和炎症 |
| 3.7 ERK1/2 途径参与了DMF诱导的Nrf2/HO-1 激活 |
| 3.8 DMF抑制LPS诱导的线粒体片段化增加和线粒体呼吸功能障碍 |
| 5.讨论 |
| 6.结论 |
| 参考文献 |
| 脓毒症的免疫抑制机制与治疗研究进展 |
| 参考文献 |
| 个人简历 |
（6）Caspase-1介导的细胞焦亡在脓毒症心肌损伤中的作用与机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 研究材料与方法 |
| 1.实验材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 主要实验仪器 |
| 1.3 主要实验试剂 |
| 2.实验方法 |
| 2.1 抑制剂Ac-YVAD-cmk的配制及注射 |
| 2.2 动物脓毒症模型的制备 |
| 2.3 动物标本的提取和处理 |
| 2.4 心肌组织病理学形态的改变 |
| 2.5 心肌组织匀浆的ELISA检测 |
| 2.6 心肌组织蛋白的WB实验 |
| 2.7 心肌组织电镜切片的制作与观察 |
| 3.统计学分析 |
| 4 技术路线图 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 作者简介及读研期间主要科研成果 |
| 致谢 |
（7）探究PI3K/AKT在大鼠腹腔感染性脓毒症急性肾损伤发病中的作用（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 缩略语/符号说明 |
| 前言 |
| 研究现状、成果 |
| 研究目的、方法 |
| 一、建立腹腔感染性脓毒症大鼠模型 |
| 1.1 对象和方法 |
| 1.1.1 主要试剂 |
| 1.1.2 实验仪器 |
| 1.1.3 实验动物 |
| 1.1.4 动物模型制备及分组 |
| 1.1.5 标本收集 |
| 1.1.6 观察指标 |
| 1.1.7 检测方法 |
| 1.1.8 统计学方法 |
| 1.2 结果 |
| 1.2.1 对CLP组及假手术组大鼠生命体征的观察 |
| 1.2.2 假手术组及CLP各组大鼠血清炎症因子TNF-α浓度水平的变化 |
| 1.2.3 假手术组及CLP各组大鼠血清炎症因子IL-1β浓度水平的变化·· |
| 1.3 讨论 |
| 1.3.1 TNF-α与脓毒症的关系 |
| 1.3.2 IL-1β与脓毒症的关系 |
| 1.4 小结 |
| 二、探究PI3K/AKT在脓毒症相关AKI发病中的作用 |
| 2.1 实验对象和方法 |
| 2.1.1 动物模型的制备与分组 |
| 2.1.2 实验试剂及仪器 |
| 2.1.3 标本收集 |
| 2.1.4 观察指标 |
| 2.1.5 检测方法 |
| 2.1.6 统计学方法 |
| 2.2 结果 |
| 2.2.1 CLP各组及假手术组肾脏组织Scr、BUN浓度水平 |
| 2.2.2 CLP各组及假手术组大鼠肾脏组织PI3KmRNA、AKTmRNA的表达水平 |
| 2.2.3 蛋白质免疫印迹实验检测CLP各组及假手术组大鼠肾脏组织NLRP3、ASC、Caspase-1蛋白表达水平 |
| 2.2.4 免疫组织化学技术检测CLP各组及假手术组大鼠肾脏组织NLRP3、ASC、Caspase-1蛋白表达水平 |
| 2.2.5 ELISA法检测CLP各组及假手术组大鼠血清中IL-18的浓度水平 |
| 2.3 讨论 |
| 2.3.1 PI3K/AKT通路与脓毒症相关AKI的关系 |
| 2.3.2 NLRP3炎性小体与脓毒症相关AKI的关系 |
| 2.3.3 IL-18与脓毒症相关AKI的关系 |
| 2.4 小结 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 发表论文和参加科研情况说明 |
| 综述 PI3K/AKT及其下游NLRP3炎性小体在脓毒症中的作用及影响的研究进展 |
| 综述参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（8）Cs菌丝粉对大鼠脓毒性急性肾损伤中klotho蛋白表达的影响（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 英文缩略表 |
| 引言 |
| 第1章 实验研究 |
| 1.1 材料与方法 |
| 1.1.1 材料 |
| 1.1.2 实验方法 |
| 1.1.3 病理切片制作和染色 |
| 1.1.4 图像分析 |
| 1.1.5 计量分析 |
| 1.1.6 统计学处理 |
| 1.2 结果 |
| 1.2.1 各组大鼠术后基本表现 |
| 1.2.2 病理组织学变化 |
| 1.2.3 各组生存率变化 |
| 1.3 讨论 |
| 1.4 结论 |
| 参考文献 |
| 第2章 综述 脓毒血症致全身各系统发病机制及其治疗的研究 |
| 2.1 呼吸系统 |
| 2.1.1 概况 |
| 2.1.2 机制 |
| 2.1.3 治疗 |
| 2.2 消化系统 |
| 2.3 循环系统 |
| 2.4 神经系统 |
| 2.5 血液系统 |
| 2.6 泌尿系统 |
| 参考文献 |
| 附录 附图 |
| 致谢 |
| 导师简介 |
| 作者简介 |
| 学位论文数据集 |
（9）C/EBPs诱饵寡核苷酸对脓毒症小鼠多器官损伤的保护作用及机制研究（论文提纲范文）
| 本课题受以下基金资助 |
| 摘要 |
| Abstract |
| 目录 |
| 符号说明 |
| 前言 |
| 技术路线 |
| 1 C/EBPS DECOY ODNS对LPS所致RAW264.7细胞炎症反应的影响 |
| 1.1 材料与方法 |
| 1.2.1 材料 |
| 1.2.2 方法 |
| 1.2 结果 |
| 1.2.1 LPS刺激下RAW264.7细胞内C/EBPs蛋白表达水平及DNA结合活性的变化 |
| 1.2.2 哑铃形C/EBPs decoy ODNs及mutant ODNs的合成及标记 |
| 1.2.3 哑铃形C/EBPs decoy ODNs及mutant ODNs转染RAW264.7细胞 |
| 1.2.4 C/EBPs decoy ODNs转染对LPS所致RAW264.7细胞炎症反应的影响 |
| 1.2.5 哑铃形C/EBPs decoy ODNs转染对LPS刺激下RAW264.7细胞内C/EBPs炎症相关靶基因mRNA表达的影响 |
| 1.3 讨论 |
| 1.3.1 C/EBPs在炎症过程中的作用 |
| 1.3.2 转录因子诱饵策略(transcription factor decoy strategy,TFDs) |
| 1.3.3 C/EBPs decoy ODNs对炎症的抑制作用 |
| 1.4 小结 |
| 2 C/EBPS DECOY ODNS对脓毒症小鼠多器官损伤的保护作用 |
| 2.1 材料与方法 |
| 2.1.1 材料 |
| 2.1.2 方法 |
| 2.2 结果 |
| 2.2.1 CLP脓毒症小鼠存活率的观察 |
| 2.2.2 C/EBPs decoy ODNs对脓毒症小鼠多器官损伤的保护作用 |
| 2.2.3 C/EBPs decoy ODNs对脓毒症小鼠肺组织内C/EBPs炎症相关靶基因mRNA表达的影响 |
| 2.3 讨论 |
| 2.3.1 裸DNA注射 |
| 2.3.2 脓毒症治疗现状 |
| 2.3.3 C/EBPs decoy ODNs对脓毒症小鼠多器官损伤及全身炎症反应的保护作用 |
| 2.4 小结 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述(一) |
| 参考文献 |
| 综述(二) |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间主要的研究成果 |
| 致谢 |
（10）脓毒性休克早期大鼠血清细胞因子变化及不同液体复苏后对其影响的研究（论文提纲范文）
| 英文缩略词表 |
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 |
四、脓毒症大鼠多器官白介素18表达及其与内毒素血症的关系（论文参考文献）
- [1]FECH基因IVS3-48突变及KIM-1、NGAL与高温高湿运动所致肝肾损伤相关性研究[D]. 吕雅婷. 福建医科大学, 2021(02)
- [2]乌司他丁通过抑制NLRP3活化减轻脓毒症肠道炎症反应的研究[D]. 李祥. 新疆医科大学, 2021(08)
- [3]原花青素β2对百草枯所致急性呼吸窘迫综合征的保护作用及机制研究[D]. 江银玲. 安徽医科大学, 2020(04)
- [4]抗凝血酶Ⅲ预测脓毒症相关性急性肾损伤的临床研究[D]. 谢云. 上海交通大学, 2020(01)
- [5]富马酸二甲酯减轻LPS诱导的心肌细胞线粒体损伤的机制研究[D]. 伏春艳. 浙江大学, 2020(02)
- [6]Caspase-1介导的细胞焦亡在脓毒症心肌损伤中的作用与机制研究[D]. 翟明见. 皖南医学院, 2020(01)
- [7]探究PI3K/AKT在大鼠腹腔感染性脓毒症急性肾损伤发病中的作用[D]. 杨蕊. 天津医科大学, 2018(02)
- [8]Cs菌丝粉对大鼠脓毒性急性肾损伤中klotho蛋白表达的影响[D]. 卢海源. 河北联合大学, 2014(01)
- [9]C/EBPs诱饵寡核苷酸对脓毒症小鼠多器官损伤的保护作用及机制研究[D]. 高敏. 中南大学, 2013(02)
- [10]脓毒性休克早期大鼠血清细胞因子变化及不同液体复苏后对其影响的研究[D]. 钱程. 广西医科大学, 2013(S1)